LDH检测试剂盒—Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST货号：CK12乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST商品信息储存条件：0-5度保存，避光运输条件：室温
特点：
● 不与细胞内LDH反应，可直接检测（一步法）或取上清液检测（低损伤法）。
● 更适合Car-T、ADCC、CDC等效靶杀伤实验。
● Working Solution配制后，可稳定保存6个月以上。
● 试剂盒稳定性高，数据重复性好。
● 搭配CCK-8检测，细胞毒性双指标认证。下载说明书产品文献SDS下载选择数量：选择规格：100 tests500 tests2000 tests价格：¥800.00现货（会员请登录查看专享价！）订购加入购物车性价比高与CCK-8双重验证细胞毒性CAR-T&ADCC实验可用细胞活性/毒性双重检测试剂盒（点击查看）
活动进行中试剂盒内含产品概述原理产品特点操作示意图工作液稳定性CCK-8与LDH实验例常见问题Q&A参考文献
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试剂盒内含
产品概述
Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST®是通过测定细胞释放到培养基中的乳酸脱氢酶 (LDH) 活性进而测定细胞损害的试剂盒。LDH是存在于细胞质的一种酶，当细胞膜受到损伤时，LDH会释放到培养基中。由于释放出的LDH稳定，检 测培养基中LDH量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。本试剂盒可以测定受损细胞所释放出的LDH，其原 理是LDH催化乳酸生成丙酮酸和NADH，NADH通过电子载体可将水溶性四唑盐WST® (无色) 还原成甲臜产物 (橙色)， WST®甲臜产物的吸光度与LDH量呈正比，利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的数量。
本试剂盒中试剂不会和活细胞反应，而且对细胞无损害，可以直接添加到含有细胞的培养基中检测 (一步法)。也可以分离细胞后，加到培养基中检测 (低损伤法，分离的细胞可以做其他实验)。本试剂盒采用稳定性高的WST®，配制后的溶液可以长时间保存，不需要现配现用，适用于高通量筛选。
原理
Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST®是通过测定细胞释放到培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)活性进而测定细胞损害的试剂盒。LDH（乳酸脱氢酶）是存在于细胞质的一种酶，当细胞膜受到损伤时，LDH 会释放到培养基中。由于释放出的LDH 稳定，检测培养基中LDH 的量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。
本试剂盒可以测定受损细胞所释放出的LDH，其原理是LDH 催化乳酸生成丙酮酸和NADH，NADH 通过电子载体可将水溶性四唑盐WST®（无色）还原成甲臜产物（橙色），WST®甲臜产物的吸光度与LDH 的量呈正比，利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的数量。
本试剂盒中试剂不会和活细胞反应，而且对细胞无损害，可以直接添加到含有细胞的培养基中检测（一步法）。也可以分离细胞后，加到培养基中检测（低损伤法，分离的细胞可以做其他实验）。本试剂盒采用稳定性高的WST®，配置后的溶液可以长时间保存6个月，不需要现配现用，适用于高通量筛选。
产品特点
-双重选择：有2种检测方法（一步法、低损伤法）
-操作简单：不需要分离死细胞和活细胞，就可检测死细胞的LDH ＊一步法
-仪器常用：采用常规酶标仪检测
-稳定方便：Working Solution可冷藏保存6个月，不需要现配现用
-双重验证：配合使用CCK-8可获得死细胞和活细胞的结果
操作示意图
本试剂盒不与细胞内的LDH反应，因此可选择两种检测方法。
1、一步法，直接添加的培养基中检测（左）
2、低损伤法，取上清液检测（右）
工作液稳定性
配制后的工作液，可冷藏保存6个月，无需现配现用
CCK-8与LDH
Cell Counting Kit-8 与Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST®同时检测细胞毒性
检测药物： Mitomycin C
细胞: HeLa
培养基: MEM, 10% FBS
孵育条件: 37℃, 5% CO2, 48小时
检测波长: Cell Counting Kit-8 (450 nm), Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST® (490 nm)
使用Mitomycin C 检测检测HeLa细胞毒性。通过使用Cell Counting Kit-8和Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST [货号: CK12]两种方法检测。Cell Counting Kit-8以细胞活性为指标，Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST以游离的LDH为指标，实验证实两种指标检测存在差异性。二者联用，能更全面的表征细胞毒性。
本文为LDH法检测细胞毒性的相关研究介绍。 [相关介绍链接]
实验例
RAJI细胞CDC实验
实验证实：吸光度O.D.值与抗体浓度成正相关，因此确认CD20抗体与细胞结合而激活细胞损伤
抗癌药阿霉素（DOX）的细胞毒性机制
近年来，与抗氧化剂能力相关的指标（NADP + / NADPH，GSSG / GSH等）与细胞毒性评估一起被测量的案例越来越多。
