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SPiDER-βGal
03 分子生物学関連試薬
SPiDER-βGal
- 分子生物学関連試薬
- 細胞機能解析
- 細胞老化
β-galactosidaseの検出試薬
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製品コードSG02 SPiDER-βGal
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CAS番号1824699-57-1
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化学名(2S,3R,4S,5R,6R)-2-{[3′-(Diethylamino)-5′-(fluoromethyl)-3H-spiro(isobenzofuran-1,9′-xanthen)-6′-yl]oxy}-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5-triol
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分子式・分子量C31H34FNO8=567.60
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 20 μg x 3 | ￥49,100 | 343-09161 |
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取扱説明書 日本語
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Manual English
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アプリケーション β-ガラクトシダーゼ検出試薬（基質）の選択ガイド – 発生学 –
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試薬選択ガイド β-ガラクトシダーゼ検出試薬（基質）の選択ガイド
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試薬選択ガイド β-ガラクトシダーゼ検出試薬の比較データ
技術情報
原理
図1 SPiDER-βGalの細胞染色原理
SPiDER-βGal は生細胞膜を透過した後、細胞中のβ-galactosidaseによる酵素反応を受け、その中間体はタンパク質中の求核性基と共有結合を形成することで細胞内に滞留する。
参考文献
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| 文献No. | 対象サンプル | 装置 | 引用(リンク) |
|---|---|---|---|
| 1 | 細胞・組織 (腸管幹細胞・幼虫の翼盤) |
蛍光顕微鏡 | T. Doura, M. Kamiya, F. Obata, Y. Yamaguchi, T. Y. Hiyama, T. Matsuda, A. Fukamizu, M. Noda, M. Miura, Y. Urano, "Detection of LacZ-Positive Cells in Living Tissue with Single-Cell Resolution.", Angew Chem Int Ed Engl., 2016, doi: 10.1002/anie.201603328. |
| 2 | 細胞 (内分泌細胞) |
蛍光顕微鏡 | H. Omori, S. Ogaki, D. Sakano, M. Sato, K. Umeda, N. Takeda, N. Nakagata, S. Kume, "Changes in expression of C2cd4c in pancreatic endocrine cells during pancreatic development.", FEBS Lett., 2016, doi: 10.1002/1873-3468.12271. |
| 3 | 細胞 (SHIN3; SKOV3; OVCAR3) |
蛍光顕微鏡/フローサイトメーター | Y. Nakamura, A. Mochida, T. Nagaya, S. Okuyama, F. Ogata, P. L. Choyke, H. Kobayashi, "A topically-sprayable, activatable fluorescent and retaining probe, SPiDER-βGal for detecting cancer; Advantages of anchoring to cellular proteins after activation", Oncotarget., 2017, doi: 10.18632/oncotarget.17080. |
| 4 | 組織 (マウス腎臓) |
蛍光顕微鏡 | S. Lu, S. Liu, A. Wietelmann, B. Kojonazarov, A. Atzberger, C. Tang, R. T. Schermuly, H. J. Gröne, S. Offermanns, "Developmental vascular remodeling defects and postnatal kidney failure in mice lacking Gpr116 (Adgrf5) and Eltd1 (Adgrl4)", PLoS ONE., 2017, 10.1371/journal.pone.0183166. |
| 5 | 組織 (マウス脂肪組織) |
蛍光顕微鏡 | T. Sugizaki, S. Zhu, G. Guo, A. Matsumoto, J. Zhao, M. Endo, H. Horiguchi, J. Morinaga, Z. Tian, T. Kadomatsu, K. Miyata, H. Itoh & Y. Oike, "Treatment of diabetic mice with the SGLT2 inhibitor TA-1887 antagonizes diabetic cachexia and decreases mortality", NPJ Aging Mech Dis., 2017, DOI:10.1038/s41514-017-0012-0. |
| 6 | 細胞 (VZ/SVZ) |
フローサイトメーター | Y. Nakatani, H. Kiyonari and T. Kondo, "Ecrg4 deficiency results in extended replicative capacity of neural stem cells in a Foxg1-dependent manner", Development., 2019, doi: 10.1242/dev.168120. |
| 7 | 細胞 (アフリカツメガエル; 卵母細胞) |
蛍光顕微鏡 | A. A.Tokmakov AA and K. I. Sato, "Activity and intracellular localization of senescence-associated β-galactosidase in aging Xenopus oocytes and eggs.", Exp. Gerontol.., 2019, 119, 157. |
| 8 | 細胞 (マウス初代平滑筋細胞) |
蛍光顕微鏡/フローサイトメーター | Y. Han, T. Bedarida, Ye Ding, Q. Wang, P. Song, and M. H. Zou, "β-Hydroxybutyrate Prevents Vascular Senescence through hnRNP A1-Mediated Upregulation of Oct4", Molecular Cell., 2019, 71, 1064–1078. |
| 9 | 細胞 (内皮細胞) |
蛍光顕微鏡 | A. J. Barinda, K. Ikeda, D. B. Nugroho, D. A. Wardhana, N. Sasaki, S. Honda, R. Urata, S. Matoba, K. Hirata and N. Emoto, "Endothelial progeria induces adipose tissue senescence and impairs insulin sensitivity through senescence associated secretory phenotype", Nat. Commun., 2020, 11, 481. |
