DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒 分子生物试剂
- 产品型号: 69506
- 简单描述
- DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA为各种类型样本提供标准化的纯化方法即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA高品质DNA经过优化的操作方法适合处理多种起始样本可选择离心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒
从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA
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为各种类型样本提供标准化的纯化方法
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即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA
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高品质DNA
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经过优化的操作方法适合处理多种起始样本
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可选择离心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理,无需机械破碎,减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法,获得高重复性、高纯度的DNA,用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。
DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒
DNA产量。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从100 µl全血中纯化DNA。羊:从50 µl羊全血中纯化DNA。使用超过50 µl的羊血时,DNA产量没有明显增加。鸡:从5 µl鸡全血中纯化DNA。鸟类血液中含有核红细胞,因此其DNA产量比哺乳动物的高。
DNeasy Mini和96实验流程。
高效的16重PCR。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从人类K562细胞中纯化基因组DNA。使用QIAGEN Multiplex PCR Kit对图示量的DNA和16对引物进行多重PCR,反应平行进行两次。M: 100 bp ladder。
高品质DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从图示的动物样本中纯化DNA,并进行琼脂糖凝胶电泳分析。对于每个样本,都对0.5 µg未经过酶处理的DN(左侧)、或1 µg经过EcoRI处理的DNA(右侧)进行了分析。M: lambda-HindIII。
对马进行基因分型。
从三批棕色马的鬃毛中纯化获得DNA,并使用MSH和ASIP PCR对毛色基因型进行分析。[A] MSH PCR产物用TaqI酶处理。马1和2确定为Ee杂合体,携带红色毛色的隐性等位基因e。[B]对ASIP PCR产物分析得出,马1和2为Aa杂合体,携带黑色毛色的隐性等位基因a。+:黑色马Ee aa阳性对照。–阴性对照。M:标记物。
高通量纯化。
使用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit从24个小鼠尾和24个大鼠尾样本中纯化DNA。在1%的琼脂糖凝胶上进行DNA电泳分析。M: lambda-HindIII。
Real-time PCR。
Borrelia sp.是由蜱携带的病原体,可导致人类或其他哺乳动物患莱姆病。使用DNeasy Blood & Tissue Kit从蜱中纯化DNA。在LightCycler仪器上使用artus Borrelia LC PCR Kit,通过real-time PCR检测Borrelia DNA。阳性样本曲线的最di处对应每次PCR反应5个拷贝DNA。
对猪进行基因分型。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从猪耳刻样本中纯化DNA,然后使用Biotype AG公司的Animaltype Pig PCR Amplification Kit和QIAGEN HotStarTaq DNA Polymerase进行扩增。电泳图显示:12个多态性四核苷酸微卫星和一个性别鉴定标记物(SBH23)的遗传指纹图谱。
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量,如动物毛发和培养细胞、固定的组织,或者革兰氏阳性和阴性细菌。独te的在线实验方案参考文库,可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA。
样本来源 | 样本量 | DNA(µg) |
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哺乳动物血液 | 100 µl | 3–6 |
鸟类血液 | 5 µl | 9–40 |
HeLa细胞 | 2 x 106 | 15–25 |
肝脏 | 25 mg | 10–30 |
脑 | 25 mg | 15–30 |
肾脏 | 25 mg | 15–30 |
脾脏 | 10 mg | 5–30 |
小鼠尾 | 1.2 cm(尾部) | 10–25 |
大鼠尾 | 0.6 cm(尾部) | 20–40 |
猪耳 | 25 mg | 10–30 |
马毛 | 10 根毛发 | 2–4 |
鱼鳍 | 20 mg | 10–20 |
鱼卵(鲭鱼) | 10 mg | 5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程,包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂,能在标准多重real-time PCR中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果,从转基因小鼠的实验室分析到家畜的育种项目和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。
DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中,包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌,快速纯化总DNA(如,基因组、线粒体和病原体等)。
DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性,经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件,旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上,并且优化去除污染物和酶抑制剂。
纯化过程不需要苯fen或氯仿抽提或乙醇沉淀,仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96或192个样本。
可靠的硅胶膜技术,利用便捷的离心柱或96孔板形式,确保了快速可重复的DNA纯化,不再需要有机抽提和乙醇沉淀。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件,以提供的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中,DNA选择性地结合到DNeasy膜上,污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后,用水或缓冲液将DNA洗脱,待用。
DNeasy Mini离心柱预装在收集管中,并且单独封存,确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式进行高通量处理。
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA,可直接用于多种下游分析,包括:
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生命科学研究
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家畜育种
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种系基因分型研究
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兽医病理分析研究
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常规的应用检测
特点
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参数
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Applications | PCR, real-time PCR, genotyping |
Elution volume | 100–200 µl |
Format | 96-well plate, spin column |
Main sample type | Blood, tissue |
Processing | Manual |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | DNA |
Sample amount | 100 µl/25 mg |
Technology | Silica technology |
Time per run or per prep | 20 minutes – 1 hour |
Yield | 6 µg/30 µg |