| BAL 31 Nuclease是海洋性细菌A.espejiana BAL 31在菌体外产生的酶。能以内切方式特异性地降解单链DNA (活性I)，没有单链时也作用于双链DNA (活性II)，表现出从DNA两端同时降解的5’→3’及3’→5’的外切酶活性，最终产物为5’-P单核苷酸。本酶主要有[F]型和[S]型，相对于活性I，[F]型具有相对较高的活性II，[S]型的活性II较低。尽管二者活性不同，但反应条件相同，本公司出售的BAL 31 Nuclease主要为[F]型。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Alteromonas espejiana BAL 31 |
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| ■ 活性定义 |
| 以热变性小牛胸腺DNA为底物，在30℃、pH8.0的条件下，1分钟内生成1 μg酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。 |
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| ■ 用途 |
| 从DNA片段的两端限定降解。缺失的长度适合于100-1,000个碱基左右。 |
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| ■ 使用注意 |
1. 本酶表现外切酶活性的最适pH为8.0，反应需要Ca2+的存在，通过使用螯合剂可使其不可逆失活。在NaCl浓度为1 M左右时，该酶对于单链DNA表现出最大外切活性。相反对于双链DNA，其外切活性则随着盐浓度的增加而降低。当盐浓度在100 mM以下时，双链DNA可能发生随机降解。因此，建议在盐浓度200-600 mM范围内进行反应。
2. 降解速率取决于碱基序列，因此两端降解速率不同。 |
