T4 RNA 连接酶 2，截短型 货 号 #M0242LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

T4 RNA 连接酶 2，截短型                              收藏

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通用 miRNA 克隆接头

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
 将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建 

概述

T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 5´ 端预腺苷化的 DNA 或 RNA连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。 T4 Rnl2 截短型的表达来自E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同， T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。
 

来源

携带 T4 RNA 连接酶 2， 截短型基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
 

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中， 25℃ 条件下， 1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端[miRNA 通用性克隆接头（NEB#S1315） ]末端所需的酶量。单位活性检测条件见www.neb-china.com 或 www.neb.com。
 

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。