AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)酶试剂盒Takara


AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)
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Takara 6679 AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) 20 ml × 2 ¥1,385 AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)
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■ 制品内容
AAVpro Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes) 20 ml×2
 
■ 制品说明
用于从AAV包装细胞(活细胞或者冷冻细胞)中提取病毒的细胞悬浮液
· 适用于各种AAV血清型
· 高回收率
· 不需要超速离心等繁琐操作
 
腺相关病毒(AAV)能够将基因导入至增殖细胞和非增殖细胞中,尤其在非分裂细胞中可以实现长期表达。此外,由于它具有低免疫原性,也适合作为动物个体基因导入(in vivo transduction)工具。当使用AAV病毒进行动物个体基因导入时,使用高纯度的病毒粒子是很有必要的,需要去除源自病毒包装细胞和培养基的杂质。在向培养细胞导入基因时,使用纯化后的AAV病毒可以消除杂质所带来的影响。
 
AAVpro Freeze-Thaw Extraction Buffer(All Serotypes)是一种细胞悬浮液,用于通过冻融法从AAV包装细胞(活细胞和冷冻细胞)中提取AAV病毒。使用本制品悬浮包装细胞,只需要一次冻融操作就能高效提取各种血清型AAV病毒。与AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)( Code No. 6678)配合使用,可以在大约4个小时内纯化并浓缩AAV包装细胞中的AAV病毒,以获得高纯度AAV病毒,而无需超速离心等繁琐操作。
 
■ 保存
-20℃
 
■ 实验例
1. 纯化后AAV纯度测定
使用本制品,从包装细胞中提取携带荧光蛋白ZsGreen1的各血清型(AAV1、AAV2、AAV5、AAV6)AAV病毒,并使用AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6678)进行纯化。纯化后的AAV病毒使用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2(Code No.6233)测定病毒滴度,以1× 109 vector genome (vg)/lane上样进行SDS-PAGE。结果显示,SDS-PAGE上的主要条带为AAV衣壳蛋白(VP1、VP2、VP3)。
 
AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)
 
2. 纯化后AAV感染性能评价
使用通过上述实验例「1. 提取纯化后AAV(各种血清型)纯度测定」获得的各种血清型AAV病毒,感染293T细胞和HeLa细胞,评估其感染滴度。纯化后的AAV病毒以10,000 vg/cell (AAV1, AAV2)、100,000 vg/cell (AAV5, AAV6)分别感染293T细胞和HeLa细胞,3天后进行流式细胞术分析。分析确认,使用本制品提取,经AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6678)纯化的AAV病毒依然保持其感染能力。
 
AAVpro® Freeze-Thaw Extraction Buffer (All Serotypes)
 
 

页面更新:2022-01-11 13:23:45