pEBMulti染色体外复制载体

pEBMulti Vetcor

◆原理

　　pEBMulti载体可用于哺乳动物细胞（人、猴）和狗细胞系表达的载体。pEBMulti载体有Orip（复制起点）和EBNA-1（EB病毒细胞核抗原1），通过体内染色体外复制系统，该载体可以稳定遗传。

多克隆位点（MCS）试剂盒内有单页会展示每个多克隆位点序列引物

◆优点、特色

●  容易，一周建立稳定的细胞系

●  不整合到宿主细胞的基因组

●  可作为穿梭载体使用*

 * 通过单一抗生素筛选，可存在于E.coli和哺乳动物细胞中

◆案例、应用

OriP & EBNA1

红色荧光蛋白细胞系的群落分析（RFR）

pEBMulti载体效果

与常规载体相比

	pEBMulti		瞬时表达载体
	潮霉素 B	G418	潮霉素 B	G418
建立稳定细胞株的时间	1周		2周	3-4周
建立稳定细胞株的抗生素浓度	100-500μg/mL	100-1,000μg/mL	100-500μg/mL	100-1,000μg/mL
建立稳定细胞系的细胞数目（Vero）※1	4.5×106细胞	未测定	2×106细胞	未测定
合适的E.coli株	能复制大分子DNA E.coli株， 比如XL10-Gold		常规E.coli株 （DH α 5、JM109 etc.）
载体大小	大约 10 kbp		大约4-6kbp
确认宿主细胞中去除转染的载体	可能		不可能
宿主基因组中整合部分的确认	不必		必须

※ 1. Vero细胞在6孔板上培养达到一定汇合度，转染后在含有潮霉素B 350 μg/mL 的培养基内培养8天。

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序列信息

pEBMulti-Hyg_element.txt

pEBMulti-Neo_wholelentgh.txt

pEBMulti-Hyg_non_cutter&one_cut.txt

pEBMulti-Hyg_wholelength.txt

pEBMulti-Neo_element.txt

pEBMulti-Neo_1-4cut_enzyme.txt

pEBMulti-Neo_non_cutter&one_cut.txt

pEBMulti-Hyg_1-4cut_enzyme.txt