| ■ 制品内容 |
| pGP Vector (1 μg/μl) |
50 μl |
| pE-ampho Vector (1 μg/μl) |
50 μl |
Transfection Buffer
|
500 μl×10 支 |
2 M CaCl2
|
620 μl |
25 mM Chloroquine
|
40 μl |
| 本试剂盒中包含有2个病毒包装用质粒以及必要的转染用试剂。 |
|
| |
| ■ 制品说明 |
Retrovirus Packaging Kit Ampho是逆转录病毒包装试剂盒，通过将插入有目的基因的逆转录病毒表达载体和2个特别设计的病毒包装用质粒通过磷酸钙法共转染到包装细胞中，可以得到高病毒滴度的逆转录病毒体。试剂盒中包含有表达gag-pol基因的质粒，pGP 质粒和表达amphotropic env基因的质粒及pE-ampho 质粒作为包装载体。使用本产品包装得到的逆转录病毒可以用于感染大多数的哺乳动物细胞。
试剂盒中特别设计的病毒包装用质粒上插入有逆转录病毒的结构基因，gag-pol和env基因，这两种基因是逆转录病毒构建和复制所必需的基因，但是质粒上缺少包装信号Ψ序列和LTR序列，因此包装用质粒本身是无法包装成逆转录病毒的，只有将其和包含Ψ序列和LTR序列的逆转录病毒表达载体共转染到HEK293或者HEK293T包装细胞中，才能包装得到逆转录病毒体。试剂盒中同时还包含基于磷酸钙转染方法的转染试剂，方便客户使用，一般转染后48小时就可以得到高病毒滴度的逆转录病毒。
试剂盒中包装用质粒已经纯化可以直接用于转染，同时质粒上除了gag-pol和env基因外，不包含其他任 何逆转录病毒来源的DNA序列，所以产生具有自我复制能力逆转录病毒的几率非常低。 |
| |
|
 |
| |
| ■ 保存 |
-20℃。
Transfection Buffer、2 M CaCl2、25 mM Chloroquine融化后4℃保存。 |
| |
| |
