Whatman1005-047 Grade 5定性滤纸 GR 5 4.7CM 100/PK

特色

发表于2023年11月22日由whatman中国官网

【简单介绍】

Whatman定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。折叠好的定性滤纸与相同型号平整的滤纸相比，加快了流速和增加了负载力,定性滤纸―标准级,Wet Strengthened Grades湿强定性滤纸。湿强定性滤纸含有少量的化学稳定树脂，因而增强了湿强度。这不会因此引入任何明显的杂质到滤液中。但因树脂含氮，这些级别的滤纸不能用于凯氏定氮测定。

【简单介绍】

【详细说明】

原装进口英国Whatman1005-047 Grade 5定性滤纸 GR 5 4.7CM 100/PK

whatman官网 Whatman滤纸 Whatman滤膜

英国Whatman1005-047Grade 5定性滤纸 GR 5 4.7CM 100/PK

简单介绍：

Whatman定性滤纸的详细介绍：

Whatman定性滤纸Grade1/Grade2/Grade3/Grade4/Grade5/Grade6

Whatman定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。折叠好的定性滤纸与相同型号平整的滤纸相比，加快了流速和增加了负载力。

定性滤纸―标准级

Grade 1：11μm 在日常过滤中最经常使用的，中等保留力和流速。非常广泛地用于实验室应用，澄清液体。典型地用于沉淀物的定量分析分离，如硫酸铅、草酸钙和碳酸钙。

在农业方面，它用于土壤分析和种子测试；在食品方面，Grade 1滤纸常用于相关液体和抽离液体分离固体食品的常规方法。并且广泛用于教学中简单的定性分析分离。

在空气污染监测方面，有圆片和卷片可供使用，从气流中收集大气灰尘然后用光度计测量；在气体探测中滤纸用发色剂浸湿，用光反射来定量。

Grade 2：8μm 比Grade1保留力略强，但过滤时间却相对长些（即过滤速度相对慢些），吸附性比Grade 1强，已折叠好的为Grade 2V。除8μm大小颗粒的普通过滤处，它额外的吸附性能也派上了用场，例如，在植物生长实验中截留土壤营养，也用于监测空气和土壤测试中的特殊污染物。

Grade 3：6μm 厚度是Grade 1的两倍。负载力好，颗粒保留较小。由于湿强度好适合放在布氏漏斗中使用。其高吸附性能可用作为样品的载体。

Grade 4：20-25μm 非常适用于分析中常规生物液体和有机浸出物澄清的快速过滤，空气污染监测中只要求高流速但对细小颗粒收集要求不严的采样。

Grade 5：2.5μm 最高效的定性滤纸，用于收集小颗粒，流速漫。适用化学分析、澄清悬浮物和水泥土分析。

Grade 6：3μm 流速是Grade 5的两倍，但颗粒保留度相等。常被指定用于锅炉水分析

whatman官网 Whatman滤纸 Whatman滤膜 Whatman中国官网

订货信息–定性标准滤纸
直径（mm）	Grade 4	Grade 5	Grade 6	数量/ 包装
10	–	–	–	500
23	–	–	–	100
25	1004-325	1005-325	–	100
30	–	–	–	100
32	–	–	–	100
42.5	1004-042	1005-042	1006-042	100
47	1004-047	1005-047	–	100
55	1004-055	1005-055	–	100
70	1004-070	1005-070	1006-070	100
85	–	–	–	100
90	1004-090	1005-090	1006-090	100
110	1004-110	1005-110	1006-110	100
125	1004-125	1005-125	1006-125	100
150	1004-150	1005-150	1006-150	100
185	1004-185	1005-185	1006-185	100
240	1004-240	1005-240	1006-240	100
270	1004-270	–	–	100
320	1004-320	1005-320	–	100
400	1004-400	–	–	100
500	–	–	–	100
FilterCup 70*	–	–	–	25

英国沃特曼一级代理_whatman总代理_玻璃微纤维滤纸_纤维素层析纸

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*一次性购买带橡胶塞过滤杯底座–货号1600-900

上海金畔生物科技有限公司

文章号20207688-20207688

日本ATTO株式会社产品代理

特色

发表于2023年9月11日由whatman中国官网

日本ATTO株式会社产品代理
上海金畔生物代理日本ATTO株式会社全线产品，欢迎新老客户访问日本ATTO株式会社官网或者咨询我们获取相关产品信息。
ATTO CORPORATION
日本ATTO株式会社成立于1964年，是日本最著名的电泳仪器及生物仪器制造商，主要产品包括：各类小型电泳槽，电源，转印槽，干胶仪，胶染色仪，制备电泳，等电电泳，生物发光检测仪器。ATTO的小型电泳槽做工精致，电源精巧，进入国内两年，已深得市场厚爱。
Back in the 1960s, scholars in the field of biochemistry were hard pressed to find the types of sophisticated equipment they needed for their pioneering research. Atto Corporation was established as a specialist manufacturer in 1964 to meet their demands. The company founders had every confidence that the field of biochemistry was destined to grow. In the four decades since, Atto has invested substantial resources and money in research and development under the guidance of leading biochemists.
Since our establishment, we have continued to develop, manufacture, and sell biological macromolecules and analytical products such as chromatographs and electrophoresis apparatus. Over the last decade we have also developed and marketed a luminescence device for the research of gene expression.
Our name Atto comes from “atto,” an incredibly small unit equal to 1 x 10-18, or one-quintillionth. Modern scientists and technologists now hope to delve deeper into exploratory research on the “atto” scale. This is a field Atto is poised to enter.
In recent years, the Japanese government has begun to promote joint research between universities and enterprises. However, Atto has been engaged in collaboration with universities, and has already achieved several fruitful results to date. One of the results of collaboration won an award from the Ministry of Education, Culture, Sports, Science and Technology in 2001.
日本ATTO株式会社产品目录：

一维凝胶电泳
2D凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳
预制凝胶
手工凝胶铸造
电源
电泳试剂
WESTERNBLOTTING
吸光剂和膜
热块，摇床
凝胶文献系统
活细胞研究
发光计
发光试剂
佩里斯塔泵
紫外监视器，分式收集器
照明器
试剂

日本ATTO水平半干转印仪 AE-6687
主要特点
. 最佳性能，典范之做，可同时满足蛋白和核酸转印
. 可拆卸，易清洗,电极为钛铂合金
. 缓冲液量少，只需湿透膜和滤纸即可
. 所需电流小，避免产生热量，避免击穿
. 合盖通电
. 保护二极管，避免电源反接
详细说明技术参数
.电极面积：97mm(D) X 196 mm(W)(AE-6687)202mm(D) X 196 mm(W)(AE-6688)
.电极间距：最大55mm,同时可转印六块胶]
.转印胶数量：最多可同时转印6块中型胶
.电极材料：阳极:铂金,阴极:不锈钢
.安全措施：安全盖，防逆向通电装置

