本制品是从96孔板或其他各种培养板培养的动物细胞中制备细胞裂解液的试剂盒。制备的细胞裂解液可直接使用One Step或Two Step Real Time RT-PCR法对mRNA表达量进行解析,或使用Western Blot方法对蛋白质表达量进行解析。使用本试剂盒快捷方便,操作简单,可在10分钟内完成从培养细胞中制备样品,不需要进行核酸精制和蛋白质提取,可以直接作为Real Time RT-PCR反应的模板或者作为Western Blot实验用的样品。另外,试剂盒中添加的SDS-PAGE用Loading Buffer中不含2-ME,可以在不含2-ME条件下进行蛋白质印迹分析。 使用本试剂盒制备的细胞裂解液可与One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)等One Step Real Time RT-PCR试剂组合使用,2小时内便可完成基因检测分析。如果与反转录试剂PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 等组合使用,可在30分钟内完成cDNA合成。本试剂盒可与大多数Takara的Real Time RT-PCR制品组合使用。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
5X Loading Buffer:开封后室温保存。 |
CellAmp Washing Buffer及CellAmp Processing Buffer融解后可以在4℃保存。 |
请注意避免污染。 |
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■ 注意事项 |
1. 本品可与以下试剂盒组合使用 |
One Step Real Time RT-PCR: One Step TB Green PrimeScript™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(Code No. RR086A/B) One Step TB Green PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR066A/B) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR064A/B) One Step TB Green PrimeScript™ PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR096A/B) Two Step Real Time RT-PCR: PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037A/B) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A/B) TB Green Premix DimerEraser™ (Perfect Real Time) (Code No. RR091A/B) TB Green Premix Ex Taq™ II (Perfect Real Time) (Code No. RR820A/B) TB Green Premix Ex Taq™ (Perfect Real Time) (Code No. RR420A/B) Premix Ex Taq™ (Probe qPCR) (Code No. RR390A/B) |
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2. CellAmp Washing Buffer、CellAmp Processing Buffer及5×Loading Buffer在融解过程中有析出物时,请于室温下完全融解后使用。 3. 在细胞裂解液制备过程中要迅速进行,不要停滞。 4. 试剂在分装时必须使用新的一次性枪头,连续取样时要更换枪头,不得在不同试剂中使用同一个枪头,尽量避免试剂污染。 5. RNA制备说明。 1) 尽量使用无菌、无RNase的一次性塑料器皿,如果不能确定是否除去RNase,则应在使用前灭菌处理。如使用玻璃器皿,则需160℃干热灭菌至少2小时,或者用0.1%的DEPC处理水在37℃处理12小时,然后高压灭菌。 2) RNA实验用的器具和仪器建议专门使用,不要用于其它实验。 3) 尽量使用0.1%DEPC处理过的水配制试剂,并且使用前需要灭菌。如果所用试剂不能灭菌,可以使用无菌的容器以及无菌水进行配制,在使用前过滤除菌。 4) 样品制备的过程中还需要其他的防污染措施,包括使用无菌的一次性手套以及口罩等,防止汗水及唾液造成的污染。 |