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尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG) 收藏
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尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
特性
去除 PCR 残存污染
去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基
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概述
E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)催化从含尿嘧啶的 DNA 上释放尿嘧啶。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。
来源
克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。
应用
在 37℃ 条件下,1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后,此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解,也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。
反应条件
1X UDG 反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,1 mM DTT(pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
质保声明
尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义
1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃ 条件下,30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA(104~105 cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
浓度
5,000 units/ml。
注意事项
UDG 在较广的 pH 范围均内有活性,最适 pH 为 8.0,不需要二价阳离子。活性受高离子强度(> 200 mM)所抑制。
参考文献
关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。