人多能性干细胞无血清培养基

人多能性干细胞无血清培养基
StemSure® hPSC培养基Δ

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StemSure® hPSC培养基Δ人多能性干细胞无血清培养基

人多能性干细胞无血清培养基


人多能性干细胞无血清培养基

 

  本产品是无饲养层条件下用于维持培养人ES细胞·iPS细胞的无血清,无动物源性成分的液体培养基。不含BSA及HAS等蛋白,批次间的差别较少,结果稳定。但是,本产品不含bFGF(碱性線成纤维细胞成长因子)。


◆特点


  ●无血清、无饲养层培养人ES· iPS细胞

  ●使用人iPS细胞201B7细胞系,进行每批次的质量检测

  ●不含动物源成分

  ●不属于医药用外毒物或剧毒物,保存及处理简单

  ●不含蛋白的低蛋白培养基

  ●可使用Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等培养基质

  ●可使用Accutase, TrypLE Select等解离液

  ●传代培养时添加Y-27632可传代培养单细胞


◆检测项目


  ●细胞繁殖能力测试(使用人iPS细胞201B7细胞系)

  ●碱性磷酸酶染色(使用人iPS细胞201B7细胞系)

  ●无菌检测

  ●pH

  ●渗透压

  ●内毒素

  ●支原体检测


使用注意

 

  ●本产品不含bFGF(碱性成纤维细胞成长因子)。

  ●本产品需冷藏(-20℃)。溶解后无需再冷冻,请保存于2~10℃,并在1周内使用完毕。

 

人iPS细胞201B7细胞系


  将使用A公司培养基(含有BSA、使用动物源成分)培养的人iPS细胞201B7细胞系移植到StemSure® hPSC培养基Δ,进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。



《 细胞形态 》

  使用StemSure® hPSC培养基Δ培养的人iPS细胞的形态与A公司培养基的几乎相同,没有发生分化,稳定地进行了培养。


人多能性干细胞无血清培养基

《 细胞群倍加数 》

  对比移植到StemSure® hPSC培养基Δ后的第1代到第5代的细胞,使用StemSure® hPSC培养基Δ的细胞繁殖状况更好。

 < 培养基成分 > 
  StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF

< 细胞播种数 > 
  1×105cells/well(使用6孔培养板)

 

 


《 未分化性标记表达确认 》

  使用StemSure® hPSC培养基Δ培养至5代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。  

   ※BC2LCN是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。

人多能性干细胞无血清培养基

< 培养基成分 > 
  StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF

< 细胞播种数 > 
  1×105cells/well(使用6孔培养板)

 

 

《 未分化性标记表达确认 》

  使用StemSure® hPSC培养基Δ培养至5代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。  

   ※BC2LCN是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。

人多能性干细胞无血清培养基

<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师>


人ES细胞201B7细胞系


  将使用A公司培养基(含有BSA、使用动物源成分)培养的人ES细胞201B7细胞系移植到StemSure® hPSC培养基Δ,进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。

《 细胞形态 》

  使用A公司培养基的细胞,细胞在第2代以后出现了分化。另一方面,使用StemSure® hPSC培养基Δ的细胞,没有发生分化,稳定地进行了培养。

 

人多能性干细胞无血清培养基

《 细胞群倍增数 》


  比较两者移植到StemSure® hPSC培养基Δ后的第1代到第5代,细胞的繁殖能力没有差异。


人多能性干细胞无血清培养基

< 培养基成分 > 
  StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF

< 细胞播种数 > 
  1×105cells/well(使用6孔培养板)

 



《 未分化性维持確認 》


  使用StemSure® hPSC培养基Δ培养至第6代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。   

   ※BC2LCN是能与存在于人ES ・iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。


人多能性干细胞无血清培养基

<数据提供  独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤 弓弦老师>

 

 

核型解析


  对使用StemSure® hPSC培养基Δ培养到第27代的人iPS细胞进行了核型解析,没有发现染色体异常。 


人多能性干细胞无血清培养基

<数据提供  独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师>

 

 

人iPS细胞201B7分化成三胚层


  使用StemSure® hPSC培养基Δ将人iPS细胞201B7细胞系培养至第3代,再使用StemSure® 系列培养基进行驯化培养,可观察到βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP,因此判断细胞形成胚体后,进行了三胚层分化。


人多能性干细胞无血清培养基

< 培养基成分 >
  StemSure® D-MEM + StemSure® Serum Replacement + 2mmol/l L-Glutamine +  10mmol/l StemSure® 2-Mercaptoetanol + 1 x Non-essential Amino Acids Solution   

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
197-17571 StemSure® hPSC MediumΔ 100ml 用于细胞培养
193-17573 StemSure® hPSC MediumΔ 100ml×4 用于细胞培养
064-05381  Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 50μg 用于细胞培养
068-05384 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 100μg 用于细胞培养
060-05383 Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-free【bFGF/FGF2】 1mg 用于细胞培养
257-00511 Y-27632 1mg 用于细胞培养
253-00513 Y-27632 5mg 用于细胞培养
251-00514 Y-27632 25mg 用于细胞培养
253-00591 5mmol/l Y-27632 Solution 300μl 用于细胞培养
220-02041 Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant,Solution 500μg 生物化学用
197-16275 StemSure® D-MEM(High Glucose)with Phenol Red and Sodium Pyruvate 500ml 用于细胞培养
197-16775 StemSure® Serum Replacement 500ml 用于细胞培养
198-15781 StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution (×100) 100ml 用于细胞培养
195-15791 StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution (×100) 100ml 用于细胞培养
190-15805 StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution 500ml 用于细胞培养
199-16051 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units 用于细胞培养
195-16053 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units×10 用于细胞培养
195-16031 StemSure® Freezing Medium 100ml 用于细胞培养