Megazyme酶试剂盒2022年代理商目录价

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

Product Code	Product Name	目录价
AB-JIM5	JIM5 [Anti-Homogalacturonan] Antibody	¥2,900.00
AB-LM10	LM10 [Anti-Xylan] Antibody	¥2,900.00
AB-LM11	LM11 [Anti-Xylan] Antibody	¥2,900.00
AB-LM15	LM15 [Anti-Xyloglucan] Antibody	¥2,900.00
AB-LM19	LM19 [Anti-Homogalacturonan] Antibody	¥2,900.00
AB-LM20	LM20 [Anti-Homogalacturonan] Antibody	¥2,900.00
AB-LM6	LM6 [Anti-1,5-Î±-L-Arabinan] Antibody	¥2,900.00
AS-ACET	Acetic Acid Standard Solution (1.8 g/L)	¥1,900.00
AS-AMIA	Ammonia Standard Solution (0.1 g/L)	¥1,900.00
AS-CITR	Citric Acid Standard Solution (3 g/L)	¥1,900.00
AS-DATE	D-Lactic Acid Standard Solution	¥1,900.00
AS-DFRUC	D-Fructose Standard Solution (6 g/L	¥1,900.00
AS-DGLUC	D-Glucose Standard Solution (6 g/L)	¥1,900.00
AS-ETOH	Ethanol Standard Solution (0.3 g/L)	¥1,900.00
AS-LATE	L-Lactic Acid Standard Solution	¥1,900.00
AS-LMAL	L-Malic Acid Standard Solution (6 g/L)	¥1,900.00
AS-NOPA	Isoleucine Standard Solution (0.2 g N/L)	¥1,900.00
AS-TART	L-Tartaric Acid Standard Solution (10 g/L)	¥1,900.00
B-BISTRIS250	BIS-TRIS Buffer salt	¥2,100.00
B-CAPS200	CAPS Buffer salt	¥1,900.00
B-CAPSO250	CAPSO Buffer salt	¥2,100.00
B-GLYGLY250	Glycylglycine Buffer salt	¥2,100.00
B-HEPES250	HEPES Buffer salt	¥2,100.00
B-MES250	MES monohydrate Buffer salt	¥2,100.00
B-MOPS250	MOPS Buffer salt 250 grams	¥2,100.00
B-PIPES250	PIPES Buffer salt	¥2,100.00
B-TRIS500	Tris Buffer salt 500 grams	¥1,900.00
C-ATP-100G	Adenosine 5′-triophosphate (ATP)	¥7,400.00
C-ATP-20G	Adenosine 5′-triphosphate (ATP) 20g	¥2,100.00
C-CLFR-10G	Calcofluor Fluorescent Stain	¥3,300.00
C-CLFR-5G	Calcofluor Fluorescent Stain	¥1,900.00
C-COA500	Coenzyme A (trilithium salt) 500mg	¥13,200.00
C-NAD-25G	ß-NicotinamideAdenine Di-nucleotide	¥8,800.00
C-NAD-5G	ß-NicotinamideAdenine Di-nucleotide	¥2,500.00
C-NADH-10G	Î²-Nicotinamide Adenine Di-nucleotide Reduced Salt	¥8,000.00
C-NADH-2G	ß-Nicotinamide Adenine	¥2,000.00
C-NADP-10G	ß-Nicotinamide adenine	¥13,200.00
C-NADP-2G	ß-Nicotinamide adenine	¥3,200.00
C-PEP-10G	Phosphoenolpyruvate (PEP)	¥12,500.00
C-PEP-2G	Phosphoenolpyruvate (PEP) – 2g	¥2,900.00
D-ADFTB	Advanced Dietary Fiber Technology	¥3,300.00
D-BIB	Barley is Better	¥500.00
D-IBMKIII	Megazyme Incubation Bath MK III	¥7,800.00
D-KITORGANISER	Kit Component Organiser	¥200.00
D-MQTUB	MegaQuant Colorimeter Tubes	¥1,100.00
D-MQWAVE-1	MegaQuantâ„¢ Wave Spectrophotometer / MegaQuantâ„¢ Wave Starter Pack (Chemistry Analyzer)Â	¥43,000.00
D-MQWAVE-2	MegaQuantâ„¢ Wave Spectrophotometer / MegaQuantâ„¢ Wave Starter Pack (Chemistry Analyzer)Â	¥67,400.00
D-PICC	A Practical Introduction to Cereal	¥200.00
D-SFTUBE	Tubes for MegaQuantâ„¢ Wave Spectrophotometer (Chemistry Analyzer)	¥700.00
D-TDFBTH	Water Bath for Total Dietary Fibre	¥9,300.00
E-ABFAN	a-L-Arabinofuranosidase	¥2,800.00
E-ABFBO17	a-L-Arabinofuranosidase B17	¥2,700.00
E-ABFBO21	Î±-L-Arabinofuranosidase B21 (Bacteroides ovatus)	¥2,900.00
E-ABFBO25	a-L-Arabinofuranosidase B25	¥2,800.00
E-ABFCJ	Alpha-L-Arabinofuranosidase	¥3,000.00
E-ABFCT	Alpha-L-Arabinofuranosidase	¥3,000.00
E-ABFUM	Alpha-L-Arabinofuranosidase	¥2,800.00
E-ACPEC	Acid phosphatase (E.coli) 400U	¥2,300.00
E-ACSBS	Acetyl-CoA synthase (B. subtilis)	¥4,000.00
E-ADHEC	Alcohol Dehyrogenase (E.coli)	¥2,500.00
E-AFAM2	Alpha-L-Arabinofuranosidase	¥3,000.00
E-AFASE	Alpha-L-Arabinofuranosidase	¥2,800.00
E-AGALPS	Alpha-Galactosidase (Penicillium	¥2,800.00
E-AGLAN	Alpha-Galactosidase (A. niger)	¥3,100.00
E-AGLANP	Alpha-Galactosidase (A. niger)	¥3,400.00
E-AGLGU	Alpha-Galactosidase (Guar) 1000U	¥3,100.00
E-AGUBS	a-D-Glucuronidase	¥2,600.00
E-ALGLS	Alginate lyase (Sphingomonas sp)	¥2,800.00
E-ALPEC	Alkaline phosphatase (E.coli) 400U	¥2,100.00
E-AMANBT	a-D-Mannosidase	¥2,800.00
E-AMANTM	a-(1-2,3,4,6)-D-Mannosidase	¥2,800.00
E-AMGDF-100ML	Amyloglucosidase (A.niger) 100ml	¥5,600.00
E-AMGDF-10ML	Amyloglucosidase (A.niger) 10mL	¥1,100.00
E-AMGDF-40ML	Amyloglucosidase (A.niger) 40ml	¥2,800.00
E-AMGDF-A-100ML	Amyloglucosidase ANKOM 100mL	¥5,400.00
E-AMGDFNG-20ML	Amyloglucosidase (A.niger) 20 mL GF	¥2,700.00
E-AMGDFNG-50ML	Amyloglucosidase (A.niger) 50 mL GF	¥5,400.00
E-AMGDFPD	Amyloglucosidase (powder)	¥3,300.00
E-AMGFR-100MG	Amyloglucosidase (A.niger) 100mg	¥2,800.00
E-AMGFR-500MG	Amyloglucosidase (A.niger) 500mg	¥8,000.00
E-AMGPU	Amyloglucosidase (Rhizopus sp.) 5KU	¥3,300.00
E-AMPK	Adenylate Kinase (myokinase)	¥3,000.00
E-ANAAM	Alpha-Amylase (A. oryzae) 20KU	¥2,600.00
E-ANAGM	Alpha-N-acetylgalactosaminidase	¥3,600.00
E-ARBACJ	endo-/exo-Arabinanase (C.japonicus)	¥3,000.00
E-ASNEC	Asparaginase (E.coli) 400U	¥2,100.00
E-AXEAO-1KU	Acetylxylan esterase (Orpinomyces	¥1,800.00
E-AXEAO-3KU	Acetylxylan esterase (Orpinomyces	¥3,500.00
E-AXSEC	a-Xylosidase (Escherichia coli)	¥2,800.00
E-BAASS	a-Amylase (B. amyloliquefaciens)	¥2,000.00
E-BAMBC	ß-Amylase (B.cereus) 20K units	¥3,200.00
E-BARBL-20KU	ß-Amylase (Barley; liquid) 20KU	¥2,200.00
E-BARBL-50KU	ß-Amylase (Barley; liquid) 50KU	¥4,000.00
E-BARBP-1G	ß-Amylase (Barley; powder)	¥2,800.00
E-BARBP-2G	ß-Amylase (Barley; powder)	¥4,600.00
E-BGLAEC	ß-Glucuronidase (E.coli)	¥3,600.00
E-BGLAN	ß-Galactosidase (A.niger) 8KU	¥2,900.00
E-BGLUC	ß-Glucosidase (A.niger) 200U	¥4,200.00
E-BGOG	b-Galactosidase + Oligo-a-1,6-Gluco	¥2,900.00
E-BGOSAG	ß-Glucosidase – 600U.	¥3,200.00
E-BGOSPC	ß-Glucosidase (P. chrysosporium)	¥3,000.00
E-BGOSTM	ß-Glucosidase	¥3,700.00
E-BLAAM-100ML	Alpha-Amylase (B.licheniformis)	¥5,000.00
E-BLAAM-10ML	Alpha-Amylase (B. licheniformis)	¥1,000.00
E-BLAAM-40ML	Alpha-Amylase (B. licheniformis)	¥2,500.00
E-BLAAM-A-100ML	a-Amylase (B.licheniformis) ANKOM	¥1,200.00
E-BMABC	endo-1,4 ß-Mannanase	¥2,900.00
E-BMABS	endo-1,4-ß-Mannanase (bacillus sp.)	¥2,600.00
