p-HBC

10 酸化還元系発色試薬

p-HBC

• 酸化還元系発色試薬

コリンエステラーゼ活性測定用基質

• 製品コード
  H324　 p-HBC
• CAS番号
  81947-42-4
• 化学名
  p-Hydroxybenzoylcholine iodide
• 分子式・分子量
  C₁₂H₁₈INO₃=351.18

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溶解例

50 mg/100 mL （水）

Q

p-HBCの使用方法を教えてください。

A

－測定例①－
【試薬調整】
・基質緩衝液
50mMバルビタール酸ナトリウム緩衝液(pH8.5)に 1.5mM p-HBC、0.3M NaCl、10mM 4-アミノアンチピリンを含む

・発色液
0.1Mホウ酸カリウム緩衝液(pH9.2)に5mMネオスチグミン、15mM過ヨウ素酸カリウム、2mM p-クロルベンゼンスルホン酸を含む

・標準液（200IU/l）
2mM p-ヒドロキシ安息香酸 水溶液

【測定方法】
基質緩衝液（1.0mL）に各段階の希釈された試料(血清) 0.05mL を加えてよく混合し、
37℃の恒温槽で10分間インキュベートする。
次いで、発色液(2mL)を加え発色させ、試薬ブランク（試料と同様に操作して作る）を
対照として試料溶液の吸光度を505nmで測定する。
既知濃度のp－ヒドロキシ安息香酸標準液を同様の操作で発色させ、
その吸光度を下記の比例計算によりCh-Eの活性値を求める。
＜計算式＞
Ch-E活性値　＝(A試料－Aブランク)／(A標準液－Aブランク)ｘ200
＊Aは吸光度を表す。

○結果例
試料 吸光度 Ch-E活性値(IU/ｌ)
1/5　　0.088　　39
2/5　　0.190　　84
3/5　　0.274　　122
4/5　　0.373　　165
5/5　　0.459　　204
標準液 0.451 　200

－測定例②－
【試薬調整】
・基質緩衝液
50mMバルビタール酸ナトリウム緩衝液(pH8.5)に 1.5mM p-HBC、0.3M NaClを含む

・停止液
蒸留水に30 mM 4－アミノアンチピリンと15 mM ネオスチグミンを溶解する。

・発色液
0.1 Mホウ酸カリウム緩衝液(pH9.2)に15 mM過ヨウ素酸カリウム、2 mM p-クロルベンゼンスルホン酸を含む

・標準液（200 IU/L）
2 mM p-ヒドロキシ安息香酸 水溶液

【測定方法】
基質緩衝液（1.0 mL）に各段階の希釈された試料(血清) 0.05 mLを加えてよく混合し、
37℃の恒温槽で10分間インキュベートする。
次いで、停止液(0.5 mL)を入れる。その後、発色液(2 mL)を加え発色させ、試薬ブランク
試料と同様に操作して作る）を対照として試料溶液の吸光度を505 nmで測定する。
既知濃度のp－ヒドロキシ安息香酸標準液を同様の操作で発色させ、
その吸光度を下記の比例計算によりCh-Eの活性値を求める。

＜計算式＞
Ch-E活性値　＝(A試料－Aブランク)／(A標準液－Aブランク)ｘ200
＊Aは吸光度を表す。

○結果例
試料 吸光度 Ch-E活性値(IU/L)
1/5　　0.177　　78
2/5　　0.346　　153
3/5　　0.511　　226
4/5　　0.704　　312
5/5　　0.866　　384
標準液 0.451 　200