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| ■ 制品内容 (25 μl反应×40次量) |
| Premix Ex Taq™ (Probe qPCR) (2X Conc.)*1 |
500 μl |
| ROX Reference Dye (50X Conc.)*2 |
20 μl |
| ROX Reference Dye II (50X Conc.)*2 |
20 μl |
| Salm P1 Primer (10 μM) |
20 μl |
| Salm P2 Primer (10 μM) |
20 μl |
| Probe for Salm (25X) |
40 μl |
| Salm Positive Control (5×105 copies/μl)*3 |
30 μl |
| RNase Free dH2O |
1 ml |
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*1 内含TaKaRa Ex Taq HS，dNTP Mixture，Mg2+, Tli RNaseH等。
*2 只使用在Life Technologies等的Real Time PCR扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。StepOnePlus Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye，7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II 。使用Thermal Cycler Dice™ Real Time System II 时不必添加。
*3 Salm Positive Control仅作为反应性能监测的对照，浓度仅供参考。实验时请使用阳性标本提取的DNA作为阳性对照。 |
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| 【各种引物序列】 |
| 引物名称 |
引物序列 |
| Salm P1 Primer |
5′- CTCACCAGGAGATTACAACATGG -3′ |
| Salm P2 Primer |
5′- AGCTCAGACCAAAAGTGACCATC -3′ |
| Probe for Salm |
5′- FAM-CACCGACGGCGAGACCGACTTT-TAMRA -3′ |
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| 序列参考《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》。 |
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| ■ 制品说明 |
| 沙门氏菌(Salmonella) 是重要的肠道致病菌，这一类细菌在自然界中分布很广，其中有2,500多种被确认为血清型。近年来由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急剧增加。本试剂盒是根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》开发的用于定性检测沙门氏菌的Real Time PCR试剂盒。试剂盒中采用一种 2X浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。制品中的DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS，与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，能进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。本检测无需电泳，简单快速，灵敏度高、特异性强。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃ |
| 注意： |
Premix Ex Taq（Probe qPCR）4℃保存（稳定性高达6个月）。
运输储存全程需要高度防污染。
收货后4℃保存。使用前轻轻颠倒以确保试剂完全溶解并充分混匀。
可在-20℃长期保存，一旦融解请于4℃保存，并在6个月之内使用完。 |
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| ■ 注意事项 |
1. Real Time PCR扩增仪的使用请按照仪器说明书进行。
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| 2. 判断为阳性的样品，要用微生物学方法进行再确认，参照SN0170。 |
| 3. PCR反应是灵敏度非常高的反应。为防止污染，建议从反应液的配制到检测的实验过程中，设定以下3个实验区域，并进行物理性隔离。 |
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区域1：反应液的配制及分装。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。 |
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区域2：检测样品的制备。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。 |
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区域3：向反应液中添加检测样品，进行反应、检出。 |
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由于本制品使用Real Time PCR法，扩增反应与检测同时进行，反应后的扩增产物不需要再进行电泳。为了避免污染，严禁从Tube管中取出扩增产物。 |
| 4. 本制品是使用Real Time PCR扩增仪对结果进行分析、判定。当Real Time PCR扩增仪的Auto功能不适合时，将会导致结果判定错误。此时可参照Real Time PCR扩增仪说明书进行手动设定。 |
| 5. 使用Premix Ex Taq (2X Conc.) 时，请上下颠倒轻轻混合均匀，避免起泡，经轻微离心后使用。试剂没有混匀时反应性能会有所下降，本制品不能用振荡器混匀。Premix Ex Taq (2X Conc.) 于-20℃保存时容易形成沉淀，此时，轻轻用手握一会儿或室温放置一段时间后，颠倒混匀可以完全融解。 |
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