E-BMACJ	endo-1,4-ß-Mannanase (C.japonicus)	¥3,200.00
E-BMANN	endo-1,4-ß-Mannanase (A.niger) 600U	¥2,600.00
E-BMATM	endo-1,4-ß- Mannanase (T.maritima)	¥2,300.00
E-BMOSCF	ß-Mannosidase (C. fimi) – 200U	¥3,200.00
E-BNAHEX	ß-N-acetylhexosaminidase	¥3,000.00
E-BNAHP	ß-N-Acetylhexosaminidase	¥2,800.00
E-BROM	Bromelain from pineapple stems	¥3,700.00
E-BSPRPD	Protease (Subtilisin A)	¥3,200.00
E-BSPRT-100ML	Protease (Subtilisin A) (100mL)	¥8,000.00
E-BSPRT-10ML	Protease (Subtilisin A) (10mL)	¥1,600.00
E-BSPRT-40ML	Protease (Subtilisin A) (40ml)	¥4,000.00
E-BSPRT-A-100ML	Protease (Subtilisin A) ANKOM	¥3,900.00
E-BSTAA	Î±-Amylase (Thermostable) (Bacillus sp.)	¥1,900.00
E-BXSEBP	ß-Xylosidase (B.pumilus) 200U	¥2,900.00
E-BXSR-1KU	exo-1,4-ß-D-Xylosidase	¥1,800.00
E-BXSR-3KU	exo-1,4-ß-D-Xylosidase	¥3,400.00
E-CATLQ	Catalase (Aspergillus niger)	¥3,100.00
E-CBHI	Cellobiohydrolase I – 20mg	¥2,200.00
E-CBHIIM	Cellobiohydrolase II	¥2,700.00
E-CELAN	Cellulase (A. niger) – 2,000U	¥2,800.00
E-CELBA	Cellulase (B. amyloliquefaciens)	¥3,100.00
E-CELTE	Cellulase (T.emersonii) 2,000 U	¥3,000.00
E-CELTH	Cellulase (endo-1,4-ß-D-glucanase)	¥2,800.00
E-CELTM	Cellulase (T.maritima) 2K units	¥3,200.00
E-CELTR	Cellulase (endo-1,4-ß-D-glucanase)	¥2,900.00
E-CHITN	Chitinase (Clostridium thermocellum)	¥2,900.00
E-CITEC	Citrate synthase (E. coli) 2500U	¥3,000.00
E-CMPK	Cytidylate Kinase (prokaryote)	¥3,300.00
E-DEXT	Dextranase (Chaetomium sp.)	¥1,900.00
E-DIAEC	Diaphorase (E. coli) 1000U	¥3,200.00
E-DLDHLM	D-Lactate dehydrogenase	¥2,300.00
E-EARAB	endo-1,5-alpha-L-Arabinanase 400U	¥2,600.00
E-ECBGAL	ß-Galactosidase (E. coli)	¥3,200.00
E-EGALN	endo-1,4-B-D-Galactanase 1KU	¥2,900.00
E-ENDOIAN	endo-Inulinase (GH32)	¥2,400.00
E-ENLEV	endo-Levanase (Bacteroides thetaiotaomicron)	¥2,900.00
E-EXBGOS	exo-1,3-ß-D-glucanase 300 units +	¥3,200.00
E-EXBGTV	exo-1,3-Beta-glucanase (GH5) 400u	¥2,800.00
E-EXG5AO	exo-1,3-Beta-glucanase(GH5) 500u	¥2,600.00
E-EXOIAN	exo-Inulinase (A.niger) (GH32)	¥2,500.00
E-EXPGA	exo-Polygalacturonase	¥2,900.00
E-FAERU	Feruloyl Esterase (Rumen	¥2,800.00
E-FAEZCT	Feruloyl Esterase	¥2,700.00
E-FDHCB	Formate dehydrogenase (C.boidinii)	¥3,000.00
E-FRLQPU	Fructanase Mixture (Ultrapure liqu)	¥4,800.00
E-FRMXLQ	Fructanase Mixture (Purified) 10ml	¥3,700.00
E-FRMXPD	Fructanase Mixture – 20,000U	¥3,700.00
E-FRPDPU	Fructanase Mixture (Ultrapure powd)	¥4,800.00
E-FUCHS	a-(1-2,3,4,6)-L-Fucosidase (Homo sa	¥2,800.00
E-FUCM	1,2-a-L-Fucosidase (microbial)	¥3,600.00
E-FUCTM	Alpha Fucosidase (T.maritima)	¥2,100.00
E-GALCJ	endo-1,4-ß-D-Galactanase	¥3,200.00
E-GALCT	endo-1,4-ß-D-Galactanase	¥3,200.00
E-GALDH	Galactose Dehydrogenase	¥3,200.00
E-GALMUT	Galactose Dehydrogenase /	¥3,700.00
E-GAMP	Glucoamylase P (Hormoconis resinae)	¥3,000.00
E-GERF	Glucuronoyl Esterase (Ruminococcus flavefaciens)	¥2,900.00
E-GLUKEC	Gluconokinase (E.coli)	¥2,800.00
E-GLUTEC	Glutaminase (E.coli) 2500U	¥2,400.00
E-GMPK	Guanylate Kinase (prokaryote)	¥3,300.00
E-GOTEC	Glutamate Oxaloacetate Transaminase	¥3,200.00
E-GOXCA	Glucose Oxidase / Catalase Mixture	¥1,900.00
E-GPDH5	Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase	¥2,900.00
E-GPDHEC	Glucose 6-phosphate dehydrogenase	¥2,800.00
E-GPTBS	Glutamate pyruvate transaminase	¥3,300.00
E-HBDH	3-Hydroxybutyrate dehydrogenase	¥3,200.00
E-HEX10	Hexokinase from Yeast 10,000U	¥2,300.00
E-HKGDH	Hexokinase (420 U/ml) +	¥2,600.00
E-ICDHBS	Isocitrate dehydrogenase	¥3,000.00
E-INDHBS	myo-Inositol Dehydrogenase	¥2,500.00
E-INVPD-2G	Invertase Powder 2 grams	¥1,900.00
E-INVPD-5G	Invertase Powder 5 grams	¥3,800.00
E-INVRT	Invertase (B-Fructofuranosidase)	¥2,600.00
E-ISAMY	Isoamylase (Glycogen 6-glucanohydrolase)Â	¥3,800.00
E-ISAMYFO-200U	Isoamylase (F. odoratum) 200 U	¥1,800.00
E-ISAMYFO-800U	Isoamylase (F. odoratum) 800 U	¥5,000.00
E-ISAMYHP	Isoamylase HP (Glycogen 6-glucanohydrolase)	¥1,900.00
E-ISPUAN	Isopullulnase (Aspergillus niger)	¥3,000.00
E-LAMHV	endo-1,3-ß-D-Glucanase (Barley)	¥2,800.00
E-LAMSE	endo-1,3-ß-D-Glucanase 100U	¥2,600.00
E-LICACT	Non specific Endo 1,3(4)ß-glucanase	¥4,200.00
E-LICHN	Lichenase	¥4,500.00
E-LLDHP	L-Lactate dehyrogenase (Porcine)	¥2,100.00
E-LMDHEC	L-Malate dehydrogenase 50,000U	¥2,500.00
E-MAL6M	Glucan 1,4-a-maltohexaosidase	¥2,800.00
E-MALAA	Maltogenic Amylase (Bacillus sp.)	¥1,900.00
E-MALBS	Oligo-a-(1,4-1,6)-Glucosidase	¥2,800.00
E-MALTS	Alpha-Glucosidase (Maltase)	¥2,900.00
E-MAST	Malt Amylase Standard 100 mL	¥2,000.00
E-MASTP	Malt amylase standard (powder)	¥3,700.00
E-MNHPF	Mannitol dehydrogenase	¥2,500.00
E-OAGUM	Oligo-1,6-Glucosidase (GH13)	¥2,800.00
E-OGLYEF	endo-Î±-N-Acetylgalactosaminidase (Enterococcus faecalis)	¥3,600.00
E-PANAA-4G	Alpha Amylase (Porcine Pancreas)	¥2,000.00
E-PANAA-12G	Alpha Amylase (Porcine Pancreas)	¥4,800.00
E-PAPN	Papain (Carica papaya)	¥2,800.00
E-PCLYAN	Pectate Lyase in 50% Glycerol	¥2,600.00
E-PCLYAN2	Pectate Lyase (Aspergillus sp.)	¥2,600.00
E-PGALPC	endo-Polygalacturonanase (Pectobacterium carotovorum)	¥2,600.00
E-PGALUSP	endo-Polygalacturonanase M2	¥2,600.00
E-PGDHEC	6-Phosphogluconate dehydrogenase	¥3,200.00
E-PGIBS-50KU	Phosphoglucose Isomerase	¥12,400.00
E-PGIBS-5KU	Phosphoglucose Isomerase	¥1,900.00
E-PGIEC-10KU	Phosphoglucose Isomerase	¥2,500.00
E-PGIEC-50KU	Phosphoglucose Isomerase	¥9,700.00
E-PGISC-50KU	Phosphoglucose Isomerase	¥16,200.00
E-PGISC-5KU	Phosphoglucose Isomerase	¥2,300.00
E-PGM	Alpha-Phosphoglucomutase(microbial)	¥2,800.00
E-PKRM	Pyruvate kinase (Rabbit Muscle)	¥2,800.00
E-PLYCJ	Pectate Lyase (C. japonicus) 2500U	¥3,000.00
E-PMIEC	Phosphomannose Isomerase	¥2,700.00
E-PRKMB	Proteinase K (Molecular Biology Grade)	¥4,800.00
E-PROTOF	Protoplast F – 2.5 mL	¥2,900.00
