PA tag

亲和纯化标签蛋白！

　　PA tag系统是利用高亲和性&高特异性单抗（NE-1）识别肽标签（GVAMPGAEDDVV）的重组蛋白新型检测系统。PA tag系统中的抗体琼脂糖可通过免疫沉淀法纯化PA tag融合蛋白，并可在洗涤后获得再生。中性pH条件下PA tag肽简单方便地竞争性洗脱PA tag融合蛋白。

　　PA tag系统的亲和性和特异性优于现有标签系统，抗体琼脂糖可 再生60次 极大地降低成本，可用于免疫细胞化学、免疫印迹和流式细胞术，是动物宿主细胞重组蛋白生产的有效工具。

◆原理

◆载体列表

产品名称（载体名称）	抗性		规格	产品编号
	大肠杆菌抗性	真核细胞抗性
pCAG-Ble PA tag-C	Bleomycin		20 μg	161-26861
pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus			20 μg	168-26871
pCAG-Bsd PA tag-C	Blasticidin S		20 μg	165-26881
pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus			20 μg	162-26891
pCAG-Hyg PA tag-C	Hygromycin B		20 μg	165-26901
pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus			20 μg	162-26911
pCAG-Neo PA tag-C	Kanamycin	G418	20 μg	169-26921
pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus			20 μg	166-26931

◆优点、特色

◆案例、应用

【使用例子：PA 标签抗体，大鼠单克隆抗体（NZ-1）】

　　NZ-1是特异性识别PA tag（GVAMPGAEDDVV）的单克隆抗体，能用于检测动物细胞表达的PA tag融合蛋白，亲和性很高并能简单地用肽洗脱！已确认不存在交叉反应的物种包括小鼠、大鼠、仓鼠和犬类。

浓度：       标签表示（约1.0 mg/mL）

配方：       1× PBS (pH 7.5) 水溶液

克隆号：    NZ-1

亚型：       IgG2a

应用：　　免疫印迹 0.01 – 1 μg/mL　　

                 免疫沉淀 10 – 50 μg/assay　　

                 流式细胞术 0.1 – 10 μg/mL　　

                 免疫细胞化学 0.1 – 10 μg/mL

保存条件：2–10°C 避免反复冻融

【NZ-1 Fab和PA肽的复合体结构分析】

标记抗PA tag抗体

PA tag-EGFP-6×His tag，重组，溶液

亲和标签比较

亲和标签	TARGET	PA	6 x His	c-Mys	HA	GST
序列	(YPGQ)5V	GVAMPGAEDDVV	HHHHHH	EQKLISEEDL	YPYDVPDYA	–
残基数	21	12	6	10	9	218
分子量(kDa)	2.34	1.16	0.84	2.34	1.16	0.84
配位子	TARGET tag	PA tag	Ni, Co, Zn, Cu	c-Myc tag	HA tag	GST
抗体琼脂糖的再利用	最高可再生循环利 用40次	最高可再生循环利 用60次	不可再生	不可再生	不可再生	不可再生
重组蛋白纯化成本	+	+	+	++	++	+
单克隆抗体结合力(KD(M)) (数字越小，亲和力越高)	1.0×10-8	4.9×10-10	Ni-NTA:  1.0×10-5~6	2.2×10-9	2.8×10-9	Glutathione:   1.0×10-5~6
亲和性	++++	+++++	+++	++++	++++	++++
和动物细胞外(培养基)的蛋白非特异性结合	+	+	+++++	+++	+++	++++
和动物细胞内蛋白的非特异性结合	+	+	++++	++++	+++	++++
肽洗脱	+++	+++	咪唑洗脱	++	++	谷胱甘肽洗脱

本比较表由和光独立完成。样品、检测方法及手法不同有可能产生的特异性有变化，不能保证各种亲和标签的性能。

Target tag系统和Pa tag系统同属Wako亲和标签系统，详情请联系经销商。        

 Wako新一代超亲和性的亲和标签系统“PA Tag System”：http://www.boppard.cn/resources/show/14.html

1.　Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affinity antibody against 

　   a dodecapeptide derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).

2.　Fujii, Y. et al. 新規アフィニティータグシステム“PAタグ”の利用法～蛋白質の精製および検出～蛋白質科学

　   会アーカイブ, 7, e075 (2014)

3.　Kitago,Y et al.“ Structural basis for amyloidogenic peptide recognition by sorLA.”

　   Nat Struct Mol Biol., 22(3):199-206(2015)