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Glutamate Assay Kit-WST
Glutamate Assay Kit-WST
- 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
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- 細胞機能解析
- 細胞内代謝
グルタミン酸測定キット
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製品コードG269 Glutamate Assay Kit-WST
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 100 tests | ￥53,500 | 345-09621 |
| 100 tests | ・Dye Mixture ・Glutamate Standard ・Enzyme ・Assay Buffer ・Reconstitution Buffer ・lysis Buffer ・Filtration Tube |
×1 300 ×l×1 ×1 7.5 ml×1 750 ×l×1 25 ml×1 ×24 |
|---|
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マニュアル
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取扱説明書 日本語
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Manual English
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パンフレット
技術情報
グルタミン酸の測定原理
本キットは、グルタミン酸量に応じ発色したWSTホルマザンを吸光度測定することで、細胞培養液や細胞内のグルタミン酸を検出することができます。またキットにはグルタミン酸標準液が含まれており、標準曲線を作成しサンプル中のグルタミン酸濃度を定量することができます。
技術や使用製品に関する補足
学会発表ポスター
WSTを用いた細胞の代謝解析
フェロトーシス研究におけるグルタミン酸とグルタチオンの測定例
エラスチン処理により、シスチン/ グルタミン酸トランスポーター(xCT) を阻害すると、鉄依存性の細胞死であるフェロトーシスが誘導されることが知られています。エラスチン処理したA549 細胞において、グルタミン酸放出量および細胞内グルタチオン量を確認したところ、エラスチン処理した細胞はグルタミン酸放出量が減少し、シスチンの取り込みが阻害されたことにより、グルタチオン量が減少する結果が得られました。
技術や使用製品に関する補足
フェロトーシス研究において、脂質過酸化を蛍光イメージングで検出する試薬「Liperfluo」を使用した論文報告が増えています。
参考文献
| 文献No. | 対象サンプル | 引用(リンク) |
|---|---|---|
| 1 | 食品 (出汁、味噌汁、醤油、トマトジュース) |
K. Danchana, H. Iwasaki, K. Ochiai, H. Namba, T. Kaneta, "Determination of glutamate using paper-based microfluidic devices with colorimetric detection for food samples", Microchem. J., 2022, doi:10.1016/j.microc.2022.107513. |
| 2 | 細胞培養上清 (骨髄由来抑制細胞) |
Z. Xie, T. Kawasaki, H. Zhou, D. Okuzaki, N. Okada and M. Tachbana, "Targeting GGT1 Eliminates the Tumor-Promoting Effect and Enhanced Immunosuppressive Function of Myeloid-Derived Suppressor Cells Caused by G-CSF", Front. Pharmacol., 2022, doi:10.3389/fphar.2022.873792. |
よくある質問
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Q
1キットあたり測定可能なサンプル数を教えて下さい。
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A
検量線およびサンプルの測定をそれぞれn=3で行った場合、96ウェルプレートで24サンプルを測定できます。
(検量線の測定濃度を下表の通り、8点で作成した場合)Glutamate standard solutionとサンプルのレイアウト例(n=3)
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Q
Working solutionは保存できますか？
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A
Working solutionは保存できません。用時調製して下さい。また、光に不安定であるため、調製後は遮光して下さい。
※Working solutionは調製後、遮光下であれば室温で4時間安定です。 光に暴露させた場合、溶液の色が褐色味を帯びてきます。
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Q
D-Glutamateの定量はできますか。
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A
本製品はL-Glutamate定量用のため、D-Glutamateの定量はできません。
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Q
還元物質を含むサンプルは測定できますか。
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A
サンプル中に還元性を持つ物質が含まれていると、色素WSTが誤発色して正確なグルタミン酸濃度の定量ができません。
培地に、還元性を持つ薬剤等を添加して実験を行う場合、バックグラウンドコントロールとして細胞を含まない培地＋薬剤のみの試薬ブランクを一緒に測定して下さい。
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Q
測定試料は保存できますか。
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A
細胞培養上清サンプルの場合、冷凍(-20℃)で1ヶ月保存可能であることを確認しております。
細胞ライセートサンプルの場合、冷凍(-20℃)で1ヶ月保存可能であることを確認しております。ただし、保存を行う前に、キット付属のFiltration Tubeにて除タンパク処理を行って下さい。
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Q
サンプルのウェルが発色しません。
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A
本キットで定量可能なグルタミン酸濃度は5 µmol/l以上です。グルタミン酸濃度が5 µmol/l以下の測定試料は本キットでは定量できません。
また、測定試料を希釈している場合、希釈後の測定試料に含まれているグルタミン酸量が5 µmol/lよりも少ない可能性があります。
希釈倍率を下げ、測定試料の濃度を定量可能範囲以上にして下さい。
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Q
450 nm以外の吸収フィルターで測定できますか。
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A
450 nm以外では、490 nmのフィルターで使用可能です。
ただし、吸光度値は450 nmで測定した場合と比較し低くなります。（下図参照）
取扱条件
| 保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意 |
関連製品
この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。
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グルコース測定キット
Glucose Assay Kit-WST
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NADP/NADPH 測定キット
NADP/NADPH Assay Kit-WST
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ミトコンドリア膜電位検出キット
JC-1 MitoMP Detection Kit
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過酸化脂質検出蛍光試薬
Liperfluo