E-PTABS	Phosphotransacetylase (B.subtilis)	¥2,800.00
E-PULBL	Pullulanase M2 (B. licheniformis)	¥2,900.00
E-PULKP	Pullulanase M1 (K. planticola)	¥2,900.00
E-RHAMS	Alpha-Rhamnosidase (prokaryote)	¥2,800.00
E-SCOAS	Succinyl-CoA synthetase	¥3,200.00
E-SIALCP	Exo-Alpha-Sialidase (C.perfringens)	¥3,600.00
E-SIALST	Exo-Alpha-Sialidase (S.typhimurium)	¥3,000.00
E-SUCR	Sucrase (Maltase) (yeast) 300 U	¥3,300.00
E-SUCRBG	Sucrase plus ß-Galactosidase	¥2,800.00
E-TMPK	Thymidylate Kinase (prokaryote)	¥3,300.00
E-TREH	Trehalase (prokaryote) 4,200 units	¥2,100.00
E-TRNGL	Alpha-Glucosidase(Transglucosidase)	¥2,600.00
E-TSAGL	Alpha-Glucosidase 1,500 U	¥2,600.00
E-TSAGS	Alpha-Glucosidase	¥2,800.00
E-UMPK	Uridylate kinase (prokaryote)	¥3,200.00
E-XANLB	Xanthan Lyase (Bacillus sp)	¥2,800.00
E-XEGP	Xyloglucanase (Paenibacillus sp)	¥2,700.00
E-XGP74	Xyloglucanase (GH74)	¥2,700.00
E-XYAN4	Xylanase M4 (A.niger) 8000 U	¥2,900.00
E-XYLAA	endo-1,4-ß-Xylanase (Aspergillus	¥2,800.00
E-XYLATM	endo-1,4-ß-Xylanase (T.maritima)	¥2,900.00
E-XYLMUT	Xylose Dehydrogenase – Mutarotase	¥2,900.00
E-XYLNP	endo-1,4-ß-Xylanase (N.patriciarum)	¥3,100.00
E-XYNACJ	endo-1,4-ß-Xylanase (C.japonicus)	¥3,000.00
E-XYNAP	endo-1,4-ß-Xylanase (A.punctata)	¥3,000.00
E-XYNBCM	endo-1,4-ß-Xylanase (C.mixtus)	¥3,200.00
E-XYNBS	endo-1,4-ß-Xylanase (B.stearother	¥2,700.00
E-XYRU6	ß-Xylanase M6	¥2,900.00
E-XYTR1	Xylanase M1 (T.viride) 8000 U	¥2,900.00
E-XYTR3	Xylanase M3 (T.longibrachiatum;	¥2,900.00
G-AMBH	Ambersep 200 H+ Ion Exchange Resin	¥2,400.00
G-AMBOH	Amberlite FPA OH Ion Exchange	¥2,500.00
G-CEL-100G	Celite – 100g	¥1,200.00
G-CEL-500G	Celite – 500g	¥3,100.00
G-LCYST200	L-Cysteine Hydrochloride	¥2,100.00
I-AAVIC	Azo-Avicel 10g	¥2,600.00
I-ACELL	Azo-Alpha-Cellulose 10g	¥2,600.00
I-AZAMY	AZCL-Amylose 5g	¥2,600.00
I-AZAMYF	AZCL-Amylose (fine) 5g	¥2,600.00
I-AZBGL	AZCL-Barley ß-Glucan 3g	¥3,100.00
I-AZBGLF	AZCL-Barley ß-Glucan (fine) 3g	¥3,100.00
I-AZCAS	AZCL-Casein 4g	¥2,900.00
I-AZCEL	AZCL-HE-Cellulose 3g	¥2,800.00
I-AZCELF	AZCL-HE-Cellulose (fine)	¥2,800.00
I-AZCHAN	AZCL Chitosan 4 grams	¥2,400.00
I-AZCHANF	AZCL Chitosan (fine) 4 grams	¥2,400.00
I-AZCOL	AZCL-Collagen 4g	¥2,900.00
I-AZCUR	AZCL-Curdlan 3g	¥2,600.00
I-AZCURF	AZCL-Curdlan (fine) 3g	¥2,600.00
I-AZDAR	AZCL-Arabinan (Debranched) 3g	¥3,100.00
I-AZDEX	AZCL-Dextran 3g	¥2,200.00
I-AZDEXF	AZCL-Dextran (No. B-512) (fine)	¥2,200.00
I-AZGLP	AZCL-Galactan (Potato) 3g	¥3,100.00
I-AZGLPF	AZCL-Galactan (Potato) (fine) 3g	¥3,100.00
I-AZGMA	AZCL-Galactomannan (carob) 3g	¥2,900.00
I-AZGMAF	AZCL-Galactomannan (Carob) (fine)	¥2,800.00
I-AZPAC	AZCL-Pachyman 3g	¥2,600.00
I-AZPUL	AZCL-Pullulan 3g	¥2,600.00
I-AZPULF	AZCL-Pullulan (fine) 3g	¥2,600.00
I-AZRHI	AZCL-Rhamnogalacturonan I – 2grams	¥3,900.00
I-AZWAX	AZCL-Arabinoxylan (Wheat) 3g	¥2,900.00
I-AZWAXF	AZCL-Arabinoxylan (Wheat) (fine) 3g	¥2,900.00
I-AZXBE	AZCL-Xylan (Beechwood)	¥2,600.00
I-AZXBW	AZCL-Xylan (Birchwood) 4g	¥2,600.00
I-AZXYG	AZCL-Xyloglucan (Tamarind) 4g	¥2,900.00
I-AZXYGF	AZCL-Xyloglucan (Tamarind) (fine)	¥2,800.00
I-RCLAMYF	RedCL-Amylose (fine)	¥2,600.00
I-RCLBGLF	RedCL-Barley ß-Glucan (fine) 3g	¥3,100.00
I-RCLCELF	RedCL-HE-Cellulose (fine) 3g	¥2,800.00
I-RCLCURF	RedCL-Curdlan (fine) 3g	¥2,600.00
I-RCLGMAF	RedCL-Galactomannan (Carob) (fine)	¥2,800.00
I-RCLPULF	RedCL-Pullulan (fine) 3g	¥2,600.00
I-RCLWAXF	RedCL-Arabinoxylan (Wheat)(fine) 3g	¥2,900.00
I-RCLXYGF	RedCL-Xyloglucan (Tamarind) (fine)	¥2,800.00
K-ACET	Acetic Acid (ACS; manual format)	¥2,800.00
K-ACETAF	Acetic Acid (ACS; analyser format)	¥2,900.00
K-ACETAK	Acetic Acid (AK; analyser format)	¥3,200.00
K-ACETGK	Acetic Acid (GK; analyser format)	¥2,800.00
K-ACETRM	Acetic Acid (AK; rapid manual	¥3,400.00
K-ACHDF	Available Carbohydrates/Dietary	¥5,300.00
K-ACHYD	Acetaldehyde	¥2,300.00
K-AGLUA	Alpha-Glucuronidase	¥3,800.00
K-AMIAR	Ammonia (Rapid)	¥2,500.00
K-AMYL	Amylose/Amylopectin	¥5,200.00
K-AMYLSD	a-Amylase (‘Sprout Damaged’ method)	¥4,100.00
K-ARAB	Arabinan Assay Kit	¥4,600.00
K-ARGA	L-Arabinose/D-Galactose (Rapid) Kit	¥4,000.00
K-ASCO	L-Ascorbic Acid (L-Ascorbate)	¥2,300.00
K-ASNAM	L-Asparagine/L-Glutamine/ Ammonia	¥3,600.00
K-ASPTM	Aspartame	¥3,200.00
K-AVCHO	Available Carbohydrates	¥4,600.00
K-AZOWAX	Xylanase (Azo-Wax Format)	¥5,200.00
K-BETA3	ß-Amylase (Betamyl-3 method)	¥4,300.00
K-BGLU	ß-Glucan	¥4,200.00
K-CATAL	Catalase Assay Kit	¥3,900.00
K-CELLG3	endo-Cellulase	¥6,000.00
K-CELLG5-2V	Cellulase Assay Kit (CellG5 Method)	¥3,800.00
K-CELLG5-4V	Cellulase Assay Kit (CellG5 Method)	¥5,700.00
K-CERA	Alpha Amylase (Ceralpha method)	¥4,200.00
K-CITR	Citric Acid	¥3,000.00
K-DATE	D-Lactic Acid (D-Lactate) (Rapid)	¥3,200.00
K-DLATE	D/L-Lactic Acid	¥5,600.00
K-DMAL	D-Malic Acid	¥3,700.00
K-DSTRS	Digestible and Resistant Starch	¥3,800.00
K-EBHLG	ß-Glucan (Yeast-Enzymatic)	¥4,100.00
K-ETOH	Ethanol Assay Kit	¥2,400.00
K-ETOHLQR	Ethanol (Liquid Ready Reagents)	¥3,800.00
K-ETSULPH	Total Sulphite Kit (Enzymatic)	¥3,200.00
K-FORM	Formic Acid	¥2,800.00
K-FRGLMQ	D-Fructose/D-Glucose (MegaQuant	¥3,200.00
K-FRGLQR	D-Fructose/ D-Glucose (Liquid Ready	¥2,700.00
K-FRUC	Fructan	¥4,800.00
K-FRUCHK	Fructan (Hexokinase format)	¥4,900.00
K-FRUGL	D-Fructose / D-Glucose	¥3,400.00
K-FRHYD	Formaldehyde Assay Kit	¥2,500.00
K-FSULPH	Free Sulphite Kit	¥2,500.00
K-FUCOSE	L-Fucose Kit	¥3,200.00
K-GALM	Galactomannan (Carob or guar)	¥4,900.00
K-GAMINE	D-Glucosamine (D-Glucosamine	¥3,000.00
K-GATE	D-Gluconate/D-Glucono-d-lactone	¥4,100.00
K-GCROL	Glycerol	¥2,200.00
K-GCROLGK	Glycerol GK	¥2,200.00
K-GEUX3	Glucuronoyl Esterase Assay Kit	¥5,600.00
K-GLNAM	L-Glutamine/Ammonia (Rapid)	¥3,400.00
K-GLOX	Glucose Oxidase	¥2,700.00
K-GLUC	D-Glucose (GOPOD format)	¥3,500.00
K-GLUHK-110A	D-Glucose(Hexokinase format;regular	¥2,700.00
