本制品是采用TB Green嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中含有Real Time PCR反应的合适浓度TB Green,是一种2X 浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。制品中使用了抗Taq抗体的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS,与Real Time PCR用最适Buffer组合,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高PCR的扩增效率,可以进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。 另外,本制品中添加了Tli RNaseH (耐热性RNaseH),以cDNA作为模板进行PCR反应时,可以很好地抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。 本制品适合于快速Real Time PCR扩增反应,可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。 |
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■ 保存 |
4℃可保存6个月。 |
避光保存,避免污染。 |
长期保存请置于-20℃。产品融解后请于4℃保存,并在6个月内用完。 |
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■ 注意事项 |
1. 使用前,请上下轻轻颠倒混匀,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应效果不佳。 (1) 请勿涡旋振荡混匀。 (2) TB Green Premix Ex Taq (2X conc.) (Tli RNaseH Plus),Bulk在-20℃存放可能会产生白色或淡黄色的沉淀,可用手握缓慢溶解,于室温短时间避光放置,轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。 (3) 沉淀会导致溶液成分不均匀,使用前务必充分混匀试剂。 |
2. 配制反应液时,试剂请于冰上放置。 3. 本制品中含有荧光染料TB Green,配制PCR反应液时应避免强光照射。 4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。 5. 本制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是利用抗Taq抗体的Hot Start用DNA聚合酶,与其他公司的化学修饰型Hot Start用DNA聚合酶相比,不需要PCR反应前的95℃、5~15分钟的酶的活性化反应。如果高温处理时间过长,会使酶的活性下降,其PCR的扩增效率、定量准确度等都会受到影响。如果在PCR反应前进行模板的预变性,通常设定为95℃、30秒。 |
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