大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）

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大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）
Libs Rat LH ELISA KIT(S type)

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大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）

 


　　LH是在垂体前叶（腺垂体）嗜碱性促性腺激素生产细胞（脑垂体）中通过与FSH共同产生、贮存、在下丘脑激素LHRH的刺激下而分泌的。精巢中也含有这类物质。在动物种类方面分布在鱼类-哺乳类的全脊椎动物。在雄性大鼠垂体中LH含量为6～7 μg/gland，雌性为3～4 μg/gland（NIH-LH1 S1 换算）。雄性较多，雌性会根据性周期而变化。

　　LH是分子量约29000的糖蛋白，是由TSH、FSH共同的α－亚基以及LH特有的β－亚基组成的杂二聚体。

　　LH的目标器官，在雌性动物中是卵泡的成熟颗粒细胞，与FSH协同促进卵细胞成熟和雌性激素的生产，诱导排卵，促进排卵后黄体化孕甾酮生产分泌。在雄性动物中是精巢的间质细胞（睾丸间质细胞），促进其雄性激素分泌，与雄性激素作用促进2次精子形成有关。受体是膜7次贯通- G蛋白共轭型PKA。

　　因此，LH不足会导致性类固醇分泌降低,间质细胞萎缩，排卵黄体化停止等现象。过量状态下会导致精巢间质细胞肥大而且持续萎缩，雌激素、雄激素分泌增加，早熟过排，促性成熟等现象。

　　LH的分泌受GnRH （LHRH）直接促进，生理状态表现为血液中性类固醇低下（间接、直接），性周期变化（特别是排卵前期），更年期-闭经后分泌增加。

　　男性会随着年龄的增长而增加。发情前期大量分泌的雌激素通过正反馈，在LHRH作用下引起暂时性LH大量分泌（LH波动），诱发排卵。

　　血液中性类固醇的增加以及阿片肽特别是β－内啡肽，在幼儿期、妊娠期、产后期等会抑制LH的分泌。

 


◆特点


●　测定时间短（总反应时间：3小时50分钟）。

●　微量样本（标准操作法10 μL）即可测定。

●　使用无害的防腐剂。

●　全部试剂为溶液即用类型。

●　高测定精度和高重复性。

 


◆试剂盒组成


组成品

状态

包装

（A）抗体包被96孔板

清洗后使用

96 wells（8×12）／1个

（B）标准溶液（100 ng/mL）

稀释后使用

200 μL/1瓶

（C）测定用缓冲液

直接使用

60 mL/1瓶

（D）生物素结合抗GH抗体

稀释后使用

100 μL/1瓶

（E）过氧化物酶·抗生素结合物

稀释后使用

100 μL/1瓶

（F）显色液（TMB）

直接使用

12 mL/1瓶

（G）样本稀释用缓冲液

直接使用

12 mL/1瓶

（H）终止液（1M H2SO4）

※小心轻放

直接使用

12 mL/1瓶

（I）浓缩清洗液（10×）

稀释后使用

100 mL/1瓶

孔板密封膜

4个

产品说明书

1本

 


◆样本信息


●　大鼠血清·血浆

●　10 μL/well（标准操作法）

※　样本需要用（G）样本稀释缓冲液稀释2倍，搅拌后室温下静置处理10分钟，

　　再用（C）测定缓冲液稀释2.5倍，稀释液在测定中使用（最终稀释率为5倍）

　　最终稀释倍数的极限是2.5倍。但是，需用缓冲液将板孔总量调制至50μL。

※　推荐使用1mg/mL（最终浓度）EDTA-2Na作为抗凝剂，不可使用肝素Na血浆。

 


◆测定范围


0.313～10 ng/mL（标准曲线范围）

1.565～50 ng/mL（样本量10μL时）

 

◆实验数据


精密度实验（实验内变化）


样本

A

B

1

8.74

1.15

2

8.78

1.03

3

8.79

1.07

4

8.68

1.06

5

8.03

1.03

6

8.27

1.13

7

7.94

1.07

8

7.97

1.05

Mean

8.40

1.07

SD

0.39

0.04

CV（%）

4.6

3.9

单位：ng/mL，n=8

重复性实验（实验间变化）


测定日/样本

E

F

G

0天

5.01

1.25

0.328

1天

5.01

1.24

0.329

2天

5.00

1.27

0.347

3天

5.00

1.28

0.337

Mean

5.00

1.26

0.335

SD

0.0019

0.016

0.0088

CV（%）

0.038

1.3

2.6

单位：ng/mL，n=4

添加回收实验

样本C


添加量

实测值

回收量

回收率（%）

0.00

1.29

—

—

0.584

1.89

0.601

103

1.17

2.48

1.19

102

1.75

3.01

1.73

98.5

单位：ng/mL，n=2

样本D


添加量

实测值

回收量

回收率（%）

0.00

2.23

—

—

1.36

3.59

1.35

100

3.39

5.60

3.36

99.2

4.07

6.21

3.97

97.7

单位：pg/mL，n=2

稀释直线性实验

2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果，直线回归值R2=0.999

参考文献



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630-23929 （AKRLH-010S）大鼠促黄体生成素（LH）ELISA试剂盒（S型）
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