K-GLUHK-220A	D-Glucose (Hexokinase format;large)	¥4,700.00
K-GLUM	Glucomannan	¥5,100.00
K-GLUT	L-Glutamic Acid (MSG)	¥2,200.00
K-HDBA	D-3-Hydroxybutyric Acid	¥3,000.00
K-HISTA	Histamine Assay Kit	¥5,500.00
K-INOSL	myo-Inositol Assay Kit	¥3,900.00
K-INTDF	Integrated Total Dietary Fibre	¥4,000.00
K-ISOC	D-Isocitric Acid	¥2,700.00
K-LACGAR	Lactose / D-Galactose (Rapid)	¥5,700.00
K-LACSU	Lactose/Sucrose/D-Glucose	¥4,300.00
K-LACTUL	Lactulose	¥3,700.00
K-LARGE	L-Arginine/Urea/Ammonia (Rapid)	¥3,200.00
K-LATE	L-Lactic Acid	¥2,100.00
K-LMAL-116A	L-Malic Acid – 116 Assays	¥3,400.00
K-LMAL-58A	L-Malic Acid – 58 Assays	¥2,000.00
K-LMALAF	L-Malic Acid (Analyser format)	¥3,500.00
K-LMALMQ	L-Malic Acid (MegaQuant format)	¥3,200.00
K-LMALQR	L-Malic Acid (Liquid Ready Reagent)	¥2,700.00
K-LOLAC	Lactose Assay Kit – Sequential/High Sensitivity	¥5,300.00
K-MALTA	Malt Amylase	¥4,200.00
K-MANGL	D-Mannose/D-Fructose/D-Glucose	¥3,700.00
K-MANOL	D-Mannitol / L-Arabitol	¥3,900.00
K-MASUG	Maltose/Sucrose/D-Glucose	¥3,600.00
K-MBG4	Malt ß-Glucanase/Lichenase Assay	¥4,400.00
K-MBGL	ß-Glucanase (Malt & microbial)	¥3,900.00
K-PANOPA	Primary Amino Nitrogen (PANOPA)	¥2,300.00
K-PDCAAS	Protein Digestibility Assay Kit	¥4,800.00
K-PECID	Pectin Identification	¥4,700.00
K-PHOS	Phosphate Assay Kit	¥4,800.00
K-PHYT	Phytic Acid/Total Phosphorus	¥2,800.00
K-PULLG6	Pullulanase / Limit-Dextrinase	¥4,900.00
K-PYRUV	Pyruvic Acid	¥2,500.00
K-RAFGA	Raffinose/D-Galactose	¥4,700.00
K-RAFGL	Raffinose/Sucrose/D-Glucose	¥4,700.00
K-RAPRS	Resistant Starch (Rapid)	¥4,300.00
K-RHAMNOSE	L-Rhamnose Assay Kit	¥3,100.00
K-RINTDF	Rapid Integrated Total Dietary	¥4,900.00
K-RSTAR	Resistant Starch	¥4,200.00
K-RSTCL	Resistant Starch Control Flours	¥2,600.00
K-SDAM	Starch Damage	¥4,200.00
K-SORB	D-Sorbitol / Xylitol	¥3,500.00
K-SUCC	Succinic Acid	¥3,300.00
K-SUCGL	Sucrose / D-Glucose	¥4,000.00
K-SUFRG	Sucrose/ D-Fructose/ D-Glucose	¥3,700.00
K-SULPH	Total and Free Sulphite	¥2,500.00
K-TART	Tartaric Acid	¥3,200.00
K-TDFC	Total Dietary Fibre Controls	¥4,200.00
K-TDFR-100A	Total Dietary Fibre (100 Assays)	¥3,500.00
K-TDFR-200A	Total Dietary Fibre (200 Assays)	¥5,700.00
K-TREH	Trehalose	¥4,200.00
K-TSCK	Total Starch Control Flours	¥2,600.00
K-TSHK	Total Starch HK	¥5,000.00
K-TSTA-100A	Total Starch (AA/AMG) 100 Assays	¥4,600.00
K-TSTA-50A	Total Starch (AA/AMG) 50 Assays	¥2,800.00
K-TSULPH	Total Sulphite	¥2,500.00
K-URAMR	Urea/Ammonia (Rapid)	¥3,000.00
K-URONIC	D-Glucuronic/D-Galacturonic	¥3,800.00
K-XYLOSE	D-Xylose	¥4,200.00
K-XYLS	Xylanase (Xylazyme AX format)	¥5,200.00
K-XYLX6-1V	endo-Xylanase (XylX6 method) 100A	¥3,900.00
K-XYLX6-2V	endo-Xylanase (XylX6 method) 100A	¥5,700.00
K-YBGL	ß-Glucan (Yeast & Mushroom)	¥4,200.00
L-CONA-1000MG	Concanavalin A (Con A) 1g	¥7,000.00
L-CONA-200MG	Concanavalin A (Con A) – 200mg	¥2,100.00
O-4MUAM2	4-Methylumbelliferyl-Î±-mannobioside	¥5,000.00
O-4MUAM3	4-Methylumbelliferyl	¥5,000.00
O-4MUAM4	4-Methylumbelliferyl-Î±-mannotetraosideÂ	¥5,000.00
O-4MUBG3	4-Methylumbelliferyl-ß-(1,3:1,4)-gl	¥4,900.00
O-4MUG2	4-Methylumbelliferyl-ß-cellobioside	¥3,000.00
O-4MUG3	4-Methylumbelliferyl	¥8,100.00
O-4MUG4	4-Methylumbelliferyl-Î²-cellotetraoside	¥8,000.00
O-4MUG5	4-Methylumbelliferyl-Î²-cellopentaoside	¥8,000.00
O-4MULAM2	4-Methylumbelliferyl-Î²-laminaribioside	¥5,800.00
O-4MULAM3	4-Methylumbelliferyl-Î²-laminaritrioside	¥5,800.00
O-4MULAM4	4-Methylumbelliferyl-Î²-laminaritetraoside	¥5,800.00
O-4MUNAG	4-Methylumbelliferyl-Î²-N-acetyl-D-glucosaminide	¥2,300.00
O-4MUX2-10MG	4-Methylumbelliferyl-ß-Xylobioside	¥4,100.00
O-4MUX2-5MG	4-Methylumbelliferyl-Î²-xylobioside	¥2,400.00
O-4MUX3	4-Methylumbelliferyl-ß-xylotrioside	¥5,000.00
O-A23XX-30MG	23, 33-di-a-L-Arabinofuranosyl-	¥3,000.00
O-A23XX-50MG	23, 33-di-a-L-Arabinofuranosyl-	¥3,900.00
O-A2XX	23-a-L-Arabinofuranosyl-xylotriose	¥2,700.00
O-A3X	32-a-L-Arabinofuranosyl-xylobiose	¥2,300.00
O-A4B	32-a-L-arabinofuranosyl-(1,5)-	¥2,300.00
O-A5BMIX	22,32-di-a-L-arabinofuranosyl-(1,5)	¥2,300.00
O-ABI	Arabinobiose (syrup) – 50mg	¥2,800.00
O-AHE	Arabinohexaose (powder) – 20mg	¥2,300.00
O-AHP	Arabinoheptaose (powder) – 15mg	¥2,300.00
O-AMX	Aldouronic Acid Mixture 200mg	¥2,800.00
O-AMXR	Aldouronic Acid Mixture (Reduced)	¥2,800.00
O-AOC	Arabino-Octaose (powder) – 10mg	¥2,300.00
O-APE	Arabinopentaose (syrup) – 30mg	¥2,800.00
O-ATE	Arabinotetraose (syrup) – 30mg	¥2,800.00
O-ATR	Arabinotriose (syrup) – 50mg	¥2,800.00
O-BGTETB	31-ß-D-Cellotriosyl-glucose (40 mg)	¥3,000.00
O-BGTETC	32-b-D-Cellobiosyl-cellobiose + 33-	¥3,000.00
O-BGTRIA	32-ß-D-Glucosyl-cellobiose (50 mg)	¥3,000.00
O-BGTRIB	31-ß-D-Cellobiosyl-glucose (50mg)	¥3,000.00
O-BNAPG3	Blocked Î²-naphthyl-Î²-cellotrioside	¥10,000.00
O-BPNPC7	Blocked p-nitrophenyl	¥4,700.00
O-CHE	Cellohexaose – 10mg	¥2,700.00
O-CHERD	1,4-ß-D-Cellohexaitol (borohydride	¥2,600.00
O-CHI2	Diacetyl-Chiotobiose – 30mg	¥3,800.00
O-CHI3	Triacetyl-Chitotriose 30mg	¥3,800.00
O-CHI4	Tetraacetyl-Chitotetraose – 20mg	¥3,800.00
O-CHI5	Pentacetyl-Chitopentaose- 20mg	¥3,800.00
O-CHI6	Hexaacetyl-Chitohexaose- 10mg	¥3,200.00
O-CHIN2	1,4-Î²-D-Glucosaminyl-D-N-Acetylglucosamine (HCl)	¥3,600.00
O-CHIN2A	1,4-Î²-D-N-Acetylglucosaminyl-D-Glucosamine	¥2,900.00
O-CHIS2	Chitosanbiose	¥2,300.00
O-CHIS3	Chitosantriose	¥2,900.00
O-CHIS4	Chitosantetraose	¥2,900.00
O-CHIS5	Chitosanpentaose	¥2,900.00
O-CNPBG3	2-Chloro-4-nitrophenyl-ß-(1,3:1,4)-	¥4,900.00
O-CNPBG4	2-Chloro-4-nitrophenyl-ß-(1,3:1,4)-	¥4,900.00
O-CPE-20MG	Cellopentaose – 20mg	¥2,400.00
O-CPE-50MG	Cellopentaose – 50mg	¥5,000.00
O-CPERD	1,4-ß-D-Cellopentaitol (borohydride	¥3,000.00
O-CPNPAM2	2-Chloro-4-nitrophenyl-a-	¥5,000.00
O-CPNPAM3	2-Chloro-4-nitrophenyl	¥5,000.00
O-CPNPAM4	2-Chloro-4-nitrophenyl	¥5,000.00
