α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒
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食品分析用
α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒
淀粉分解产生二糖,α-葡萄糖苷酶能分解二糖产生葡萄糖,使血液中的血糖升高。因此,可通过抑制α-葡萄糖苷酶来抑制血糖升高。
近来有研究表明从不同的植物体中可以检测到α-葡萄糖苷酶抑制物质,研究人员致力于将其应用到抑制血糖升高功能性食品的研究。
α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒能测定对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。与LabAssay™ 葡萄糖(血糖)检测试剂盒配套使用,可用于检测食品等成分中对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用。
◆试剂盒组成
试剂名称 |
容量 |
数量 |
主要成分 |
酶试剂 |
1mL |
2 |
α-葡萄糖苷酶 |
缓冲剂 |
50mL用 |
2 |
马来酸/顺丁烯二酸二钠 |
基质液1 |
20mL用 |
2 |
D-(+)-麦芽糖 |
基质液2 |
20mL用 |
2 |
蔗糖 |
阳性对照 |
100mg |
1 |
阿卡波糖 |
*阿卡波糖是一种新型口服降糖药。在肠道内竞争性抑制葡萄糖苷水解酶。降低多糖及蔗糖分解成葡萄糖,使糖的吸收相应减缓,因此可具有使饭后血糖降低的作用。
◆除试剂盒外所需器具、器材
● LabAssay™ 葡萄糖(血糖)检测试剂盒
● 96孔透明微孔板
● 酶标仪(505 nm吸光度)
● 微量移液管
● 恒温槽(37℃)
◆实验操作流程
◆检测步骤
Ⅰ.配制试剂
决定稀释倍数的预实验
麦芽糖 |
蔗糖 |
|
基质溶液 |
麦芽糖溶液 50μL |
蔗糖溶液 50μL |
纯净水 |
25μL |
|
37℃,3分钟 |
(葡萄糖定量)
1.6孔微孔板中分别加入100μl的酶反应液和稀释的葡萄糖标准液(浓度:15,10,5,2.5mg/dl)添加150μLLabAssay™ Glucose显色剂,充分混合。
2.37℃下进行10分钟温育,测定505nm的吸光度。
3.麦芽糖的葡萄糖生成量为10mg/dL,蔗糖为5mg/dL,以此求稀释倍率。
Ⅱ.正式试验(酶反应)
<样品配制>
麦芽糖 |
蔗糖 |
|
基质溶液 |
麦芽糖溶液 50μL |
蔗糖溶液 50μL |
样品溶液或阳性对照溶液 |
25μL |
|
37℃,3分钟 |
||
酶稀释液 |
酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数) |
酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数) |
搅拌后,37℃下,准确反应30分钟 |
||
纯净水 |
400μL |
|
立即在沸水中加热3分钟后,冷却 |
<空白对照配制>
麦芽糖 |
蔗糖 |
|
基质溶液 |
麦芽糖溶液 50μL |
蔗糖溶液 50μL |
样品溶液或纯净水 |
25μL |
|
纯净水 |
400μL |
|
酶稀释液 |
酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数) |
酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数) |
立即在沸水中加热3分钟,冷却 |
Ⅲ.葡萄糖定量
→同预试验,使用LabAssay™ 葡萄糖(血糖)检测试剂盒测定。
Ⅳ.IC50计算
1.以对照溶液的葡萄糖生成量为α-葡萄糖苷酶的100%活性,通过各浓度样品溶液的葡萄糖生成量,求α-葡萄糖苷酶比活性;
2.以样品或阳性对照溶液浓度(酶反应液中的终浓度)为横轴,以α-葡萄糖苷酶比活性为纵轴绘制半对数线图,从得出的近似曲线算出比活性50%时样品的浓度(IC50值)。
相关资料
α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 产品价格 |
297-78601 | α-Glucosidase Inhibitory Activity Assay Kit α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒 |
96次用 | 食品分析用 | - |
298-65701 | LabAssay™ Glucose LabAssayTM 葡萄糖检测试剂盒 |
1,000次用 | 细胞生物学用 | - |
194-17841 | Salacinol Standard, Synthetic Salacinol标准品,合成品 |
5mg | 食品分析用 | - |
043-24931 | 1-Deoxynojirimycin 1- 1-脱氧野尻霉素 |
10mg | 生化学用 | - |
020-12631 | N-Butyl-1-deoxynojirimycin N-丁基-1-脱氧野尻霉素 |
10mg | 生化学用 | - |
229-01891 | Voglibose | 10mg | 药理研究用 | - |
138-16221 | Miglitol 米格列醇 |
10mg | 药理研究用 | - |
134-16223 | Miglitol 米格列醇 |
100mg | 药理研究用 | - |