在本文中，我们将以DOX为例，其中抗氧化能力的下降与细胞毒性的增加有关。
常见问题Q&A
| Q1：可以使用490 nm以外的滤光片吗？ |
| A1：可以使用450 nm滤光片，吸光度会高于490 nm。 |
| Q2：细胞毒性检测时，Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST和Cell Counting Kit-8法结果一致吗？ |
| A2：二者测定的原理和指标不同，建议同时检测。可更好说明问题。Cell Counting Kit-8：检测细胞活性 |
| Q3：LD50差异性过大，如何处理？ |
| A3：细胞状态不同，对药物的耐受性也会有很大变化，最终影响LD50的数值。请尽可能使用相同条件下处理、相同代数的细胞。在准备药物稀释液时，可降低稀释梯度倍数，从而得到更准确的LD50。 |
| Q4：这个试剂盒能检测LDH的酶活吗？ |
| A4：本产品通过LDH活性检测细胞毒性，不能检测如：LDH1, LDH2, LDH3的活性。 |
| Q5：LDH本身的稳定性如何？ |
| A5：文献报道，培养基中LDH活性的1天内降低＜5%（文献1），也可冷藏1周左右（文献2）。具体可因实验条件不同存在差异。文献1：A. Wagner, A. Marc, JM. Engasser, A. Einsele, “The use of lactate dehydrogenase (LDH) release kinetics for the evaluation of death and growth of mammalian cells in perfusion reactors.”, Biotechnol Bioeng. 1992; 39, (3), :320..文献2：M. Allen, P. Millett, E. Dawes, N. Rushton., “Lactate dehydrogenase activity as a rapid and sensitive test for the quantification of cell numbers in vitro.”, Clin Mater. 1994; 16, (4), 189. |
| Q6：Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST带LDH标准品吗？ |
| A6：因为是检测细胞毒性使用，不带标准品。 |
| Q7：试剂盒中的Stop solution添加后需立即检测吗？ |
| A7：Stop solution添加后可避光保存3小时。 |
| Q8：显色背景过高，有什么原因？ |
| A8：考虑以下原因。培养基中血清中的乳酸脱氢酶升高了背景。请用此培养基配制小于5%的血清或血清培养基。如果培养基中含有待测物质具有强还原性，会与WST®显色。因此可预实验时单独检测判断。（一般情况下，培养基如DMEM、RPMI、F-12，通常不含还原性物质 |
参考文献
1.Antitumor Effect by Hydroxyapatite Nanospheres: Activation of Mitochondria-Dependent Apoptosis and Ne…
ACS Nano,2018,12(8)7838-7854
2.Magnetic Nano-Clusters Armed with Responsive PD-1 Antibody
3.Synergistically Improved Adoptive T C….ACS Nano,2019, 13(2)1469-1478
4.Layer by layer cell coating technique using extracellular matrix facilitates rapid fabrication and fu….Biomaterials,2018,160,82-91
5.Oxidative stress–dependent phosphorylation activates ZNRF1 to induce neuronal/axonal degeneration
J.Cell Biol.，2015,211(4)881-896
6.Protein carbamylation exacerbates vascular calcification.Kidney International ,2018,94(1),72-90
7.In vitro cellular behaviors and toxicity assays of small-sized fluorescent silicon nanoparticles.Nanoscale,2017, 9(22),7602-7611
8.Pathological Endogenous a-Synuclein Accumulation in Oligodendrocyte Precursor Cells Potentially Induc…
Stem Cell Reports,2018,10(2),356-365
9.Biocompatible carbon nanotube fiber for implantable supercapacitors.Carbon,2017,122,162-167
10.Lower Expression of MicroRNA-155 Contributes to Dysfunction of Natural Killer Cells in Patients with ….Frontiers in Immunology，2017,8,1173
11.Melatonin Mediates Protective Effects against Kainic Acid-Induced Neuronal Death through Safeguarding….Frontiers in Immunology,2017,10,49