O-CPNPG2-100	2-Chloro-4-nitrophenyl ß	¥5,000.00
O-CPNPG3-50	2-Chloro-4-nitrophenyl ß	¥5,000.00
O-CPNPG4-50	2 Chloro-4-nitorphenyl ß	¥6,000.00
O-CPNPG5	2-Chloro-4-nitrophenyl-ß-	¥6,000.00
O-CTE-100MG	Cellotetraose – 100mg	¥4,900.00
O-CTE-50MG	Cellotetraose – 50mg	¥3,000.00
O-CTERD	1,4-ß-D-Cellotetraitol (borohydride	¥3,000.00
O-CTR-100MG	Cellotriose – 100mg	¥4,800.00
O-CTR-50MG	Cellotriose – 50mg	¥2,900.00
O-CTRRD	1,4-ß-D-Cellotriitol (borohydride	¥3,000.00
O-GALA2	Digalacturonic acid	¥2,700.00
O-GALA3	Trigalacturonic acid 20 mg	¥2,900.00
O-GALA4	Tetragalacturonic acid 5 mg	¥2,300.00
O-GBI3	1,3-Î²-D-Galactobiose	¥3,400.00
O-GBI4-20MG	1,4-Î²-D-Galactobiose	¥2,900.00
O-GBI4-50MG	1,4-Î²-D-Galactobiose	¥5,300.00
O-GBI6	1,6-Î²-D-Galactobiose	¥3,000.00
O-GENT	Gentiobiose	¥1,900.00
O-GGM	1,4-Î²-D-Cellobiosyl-D-Mannose	¥2,800.00
O-GGM5	63,64-A-D- Galactosyl-Mannopentaose	¥2,800.00
O-GLAC6	6’Galactosyllactose	¥2,200.00
O-GM	1,4-Î²-D-Glucosyl-D-Mannose	¥2,800.00
O-GM3	61-A-D-Galactosyl-Mannotriose -20mg	¥2,800.00
O-GMH	A-D-Glucosyl-Maltotriosyl-Maltriose	¥1,800.00
O-GMM	1,4-Î²-D-Glucosyl-D-Mannobiose	¥2,800.00
O-GMM3	Galactosyl Mannobiose+Mannotriose	¥2,200.00
O-GMMBI	1,4-ß-D-Glucosyl-D-Mannose plus	¥2,800.00
O-GMT	63-A-D-Glucosyl-Maltotriose – 50mg	¥2,800.00
O-IMO2	Isomaltose – 200 mg	¥2,300.00
O-IMO3	Isomaltotriose – 200 mg	¥2,500.00
O-INU3	Inulotriose	¥2,900.00
O-IPAN	Isopanose – 100 mg	¥2,800.00
O-IPRM	Isoprimeverose (xyloglucan derived)	¥2,800.00
O-KOJ	Kojibiose	¥2,900.00
O-KPE	1,1,1-Kestopentaose – 40mg	¥2,800.00
O-KTE	1,1-Kestotetraose – 100mg	¥2,800.00
O-KTR	1-Kestose – 100mg	¥2,800.00
O-LAC3	1,3-Î²-D-Galactosyl-D-glucose	¥2,900.00
O-LAC6	Allolactose (1,6-Î²-D-Galactosyl-D-glucose)	¥2,900.00
O-LAM2	Laminaribiose – 50 mg	¥3,100.00
O-LAM3	Laminaritriose – 50 mg	¥3,100.00
O-LAM4	Laminaritetraose – 40 mg	¥2,800.00
O-LAM5	Laminaripentose – 30 mg	¥2,500.00
O-LAM5RD	1,3-b-D-Laminaripentaitol – 10 mg	¥2,700.00
O-LAM6	Laminarihexaose – 30 mg	¥2,500.00
O-LAM7	Laminariheptaose – 10 mg	¥2,900.00
O-LAM8	Laminarioctaose – 10 mg	¥3,800.00
O-LAM9	Laminarinonaose – 10 mg	¥3,800.00
O-LEV2	Levanbiose	¥2,700.00
O-LEV3	Levantriose	¥3,000.00
O-MAL3	Maltotriose – 5 g	¥3,100.00
O-MAL3RD-200MG	Maltotriitol (borohydride reduced	¥1,900.00
O-MAL3RD-500MG	Maltotriitol (borohydride reduced	¥4,000.00
O-MAL4	Maltotraose – 100 mg	¥2,900.00
O-MAL5	Maltopentaose – 50 mg	¥2,900.00
O-MAL6	Maltohexaose – 250 mg	¥3,000.00
O-MAL7	Maltoheptaose – 500 mg	¥3,400.00
O-MAL8	Maltooctaose – 250 mg	¥3,400.00
O-MBI	Mannobiose – 50mg	¥2,800.00
O-MGM	1,4-Î²-D-Mannosyl-1,4-Î²-D-Glucosyl-D-Mannose	¥2,800.00
O-MHE	Mannohexaose – 20mg	¥2,300.00
O-MPE	Mannopentaose – 30mg	¥2,300.00
O-MTE	Mannotetraose – 30mg	¥2,800.00
O-MTMT	63-a-D-maltotriosyl-maltotriose	¥3,700.00
O-MTMTRD	63-a-D-maltotriosyl-maltotriitol	¥3,700.00
O-MTR	Mannotriose – 50mg	¥2,800.00
O-NAPC3-100	Î²-Naphthyl-Î²-maltotrioside	¥4,000.00
O-NGR	Nigerose	¥2,500.00
O-NGR3	Nigerotriose	¥2,400.00
O-NGR4	Nigerotetraose	¥2,400.00
O-NGR5	Nigeropentaose	¥2,800.00
O-NGR6	Nigerohexaose	¥2,800.00
O-ONPX2-25MG	ortho-Nitrophenyl-ß-xylobioside	¥4,500.00
O-ONPX2-5MG	2-Nitrophenyl-Î²-xylobiosideÂ	¥3,000.00
O-PAN-1G	Panose – 1g	¥5,800.00
O-PAN-250MG	Panose – 250 mg	¥1,900.00
O-PNPAF	4-Nitorphenyl-a-L-arabinofuranoside	¥2,300.00
O-PNPAFC	4-Nitorphenyl-a-L-fucopyranoside	¥2,100.00
O-PNPAG	4-Nitrophenyl-a-D-glucopyranoside	¥1,800.00
O-PNPAGA	4-Nitrophenyl-a-D-glucuronide	¥3,100.00
O-PNPAGAL	4-Nitrophenyl-a-D-galactopyranoside	¥1,800.00
O-PNPAGALA	4-Nitrophenyl-a-D-galacturonide	¥3,700.00
O-PNPAM	4-Nitrophenyl-a-D-mannopyranoside	¥1,900.00
O-PNPAX	4-Nitrophenyl-a-D-xylopyranoside	¥1,900.00
O-PNPBG	4-Nitrophenyl-b-D-glucopyranoside	¥1,800.00
O-PNPBGA	4-Nitrophenyl-b-D-glucuronide	¥1,900.00
O-PNPBGAL	4-Nitrophenyl-b-D-galactopyranoside	¥1,800.00
O-PNPBGALA	4-Nitrophenyl-ß-D-galacturonide	¥3,100.00
O-PNPBM	4-Nitrophenyl-b-D-mannopyranoside	¥2,100.00
O-PNPC3-100	4-Nitrophenyl Beta-maltotrioside	¥4,000.00
O-PNPCH2	4-Nitrophenyl-N,N’-diacetyl-ß-chito	¥4,900.00
O-PNPL-100	4-Nitrophenyl Beta lactoside	¥2,400.00
O-PNPLAM2	4-Nitrophenyl-ß-laminaribioside	¥5,800.00
O-PNPLAM3	4-Nitrophenyl-ß-laminaritrioside	¥5,800.00
O-PNPLAM4	4-Nitrophenyl-ß-laminaritetraoside	¥5,800.00
O-PNPNAG	4-Nitorphenyl-ß-N-acetyl-D-	¥2,300.00
O-PNPX	4-Nitorphenyl-ß-D-xylopyranoside	¥3,500.00
O-PNPX2-10MG	p-Nitrophenyl-ß-xylobiose 10mg	¥2,300.00
O-PNPX2-50MG	p-Nitrophenyl-ß-xylobiose 50mg	¥7,000.00
O-PNPX3	4-nitorphenyl-ß-xylotrioside	¥5,000.00
O-SOPH	Sophorose – 20 mg	¥2,700.00
O-SOPH3	Sophorotriose 20 mg	¥2,900.00
O-SOPH4	Sophorotetraose 15 mg	¥2,900.00
O-SOPH5	Sophoropentaose 10 mg	¥2,900.00
O-SOPH6	Sophorohexaose 10 mg	¥2,900.00
O-UX	22-Glucuronoyl-a-D-xylobiose	¥2,700.00
O-UXX	23-Glucuronoyl-a-D-xylotriose	¥3,000.00
O-UXXR	Aldotetrauronic acid (terminal substitution, borohydride reduced)	¥2,700.00
O-VER	Verbascose – 50mg	¥2,800.00
O-X3G4	Heptasaccharide (X3 Glc 4) – 50mg	¥2,800.00
O-X3G4R	Heptasaccharide Reduced	¥2,800.00
O-XA3XX	33-a-L-Arabinofuranosyl-	¥3,000.00
O-XAXXMIX-10MG	33-a-L- plus 23-a-L-Arabinofuranosy	¥1,500.00
O-XAXXMIX-30MG	33-a-L- plus 23-a-L-Arabinofuranosy	¥3,000.00
O-XBI	Xylobiose – 50mg	¥2,800.00
O-XBIRD	1,4-ß-D-Xylobiitol (borohydride	¥2,700.00
O-XCBIR	Xylosyl Cellobiose (reduced) 50mg	¥2,800.00
O-XGHDP	HigherDP Xyloglucan Oligosaccharide	¥2,800.00
O-XGHON	Xyloglucan (Hepta+Octa+Nona	¥3,100.00
O-XHE	Xylohexaose – 10mg	¥3,100.00
O-XPE	Xylopentaose – 10mg	¥2,300.00
O-XTE	Xylotetraose – 30mg	¥2,800.00
O-XTR	Xylotriose – 50mg	¥2,800.00
O-XTRRD	1,4-ß-D-Xylotriitol (borohydride	¥2,700.00
O-XUX	22-Glucuronoyl-a-D-xylotriose	¥2,700.00
O-XUXX	23-Glucuronoyl-a-D-xylotetraose	¥3,000.00
O-XUXXR	Aldotetraouronic Acid (internal	¥2,700.00
