原装Qiagen试剂盒RNeasy Mini Kit (50) 分子生物试剂
- 产品型号: 74104
- 简单描述
- 原装Qiagen试剂盒RNeasy Mini Kit (50)从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA数分钟内快速纯化得到高品质总RNA即用型RNA在各种下游应用中表现良好少量起始样本,RNA产量稳定无需酚/ 氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无氯化锂或者乙醇沉淀步骤
原装Qiagen试剂盒RNeasy Mini Kit (50)
RNeasy Mini实验方案。
使用RNeasy Mini Kit纯化的总RNA具有高质量,适用于多种下游操作。实验方案还包括部分纯化的RNA、体外转录本和酶反应RNA的回收。不提供溶壁酶、酵母裂解酶或玻璃珠(酵母样本需要)。因样本来源的发育阶段、种属和生长条件的不同,从样本中分离的RNA量也各异。由于RNA酶步骤富集的RNA种属>200 nt,因此RNA产量不包括5S rRNA、tRNA或其他低分子量RNA。
从多种样本中纯化高品质RNA。
使用RNeasy Maxi Kit纯化的总RNA的甲醛琼脂糖凝胶电泳和northern印迹。从各种来源的样本中分离总RNA(10 µg)上样至各泳道。所有组织均来源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiae;E. coli菌株:HB101。32P标记的探针识别的(G)GAPDH;(E)翻译延长因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分别由瑞士巴塞尔大学的P. Philippsen和德国蒂宾根马克斯-普朗克生物学研究所的U. Henning提供。)B. subtilis未采用探针检测。M:0.24–9.5 kb RNA分子量标准。胚胎、Huh7和HeLa细胞泳道中的7.5 kb条带(图示)为核前体RNA。
对少至100个细胞的RNA进行RT-PCR。
使用RNeasy Mini Kit从图示数目的HeLa细胞中分离的总RNA的RT-PCR。使用不含RNA酶的DNA酶酶切10 µl(1/5)洗脱液,并使用oligo-dT引物进行逆转录。使用2.5 µl(1/20)的cDNA混合物进行50 µl PCR。扩增452 bp的GAPDH片段。C-:阴性对照;C+:阳性对照;M:100 bp分子量标准。
RNeasy Mini离心柱。
RNeasy Mini Kit中提供RNeasy Mini离心柱。
原装Qiagen试剂盒RNeasy Mini Kit (50)
RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本,或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA。
RNeasy Mini Kit纯化得到的总RNA产量
样本来源 | 起始材料 | 平均产量(µg) |
---|---|---|
动物细胞 LMH HeLa COS-7 淋巴细胞(未受激) |
1 x 106 1 x 106 1 x 106 1 x 106 |
12 15 35 0.5 |
小鼠组织 肝 肺 脾 |
10 mg 10 mg 10 mg |
40 10 35 |
真菌细胞 S. cerevisiae |
1 x 107 | 25 |
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了ben酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA,并且DNA残留水平达到zui低。
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:
特点
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参数
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Applications | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
Elution volume | 30–100 µl |
Format | Spin column |
Main sample type | Tissue, cells |
Processing | Manual (centrifugation) |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | Total RNA |
Sample amount | 0.5–30 mg |
Technology | Silica technology |
Time per run or per prep | 20 minutes |
Yield | Varies |