microRNA增强试剂盒

microRNA Booster Kit

◆产品概况

　　Stemgent^® microRNA Booster 试剂盒增强和简化了 mRNA 的重编程，可用正常或者病人特定类型细胞制备有效的iPS细胞系。 microRNA Booster 试剂盒包括microRNA 重编程混合物和 B18R重组蛋白。

　　microRNA增强型 mRNA 重编程方法改进了第一代mRNA重编程试剂盒，递送更快速的重编程动力学，流水线操作，提供了难以进行重编程类型细胞的重编程效率。 microRNA-增强型方法是Stemgentm^® RNA Reprogramming Kit 和 microRNA Booster Kit、Stemfect™ RNA Transfection Kit配套使用，至少8天内获得原代iPS细胞克隆。该新方法改进了动力学，减少了每次转染mRNA的剂量，与基于饲养层细胞mRNA重编程方法相比，每个孔减少大约35%~45%的mRNA量。

◆优势

	Stemgent® mRNA 重编程方法	Stemgent® microRNA 增强型 mRNA 重编程方法
重编程效率	>1%	>1%
快速重编程动力学	是	是
体细胞 → iPS细胞	3 周	2 周
插入突变风险	无	无
病毒清除筛选	无	无
DNA载体保留和/或者整合的筛选	无	无
与运用病毒相关的生物污染问题	无	无
# 每个试剂盒的孔数of wells per   kit   (6孔板)	4	9-10 (35%-45% /孔节省用量)
重编程底物	成纤维细胞饲养层	细胞外基质
难以重编程和重塑的细胞类型	—	是
简单，友好的操作流程 (过夜转染)	—	是

◆案例・应用

	Figure 1: MicroRNA增强型mRNA重编程实验时间轴。 Stemgent® microRNA增强型mRNA重编程实验步骤已经经过优化，确保在2周时间内制备人iPS细胞并可以传代。
	Figure 2: mRNA 重编程实验时间轴。TStemgent RNA 重编程实验流程优化确保在3周内制备人iPS细胞并可以传代。
	Figure 3: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第1天细胞的形态。用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第1天细胞的形态。
	Figure 4: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第3天细胞的形态。
	Figure 5: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第5天细胞的形态。
	Figure 6: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第7天细胞的形态。
	Figure 7: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第9天细胞的形态。
	Figure 8: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第12天细胞的形态。
	Figure 9: 使用Stemgent-Asterand   microRNA 增强型重编程系统制备人iPS细胞的时空图片。第12天，用TRA-1-81（多能性标记物）荧光染色iPS细胞。

◆相关产品

货号	名称	规格
00-0073	microRNA Booster Kit microRNA增强试剂盒	1kit
00-0071	Stemgent® mRNA Reprogramming Kit  mRNA 重编程试剂盒	1kit
00-0075	Stemgent® StemRN™ SR Reprogramming Kit StemRNATM-SR重编程试剂盒	1kit

注：本品已停产，升级版本已推出：Stemgent^® StemRNA™ 3rd Generation Reprogramming Kit（又名 StemRNA-NM Reprogramming Kit，产品编号：00-0076）。

试剂盒成分

●　2 瓶 – microRNA Reprogramming 混合物l (20 μM) (货号 05-0036), 35 μL

●　B18R 重组蛋白, 不含载体(货号. 03-0017), 50 μg

 

保存和保质期Storage and Stability

●　将microRNA 重编程混合物和 B18R 蛋白保存在 -70℃以下。

●　按照指示的保存，收到货后至少可以保存3个月。

 

质量控制

 Stemgent^® microRNA Booster试剂盒用人新生的包皮成纤维细胞成功进行基于RNA重编程。所有试剂盒组分都灭过菌，检测不含支原体。

推荐使用

●　Stemgent^® microRNA Booster Kit用于microRNA-增强型mRNA重编程

●　参考制备NuFF-条件性Pluriton培养基用于制备条件性重编程培养基。

●　参考操作手册： Stemgent^® mRNA 重编程系统，关注实验细节和材料处理。

Specification Sheets

 00-0073 Product Specification Sheet

Safety Data Sheets

03-0017 Safety Data Sheet

00-0073 Safety Data Sheet

05-0036 Safety Data Sheet

Protocols

   microRNA Enhanced mRNA Reprogramming

Application Notes

     MicroRNA Application Note

Product Sheets

      Product Sheet_RNA Reprogramming

 

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        TRA-1-60 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0010)

        TRA-1-81 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0011)

        mRNA Reprogramming Factors Set: hOKSML (00-0067)

 

Additional Publications

7q11.23 dosage-dependent dysregulation in human pluripotent stem cells affects transcriptional programs in disease-relevant lineages

Josowitz R, Lu J, Falce C, D’Souza SL, Wu M, Cohen N, Dubois NC; Zhao Y; Sobie EA; Fishman GI; Gelb BD. Identification and purification of human induced pluripotent stem cell-derived atrial-like cardiomyocytes based on sarcolipin expression. PLoS ONE 9(7): e101316 (2014)

 Briggs SF; Dominguez AA; Chavez SL; Reijo Pera RA. "XIST in human preimplantation embryos and iPSCs." Stem Cells 33:1771 (2015)