P-ACXYL	Xylan (Birchwood, partially acetylated)	¥2,200.00
P-ADWAX22	Wheat Arabinoxylan	¥2,900.00
P-ADWAX26	Wheat Arabinoxylan	¥2,900.00
P-AMYL	Amylose (potato) – 5 g	¥2,900.00
P-ARAB	Arabinan (Sugar Beet) – 8g	¥2,600.00
P-ARGAL	Arabinogalactan (Larch Wood) 25g	¥2,400.00
P-BGBH	ß-Glucan (Barley;High Viscosity) 5g	¥5,200.00
P-BGBL	ß-Glucan (Barley;Low Viscosity) 5g	¥4,700.00
P-BGBM	ß-Glucan (Barley;Med Viscosity) 5g	¥4,900.00
P-BGCFA	ß-Glucan CFA Standard – 4Vials	¥2,800.00
P-BGLU12	1,2-β-Glucan	¥3,300.00
P-BGOH	ß-Glucan (Oat; High Viscosity) 5g	¥5,200.00
P-BGOM	ß-Glucan (Oat; Med Viscosity) 5g	¥4,700.00
P-BGYST	ß-Glucan (Yeast, Alkali Soluble) 2g	¥3,200.00
P-BLDX-10G	ß-Limit Dextrin – 10g	¥2,300.00
P-BLDX-50G	ß-Limit Dextrin – 50g	¥8,300.00
P-CHITN	Colloidal Chitin (borohydride	¥1,900.00
P-CMC4M	Carboxymethyl Cellulose 4M (CMC-4M)	¥2,600.00
P-CMCUR	CM-Curdlan 4g	¥2,900.00
P-CMLA	CM-Linear-1,5-A-L-Arabinan – 2Vial	¥2,200.00
P-CMPAC	CM-Pachyman – 4g	¥2,600.00
P-CURDL	Curdlan 8g	¥2,600.00
P-DBAR	Debranched Arabinan (sugar beet) 2g	¥2,000.00
P-DEXT	Dextran	¥3,900.00
P-EDWAX30	Wheat Arabinoxylan	¥2,900.00
P-FOS28	Fructooligosaccharides (FOS)	¥1,900.00
P-GALLU	Galactan (Lupin) 3g	¥3,100.00
P-GALMH	Galactomannan Carob (High Vis) 5g	¥2,800.00
P-GALML	Galactomannan Carob (Low Vis) 4g	¥2,800.00
P-GALPOT	Galactan (Potato) 3g	¥3,100.00
P-GGM21	Galactomannan (guar; galactose	¥3,100.00
P-GGM28	Guar Galactomannan (GD 28)	¥3,100.00
P-GGMHV	Guar Galactomannan (High Vis) 4g	¥2,800.00
P-GGMMV	Guar Galactomannan (Med Vis) 4g	¥2,800.00
P-GLCMH	Glucomannan (Konjac:High Vis) 3g	¥3,100.00
P-GLCML	Glucomannan (Konjac;Low Vis) 4g	¥2,600.00
P-GLYAL	Glycogen (Algae) 250 mg	¥2,800.00
P-INUL	Inulin	¥1,900.00
P-LARB	Linear 1,5-A-L-Arabinan – 500mg	¥2,900.00
P-LEVAN	Levan (ex. timothy grass)	¥2,900.00
P-LICHN	Lichenan (Icelandic Moss) 4g	¥2,600.00
P-MANCB	1,4-ß-D-Mannan	¥2,900.00
P-MANIV	Mannan (Ivory Nut) 3g	¥2,900.00
P-MWBGS	ß-Glucan MW Standard 6x500mg	¥7,100.00
P-PACHY	Pachyman (1,3-ß-D-Glucan) 5g	¥2,800.00
P-PGACIT-10G	Polygalacturonic Acid 10G	¥1,800.00
P-PGACIT-50G	Polygalacturonic Acid 50G	¥4,600.00
P-PGACT	Polygalacturonic Acid (PGA) 10g	¥2,200.00
P-PGALU	Pectic Galactan (Lupin) 4g	¥2,600.00
P-PGAPT	Pectic Galactan (Potato) 4g	¥2,200.00
P-PULLBH	Pullulan (NaBH4 Reduced) 5g	¥2,900.00
P-PULLN	Pullulan 10g	¥2,600.00
P-RAXY	Arabinoxylan- Rye Flour 3g	¥2,900.00
P-RHAGN	Rhamnogalacturonan (soy bean) 5g	¥2,400.00
P-RHAM1	Rhamnogalacturonan I (Potato)	¥2,400.00
P-WAXYH	Arabinoxylan (Wheat Fl:High Vis) 3g	¥3,300.00
P-WAXYI	Arabinoxylan (Wheat Fl. Insol) 5g	¥2,900.00
P-WAXYL	Arabinoxylan (Wheat Fl:Low Vis) 3g	¥2,900.00
P-WAXYM	Arabinoxylan ((Wheat Fl:Med Vis) 3g	¥2,900.00
P-WAXYRS	Arabinoxylan (Wheat Flour; for Reducing Sugar Assays)	¥4,800.00
P-XANTH	Xanthan Gum	¥1,900.00
P-XYGLN	Xyloglucan (Tamarind) 3g	¥2,400.00
P-XYLNBE-10G	Xylan (Beechwood; purified) 10G	¥2,300.00
P-XYLNBE-50G	Xylan (Beechwood)	¥9,500.00
R-AMGR3	Amyloglucosidase Assay Reagent – 4V	¥5,400.00
R-AMHR4	Amylase HR Reagent – 4 vials	¥6,200.00
R-BAMR3	Betamyl 3; ß-Amylase Assay Reagent	¥6,100.00
R-CAAR4	Ceralpha; A-Amylase Reagent- 4Vials	¥5,900.00
R-CELLFLR	Cellafluor Assay Reagent	¥3,000.00
R-GLC4	Glucose Determination Reagent 4Vial	¥5,200.00
S-ABG100	Azo-Barley Glucan 100ml	¥3,100.00
S-ACGLM	Azo-Carob Galactomannan 4g	¥3,100.00
S-ACMC	Azo-CM-Cellulose (powder) 4g	¥3,100.00
S-ACMCL	Azo-CM-Cellulose (liquid) 100ml	¥2,800.00
S-AGALP	Azo-Galactan (Potato) 4g	¥3,300.00
S-AWAXL	Azo-Wheat Arabinoxylan (liquid)	¥2,900.00
S-AWAXP	Azo-Wheat Arabinoxylan (powder) 3g	¥3,900.00
S-AXBL	Azo-Xylan (Birchwood) 100ml 2 vials	¥3,100.00
S-AXBP	Azo-Xylan (Birchwood)(powder) 3g	¥3,400.00
S-AZCAS	Azo-Casein (Sulphanilamide Dyed)	¥2,900.00
S-AZFR5	Azo-Fructan – 5gr	¥3,300.00
S-AZFRXOI	Azo-Fructan+exo-Inulinanase 2g	¥3,300.00
S-AZRH	AZ-Rhamnogalacturonan 2g	¥3,900.00
S-AZXG	Azo-Xyloglucan (Tamarind) 4g	¥3,100.00
S-RDAR	Red Debranched Arabinan 2g	¥2,600.00
S-RPUL	Red Pullulan 3g	¥3,400.00
S-RSTAR	Red Starch – 5gr	¥3,300.00
T-AMZ-1000T	Amylazyme – 1000 Tablets	¥13,100.00
T-AMZ-200T	Amylazyme – 200 Tablets	¥3,600.00
T-AMZBG-200T	Amylazyme BG – 200 Tablets	¥4,300.00
T-AMZHY-200T	Amylazyme HY – 200 Tablets	¥3,600.00
T-AMZRD-1000T	Amylazyme Red – 1000 Tablets	¥15,700.00
T-AMZRD-200T	Amylazyme Red – 200 Tablets	¥4,300.00
T-ARZ-200T	Arabinazyme – 200 Tablets	¥4,600.00
T-BGZ-1000T	Beta-Glucazyme – 1000 Tablets	¥14,500.00
T-BGZ-200T	Beta-Glucazyme – 200 Tablets	¥4,300.00
T-CAF-1000T	Cellazyme AF Tablets	¥10,800.00
T-CCZ-1000T	Cellazyme C – 1000 Tablets	¥17,200.00
T-CCZ-200T	Cellazyme C – 200 Tablets	¥4,700.00
T-CHZ-200T	Chitozyme – 200 Tablets	¥4,900.00
T-CTZ-1000T	Cellazyme T – 1000 Tablets	¥20,300.00
T-CTZ-200T	Cellazyme T – 200 Tablets	¥4,900.00
T-CUR-200T	1,3-Beta-Glucazyme HS – 200 Tablets	¥4,600.00
T-DEXT-200T	Alpha-Dextrazyme – 200 Tablets	¥3,600.00
T-GLZ-1000T	Galactazyme Tablets	¥16,400.00
T-GLZ-200T	Galactazyme – 200 Tablets	¥4,600.00
T-LDZ-1000T	Limit-Dextrizyme – 1000 Tablets	¥17,600.00
T-LDZ-200T	Limit-Dextrizyme – 200 Tablets	¥4,500.00
T-MNZ-1000T	Mannazyme – 1000 Tablets	¥18,900.00
T-MNZ-200T	Mannazyme – 200 Tablets	¥4,800.00
T-PAZ-200T	1,3-Beta-Glucazyme 200 Tabs	¥4,600.00
T-PRAK-1000T	Protazyme AK – 1000 Tablets	¥18,900.00
T-PRAK-200T	Protazyme AK – 200 Tablets	¥4,800.00
T-PROL-1000T	Protazyme OL Tablets	¥18,900.00
T-PROL-200T	Protazyme OL – 200 Tabs	¥4,800.00
T-PSYL-200T	Psyllazyme Tablets	¥3,900.00
T-XAF-1000T	Xylazyme AF Tablets	¥12,400.00
T-XAX-1000T	Xylazyme AX (60mg) 1000 Tablets	¥18,900.00
T-XAX-200T	Xylazyme AX – (60mg) 200 Tablets	¥4,800.00
T-XYZ-1000T	Xylazyme (100mg) – 1000 Tablets	¥21,600.00
T-XYZ-200T	Xylazyme (100mg) – 200 Tablets	¥5,600.00

