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KAPA Library Amplification Kits文库扩增试剂盒

KAPA 文库扩增试剂盒

罗氏测序解决方案推出的文库扩增方案，采用了KAPA HiFi DNA聚合酶，一种具有行业领先高保真和性能稳定的新型酶。这种新型酶改进了测序总体序列质量，具有低扩增偏差，低重复率和在困难区域更均匀的覆盖度。

罗氏提供的另一种聚合酶，KAPA HiFi Uracil+DNA聚合酶，保持高保真、高稳定性的特性外，还具有尿嘧啶耐受活性，从而适合应用于亚硫酸氢盐转化DNA的文库构建。

KAPA 文库扩增解决方案

高保真、低扩增偏差，适用于所有需要PCR的NGS工作流程。

更有效地扩增GC-rich和AT-rich片段和基因组

改进对所有文库片段和序列区域的覆盖
由于具有更高的扩增效率，仅需更少的循环数即可获得相等的产量

KAPA HiFi已成为NGS文库扩增的行业金标准。

使用N系列产品以及K系列产品扩增从相同打断的P. falciparum(19% GC)、C. difficile(28% GC)、E. coli(51% GC)和B. pertussis(68% GC)基因组DNA构建的文库。

(A) 与N相比，K更显著地均匀覆盖了C. difficile的基因组。
(B) 对于所有生物体的扩增效率，K的性能优于N，更少的扩增次数对关键测序指标有积极的影响。

提高测序覆盖度

所有GC窗口的覆盖均匀度得到提升

KAPA HiFi HotStart ReadyMix降低扩增偏差，提高测序覆盖度。

使用产品K（左）或产品C（右），从100 ng Covaris打断的人类基因组DNA构建文库用作全基因组鸟枪法测序。使用K的扩增偏差更低，覆盖更均匀。数据由The Broad Institute提供 (Cambridge, MA, USA)。

行业领先的NGS文库扩增高保真度

增强（3-5外切核酸酶）校对活性

焦磷酸测序确定了KAPA HiFi酶行业领先的高保真度。

Taq酶、基于Taq酶的长片段PCR预混液、具有校正功能的DNA聚合酶(产品N和产品T)的已发表错误率，与KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶的错误率比较结果(每3.54×10-6个核苷酸掺入1个错误，由454平台深度测序验证)。相比而言，KAPA HiFi酶比Taq酶低50-100倍。

KAPA HiFi Uracil+ DNA 扩增酶

甲基化测序工作流程中准确、有效地扩增亚硫酸氢盐处理的DNA

高效扩增含尿嘧啶的模板

来源于KAPA HiFi DNA聚合酶的尿嘧啶耐受的，具有校正功能的扩增酶

KAPA HiFi Uracil+ReadyMix不受dUTP抑制。

SYBR® Green法实时荧光定量PCR检测dUTP对PCR扩增的影响，结果显示dUTP可以抑制常规PCR反应液的扩增(左)，而KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix (右) 无扩增抑制(dUTP浓度为0.2 mM，扩增片段长度为452 bp，模板稀释比例为80 pM-0.8 fM)。

解锁亚硫酸氢盐转化文库构建的真正潜能

通过更高的文库产量和更少的扩增循环数来降低PCR重复和偏差
高扩增效率保证长片段文库构建质量

KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix 提供更高的文库产量和最小的文库分子大小偏差。

使用12、14或16个循环的标准方案扩增人类全基因组亚硫酸氢盐处理的文库，并使用Bioanalyzer® 2100高灵敏度DNA检测系统分析扩增文库。与A相比，KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix的产量更高 (左)，片段大小偏差更小 (右)。

与DNA甲基化测序应用无缝连接

高效扩增亚硫酸氢盐转化的文库
改善亚硫酸氢盐测序read的质量

KAPA HiFi Uracil+ReadyMix成功扩增简化亚硫酸氢盐测序文库。

起始量为500 ng或10 ng的小鼠B细胞基因组DNA，经MspI消化后，使用KAPA HyperPrep Kit构建文库，及使用KAPA HiFi Uracil+ ReadyMix进行最后文库扩增。500 ng文库扩增10个循环，10 ng文库扩增15个循环。(A) 10 ng文库与500 ng文库(左)以及两次500文库之间(右)有着很好的相关性。(B)碱基组成与序列位置关系图显示，测序结果中>95%的reads都是以MspI切割位点(CCGG)开头。数据来自Emory University (Atlanta, GA, USA)。

MC-CN-00368 有效期至2021-12-31

仅供研究，不用于临床诊断。

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产品手册

KAPA_Library Amplification Kit_TDS.pdf

规格明细 / 储存条件

Kits can be stored for up to 12 months at -20˚C.

Kits include KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X), a convenient PCR master mix containing KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase, KAPA dNTPs, reaction buffer, and MgCl2 at a final concentration of 2.5 mM. Kits with primers are also available.

Kits for real-time library amplification include a real-time version of the KAPA HiFi HotStart ReadyMix, as well as fluorescent standards to monitor library amplification.

构成要素