干细胞培养的基础材料 iMatrix系列

无需稀释可直接使用的孔板涂层溶液

Easy iMatrix-511

　　Easy iMatrix-511是可以直接应用于培养孔板涂层的稀释溶液，有iMatrix-511和iMatrix-511 silk两种类型的稀释溶液。

　　本品1支（100mL）可用于大约11块6孔板。

　　培养孔板涂层后iMatrix-511及iMatrix-511 silk的使用方法相同。

产品名称	Easy iMatrix-511 （iMatrix-511稀释型）	Easy iMatrix-511 silk （iMatrix-511 silk 稀释型）
产品编号	380-13041	387-13051
转基因蛋白质	人层粘连蛋白511E8片段
转基因蛋白表达系统	转基因CHO-S细胞	转基因蚕表达系统
产品形态	稀释溶液
容量	100mL（可包被约11块6孔板）
储存条件	2-15℃
备注	含有重组HSA

 

◆使用方法

【使用方法：以6 well plate (9.6 cm2 / well) 为例】

1. 每孔中添加该产品1.5mL（0.25μg/cm2）。

2. iMatrix-511或iMatrix-511 silk可在以下三种条件下进行涂层处理：①37℃ 1小时处理、②室温 3小时处理、③4℃ 过夜处理。

3. 涂层处理完成后，去掉Easy iMatrix-511溶液，在孔板未干燥状态下，迅速接种细胞。

   　※避免涂层处理后的培养器材干燥，以免影响培养效果。　　　

◆产品列表

产品编号	产品名称	提纯原料	规格
380-13041	Easy iMatrix-511 层粘连蛋白511	iMatrix-511	100ｍL
387-13051	Easy iMatrix-511 Silk 层粘连蛋白511 蚕来源	iMatrix-511 Silk	100mL

    

※本产品仅供实验研究用。

◆相关产品

产品编号	产品名称	容量
385-07361	iMatrix-511溶液 (0.5mg/mL PBS) 重组层粘连蛋白511-E8片段，溶液（0.5mg/mL）	175µg×2（350µL×2)
381-07363		175µg×6（350µL×6)

 

Easy iMatrix-511, Easy iMatrix-511silk

Q1. 产品是以什么样的状态销售的？

A1. 产品是以液态销售的。

一瓶里密封装有1.6 μg/mL浓度的100 mL细胞培养基质（层粘连蛋白511-E8片段）。

 

Q2. 产品的存储条件和有效期是什么？

A2. 产品的储存条件为，冷藏保存在2-15°C。（推荐4°C）

产品的有效期，请参考下表。

产品	保质期
Easy iMatrix-511	Lot.001为生产后6个月内
Easy iMatrix-511silk	Lot.002以后为生产后一年内

※    具体的有效期详见考产品外包装。

 

Q3. 可以冷冻保存吗？

A3. 不可以冷冻保存。

 

Q4. 培养hES/hiPS细胞时使用什么培养基最好？

A4. 宫崎等的论文（Nature communications, 3(1236), 1-10, 2012）、（Scientific Reports, 7, 41165, 2017）中，使用了以下的培养基。

・mTeSR1,TeSR2,TeSR-E8 (STEMCELL Technologies)
・StemPro hESC SFM (Thermo Fisher Scientific)
・StemFitAK03 (Ajinomoto)

中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 1-7, 2014）中使用了以下的培养基。

・StemFit (Ajinomoto)

文献中使用的培养基都出现了良好的结果。

 

Q5. 请教我培养iPS细胞时最佳的使用量。

A5. 6孔板的一个孔中（9.6cm²）使用1.5 mL本产品时，iMatrix-511的浓度为0.25 μg/cm²。

 

Q6. 培养iPS细胞时需要Rock Inhibitor（Y-27632）吗？

A6. 在中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 2014）中，介绍了只有在传代时添加Rock Inhibitor，更换培养基的时候不使用的方法。

 

Q7. 培养iPS细胞时可以单细胞传代吗。

A7. 可以。

※使用iMatrix-511时，ES/iPS细胞的扩增培养步骤，传代操作，请参考以下的链接。

（扩增培养步骤 ）

（传代操作的视频）

也可以参考中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 2014）。

 

Q8. 传代时使用什么细胞分离液？

A8. 请使用胰蛋白酶。

※使用iMatrix-511时，ES/iPS细胞的扩增培养步骤，传代操作，请参考以下的链接。

（扩增培养步骤）

（传代操作的视频）

也可以参考中川等的论文（Scientific Reports, 4(3594), 2014）。

 

Q9. 可以使用小鼠的iPS细胞吗？

A9. 由于没有小鼠iPS细胞的培养数据，所以无法回答。

 

Q10. 这个产品与基质胶有什么不同?

A10. 基质胶含有小鼠EHS肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。

iMatrix-511是将在CHO-S细胞中表达的层粘连蛋白511-E8片段高度纯化后的重组蛋白。

iMatrix-511silk是从蚕结的茧中高纯度纯化层粘连蛋白511-E8片段的重组蛋白。

已知iPS细胞是通过细胞膜受体（特别是α6β１整联蛋白）粘附于层粘连蛋白-511。

已知α6β１整联蛋白对层粘连蛋白-511具有高粘附活性。这使得用iMatrix-511 / iMatrix-511silk可以使iPS细胞在单细胞状态下传代。

在宫崎等的论文中（Nature communications, 3(1236), 1-10, 201），5次传代后（30天后）的细胞数扩增效率约为基质胶的200倍。