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热敏磷酸酶 收藏
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特性
DNA 和 RNA 的去磷酸化
概述
热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活,因此,在连接或末端标记之前,可以不用去除热敏磷酸酶。
来源
克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株,该基因最初克隆于质粒 pNI 中,后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。
反应条件
热失活:70℃ 加热 5 分钟。
质保声明
热敏磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟能使 1 μg 经 HindIII(产生 5´ 突出末端)、EcoRV(产生平齐末端)或 PstI(产生 5´ 凹陷末端)消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 > 95% 的 DNA 再环化(通过转化 E. coli 细胞来检测)。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
浓度
5,000 units/ml。
参考文献
关于该酶性质和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。