抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

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抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

用于研究DNA损伤和修复的DNA损伤抗体

 

◆背景


  细胞暴露于紫外线(UV)辐射而产生的DNA损伤,在细胞周期停滞,在激活DNA修复,细胞杀伤,突变和肿瘤转化中起着重要作用。由UVB(280-315nm,阳光的组分)和UVC(200-280nm)诱导的DNA损伤的主要类型是cyclobutane pyrimidine dimers环丁烷嘧啶二聚体(CPD)和(6-4)photoproducts光产物(6-4PP),两者是由同一条DNA链上相邻嘧啶核苷酸之间形成的。大约70-80%的UV诱导的DNA损伤是CPDs,剩余的是6-4PPs和6-4PPs的杜瓦异构体引起的。这些类螺旋扭曲的DNA损伤在正常人细胞中通过核苷酸切除修复(NER)系统修复。 Mori等人制备了针对CPD或6-4PPs的特异性单克隆抗体。

  这些抗体的研制,使我们能够运用ELISA法定量检测从培养细胞或皮肤表皮中纯化的DNA中的光产物,并使用间接免疫荧光(IIF)显示和测量培养的细胞或皮肤中的DNA所包含的光产物。这项技术将有助于在许多研究领域中了解对UV和DNA损伤的细胞应答的分子机制,包括癌症研究,光生物学,皮肤病学,眼科,免疫学和美容学。


抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

 


来源


  杂交瘤是由小鼠骨髓瘤细胞与经过UVC照射小牛胸腺DNA缀合甲基化BSA免疫的Balb / c小鼠脾细胞融合而成。 收集该杂交瘤(克隆TDM-2)培养物上清液,并用冰冷的硫酸铵进行沉淀。 离心后,将溶解在少量双蒸水中的沉淀用PBS透析。 然后将透析液冻干。

 


反应性


  1)抗体结合单链DNA中的6-4PPs。
  2)抗体结合在每个双嘧啶序列(TT,TC,CT和CC)中形成的6-4PPs。
  3)抗体稳定地结合在由超过8个碱基组成的寡核苷酸中形成的6-4PPs。

 


交叉反应性


  抗体可以与细菌、人等所有生物的变性DNA中的6-4PPs结合。

 


特征


● 与受损DNA特异性反应

● 研究应用,包括ELISA和IC

● 用于研究DNA损伤修复机制

● 显示DNA损伤修复过程

● 适用于广泛的研究领域:光生物学,光学医学,癌症等

 


应用


● 免疫细胞化学;1:300
● ELISA;1:1500
● 免疫印迹; 未测试
● 免疫沉淀;未测试
● 免疫组化;未测试
● 流式细胞术;未测试

 


通过ELISA测量正常人细胞中UV诱导的DNA损伤的诱导和修复

抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

 


免疫荧光显示UV诱导的DNA损伤

抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

 


UV诱导6-4PP及其修复的可视化

抗(6-4)光产物(6-4 PPs)单克隆抗体(克隆:64M-2)

以0.2μm比例间隔拍摄25个连续图像重建核的三维图像


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