| 10 | 組織 (マウス筋組織) |
蛍光顕微鏡 | Y. Saito, T. Chikenji, T. Matsumura, M. Nakano, and M. Fujimiya, "Exercise enhances skeletal muscle regeneration by promoting senescence in fibro-adipogenic progenitors", Nat. Commun., 2020, doi:10.1038/s41467-020-14734-x. |
| 11 | 細胞 (ヒト臍帯静脈内皮細胞) |
フローサイトメーター | M. Suda, I. Shimizu, G. Katsuumi, Y. Yoshida, Y. Hayashi, R. Ikegami, N. Matsumoto, Y. Yoshida, R. Mikawa, A. Katayama, J. Wada, M. Seki, Y. Suzuki, A. Iwama, H. Nakagami, A. Nagasawa, R. Morishita, M. Sugimoto, S. Okuda, M. Tsuchida, K. Ozaki, M. Nakanishi-Matsui and T. Minamino, "Senolytic vaccination improves normal and pathological age-related phenotypes and increases lifespan in progeroid mice", Nature Aging, 2021, doi:10.1038/s43587-021-00151-2. |
| 12 | 細胞 (MG63 cells) |
蛍光顕微鏡 | H. Nakashima, M. Yasunaga, M. Yoshida, M. Yamaguchi, S. Takahashi, H. Kajiya, S. Tamaoki, and J. Ohno, "Low Concentration of Etoposide Induces Enhanced Osteogenesis in MG63 Cells via Pin1 Activation", J. Hard Tissue Biol., 2021, doi:10.2485/jhtb.30.175. |
| 13 | 細胞 (マウス筋肉細胞) |
蛍光顕微鏡 | V. Moiseeva, A. Cisneros, V. Sica, O. Deryagin, Y. Lai, S. Jung, E. Andres, J. An, J. Segales, L. Ortet, V. Lukesova, G. Volple, A. Benguria, A. Dopazo, S. Aznar-Benitah, Y. Urano, A. d. Sol, M. A. Esteban, Y. Ohkawa, A. L. Serrano, E. Perdiguer & P. Munoz-Canoves, "Senescence atlas reveals an aged-like inflamed niche that blunts muscle regeneration", Nature, 2022, doi:10.1038/s41586-022-05535-x. |
よくある質問
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Q
既存法に対する利点を教えてください。また、既存法との相関性はありますか？
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A
①生細胞に適用できます。同様に生細胞に適用できるGFP融合タンパク質発現細胞を用いて相関性があることを確認しました。
②GFP法と比べて固定化後も蛍光観察ができます。
③既存の低分子β-ガラクトシダーゼ蛍光検出試薬と比較して、「細胞膜透過性」及び「細胞内滞留性」が優れるため、β-ガラクトシダーゼ発現細胞のみを一細胞レベルで染色できます。
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Q
Working solutionは、Hanks’ HEPES以外でも調製できますか？
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A
PBS, HBSSなどが使用できます。
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Q
Working solutionは、どのくらい安定ですか？
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A
保存できません。調整した日のうちに使用してください。
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Q
フローサイトメーターで使用可能ですか？
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A
使用できます。β-ガラクトシダーゼ発現および未発現のHEK細胞の混合試料をフローサイトメーターで測定して、測り分けすることができました。取扱説明書に手順と条件を記載しています。
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Q
固定後、試料の染色はできますか？
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A
可能です。 4%パラホルムアルデヒドやメタノールで固定化しても蛍光観察ができます。固定化によりβ-ガラクトシダーゼ活性は低下しますので、固定化条件の検討を行ってください。
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Q
推奨フィルターを教えてください。
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A
以下のフィルターを推奨します。
・蛍光顕微鏡： 励起（500-540 nm）, 蛍光（500-540 nm）
・フローサイトメーター： 励起（488 nm）, 蛍光（500-540 nm）取扱説明書の「励起/蛍光スペクトル」及び「上記フィルターを用いた蛍光顕微鏡測定例」もご参考ください。
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Q
染色後、試料の固定はできますか？
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A
可能です。 4%パラホルムアルデヒドやメタノールで固定化しても蛍光観察ができます。
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Q
組織染色は可能ですか？
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A
可能です。細胞染色と比べてWorking solution濃度を高くして染色条件をご検討ください（10-20 μmol/Lを目安）。
取扱条件
| 性状： | 本品は赤色～赤紫色固体でアセトニトリル及びジメチルスルホキシドに溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 85.0％ 以上 |
| NMRスペクトル： | 試験適合 |
| 蛍光スペクトル： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷蔵 |
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関連製品
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老化細胞検出キット
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Mitophagy Detection Kit
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