| DNA Polymerase I 在模板和引物 (DNA或RNA) 存在的条件下，以dNTP作底物，沿5′→3′方向合成与模板互补的DNA。本酶分子量约为109,000，具有双链特异性的5′→3′外切核酸酶活性以及单链特异性的3′→5′外切核酸酶的活性。本酶是由带有编码E.coli DNA Polymerase I基因的大肠杆菌精制而成的。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I. |
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| ■ 活性定义 |
| 以合成的Poly d (A-T) DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10 nmol 的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。 |
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| ■ 用途 |
1. 与DNase I (Code No. 2270A/B) 一起使用，进行切口平移 (Nick translation)。
2. 通过Okayama-Berg法合成cDNA的第二条链 (0.3 μg DNA Polymerase I 约为2.5 units)。 |
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| ■ 使用注意 |
1. 本酶稀释也不失活，但剧烈搅拌会使酶失活。
2. 不含内切酶活性，单独使用不表现切口平移活性。
3. 由于同DNA有较强的亲和性，过量使用易发生凝集作用 (Aggregation)，会使反应不能充分进行。 |
