NudC 焦磷酸酶 货 号 #M0607SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

NudC 焦磷酸酶                              收藏

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特性

·对含 ADP 的、非经典启动核苷酸，如 NAD+ 和 NADH 进行脱帽，生成可连接的 5′ 末端为单磷酸的基团
·水解 NADH 生成 AMP 和还原型烟酰胺单磷酸核苷（NMNH）；水解 NAD+ 产生 AMP和烟酰胺单磷酸核苷（NMN+）
·水解二磷酸二核苷酸和含有 ADP 基团的代谢辅助因子，如 AppA、FAD、辅酶 A 等
·当 NAD+ 是 RNA 的 5’ 启动核苷酸时，可用于 NAD+ 脱帽或去除 NAD
·适用于基于连接方法的研究，如 5’ RACE 和 RNA 测序，以检测和鉴定含有非经典启动核苷酸的RNA
 
该酶是一种创新酶（EFI，Enzyme for Innovation）。EFI 是由 NEB 发起的一个项目，旨在为科学界提供独特的酶，以期发现新应用。这类酶既有趣又特别。

概述

 NudC 是 NUDIX 焦磷酸酶家族中的一员，可高效水解带 NAD+ 帽 和 NADH 帽的 RNA，生成连接可用的带 5′ 单磷酸末端的 RNA（NAD+ 脱帽或去除 NAD）（1）。研究表明：nudC 基因的缺失增加了大肠杆菌中 NAD+ 帽化 RNA 的比例（2）。

 
该酶还能以不同的效率水解含 ADP 基团的小分子，如 NADH、NAD+、AppA、ADP-核糖、ADP-葡萄糖和代谢辅助因子，如 FAD、辅酶 A 和乙酰辅酶 A（3 和未发表结果）。由于其对各种二核苷酸和代谢辅因子的活性，该酶有望通过对帽的焦磷酸化水解作用和核苷酸产物的分析，来识别带有非经典帽结构的 RNA，或使用基于 5′ 连接的方法（如 RNA 测序或 5′ RACE（4））来识别带有 5′ 单磷酸末端的 RNA。
NudC 焦磷酸酶 货 号 #M0607S
随酶提供的试剂
NEBuffer™ 3.1
100 mM DTT
 
浓度
10 µM
 
单位定义
在 1X NEBuffer 3.1 和 5 mM DTT 的反应条件中，加入 1 µM NudC，37℃ 温育 30 分钟，能将 200 µM 或更多 NAD+ 水解成 NMN+ 和 AMP。
 
反应条件
1X NEBuffer™ 3.1，补加 5 mM DTT，37℃ 温育。

热失活
65℃ 加热 10 分钟。
 
储存温度
-20℃
 
质保声明 
NudC 焦磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。
 
参考文献

1.  Frick D.N. and Bessman M.J. (1995).  J. Biol. Chem. 270, 1529-1534.

2.  Cahová, H. et al. (2015). Nature. 519, 374-377.

3.  Höfer K. et al. (2016). Nat Chem Biol. 12, 730-734.

4.  Vvedenskaya I.O., et al (2018). Mol Cell. 70, 553-564.e9.