日本同仁化学Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291- DOJINDO

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291

Iron Assay Kit -Colorimetric-组织铁离子定量试剂盒

Iron Assay Kit -Colorimetric-

商品信息

储存条件：0-5度保存

运输条件：室温

特点：

● 组织检测

● 配有标准品，可定量二价、三价铁含量

● 吸光度法

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铁死亡通路图

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选择规格：

50tests

价格：

¥1980.00现货（会员请登录查看专享价！）

Fe2+和 Fe3+检测

操作简便

组织/细胞检测

试剂盒配套计算器（点击查看下载）

活动进行中

试剂盒内含

产品概述

原理

金属离子选择性

加标回收实验

实验例

参考文献

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凑单关联产品TOP5

NO.1. FerroOrange 细胞亚铁离子检测

NO.2. Liperfluo 细胞脂质过氧化物检测

NO.3. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测

NO.4. ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA- ROS检测

NO.5. GSSG/GSH Quantification Kit II 氧化型/还原型谷胱甘肽

试剂盒内含

产品概述

铁是生物体内最重要的金属元素之一，生物体内铁元素的含量虽少，但有着重要的生理作用。近年来，随着铁死亡概念的提出，细胞内铁离子的代谢过程的研究逐渐成为了研究热点。同仁化学研究所开发的 Iron Assay Kit-Colorimetric-试剂盒是一套操作简便的比色法铁离子检测试剂盒。与其他市面上的检测试剂盒相比，可以在更短的时间内进行快速检测。通过比较组织裂解液中的铁离子探针 3-(2-Pyridyl)-5,6-bis(5-sulfo-2-furyl)-1,2,4-triazine, disodium salt的吸光度与还原成二价铁离子的三价铁标准品的吸光度，即可确定组织样品中的二价铁含量。同时，还可以通过试剂盒中的还原剂将样品中的三价铁还原成二价铁，以确定总铁含量，进而计算出样品中三价铁的含量。

原理

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291

金属离子选择性

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291

加标回收实验

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291

实验例

组织样品中的Fe²⁺和 Fe³⁺的检测

1. 称量 100 mg肝脏组织。

2. 加入 1 ml冷 PBS，移液器吹打 20次， Vortex振荡 10 s 14,000 RPM离心 4 min，去除上清。

3. 将样品转移至研钵，加入液氮充分研磨成粉末后，加入 1.3 ml Assay Buffer，回收至微管中。

4. 将含有样品的微管置于超声波水浴中 5 min。（为防止样品温度上升，每 1 min间隔置于冰浴上 20 s）。

5. 16,000 g离心 10 min，除去不溶物。

6. 取 1300 μl上清液，每管分别加入 400 μl上清液，制成二价铁样品、总铁样品、样品空白。

7. Standard管中加入 Reducer solution。（参考图 2 H管 30 μl、 G~C管 20 μl、 B管 40 μl、 A管 20 μl）。

二价品样品管中加入 20 μl Assay Buffer。

总铁样品管中加入 20 μl Reducer solution。

样品空白管中加入 20 μl Assay Buffer。

将所有的 Standard管、样品管、样品空白管 37 培养 15 min。

8. 参考表 1和表 2，加入至 96孔板中 37 培养 60 min，检测 593 nm处的吸光度。

9. 将酶标仪数据拷贝至 “Iron Assay Kit – Excel表 ”，自动计算出二价铁和三价铁浓度。

Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：I291

参考文献

Hao Ren,et.cl，“Self-assembled FeS-based cascade bioreactor with enhanced tumor penetration and synergistic treatments to trigger robust cancer immunotherapy”，APSB，2020，DOI:10.1016/j.apsb.2021.05.005

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铁死亡荧光试剂 (Fe2+荧光法)

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日本同仁化学二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374- DOJINDO

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二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

细胞亚铁离子检测荧光探针

FerroOrange

商品信息

储存条件：0-5度保存

运输条件：室温

特点：

● 荧光法高敏检测胞内二价铁

● 适合于多种检测仪器

● 铁死亡常见指标之一

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高灵敏度

操作简便

活细胞检测

更多铁死亡检测方案

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规格性状

产品概述

原理

荧光特性

铁离子试剂的选择

与其他染料共染

操作步骤

高灵敏度检测胞内铁离子

使用流式细胞仪检测

常见问题Q&A

参考文献

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NO.1. Liperfluo 细胞脂质过氧化物检测

NO.2. GSSG/GSH Quantification Kit II 氧化型/还原型谷胱甘肽

NO.3. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测

NO.4. Mito-FerroGreen 线粒体内亚铁离子检测

NO.5. ROS Assay Kit 活性氧检测

规格性状

性状：可溶于乙腈，甲醇和二甲基亚砜。

纯度（HPLC）：92.0%以上

荧光光谱：符合一致性

产品概述

铁是生物体内最丰富的过渡金属元素，它参与各种生理过程活动。近年来，活细胞中的游离铁受到广泛关注，游离铁最常以其稳定的氧化还原态存在，即亚铁离子 (Fe²⁺) 和铁离子 (Fe³⁺)。对研究者来说，在研究细胞内的还原环境，金属转运蛋白和Fe²⁺的水溶性时，了解Fe²⁺的行为比了解Fe³⁺的行为更为重要。FerroOrange作为一种新型的荧光探针，可对活细胞内的Fe²⁺进行荧光成像。

原理

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

FerroOrange检测胞内Fe²⁺

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

图为将2 μl的1 mmol/l FerroOrange和2 μl的10 mmol/l的各种金属离子添加到1 ml的50 mmol/l HEPES缓冲液（pH 7.4）中，并在室温下反应1小时后测量的荧光强度。

荧光特性

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

Ex：543 nm Em：580 nm

铁离子试剂的选择

	FerroOrange	Mito-FerroGreen
存在部位	细胞内	线粒体
荧光特性	λex : 543 nm、λem : 580 nm	λex : 505 nm、λem : 535 nm
检测仪器	荧光显微镜、荧光酶标仪（Cy3）	荧光显微镜（FITC、GFP）
测定对象	活细胞	活细胞
检测次数	24μg可染色17次35mm dish （终浓度为1μmol/l）	50μg可染色5次35mm dish （终浓度为5μmol/l）

与其他染料共染

FerroOrange与各种细胞内的染色试剂共染

用各种染色试剂染色HeLa细胞，清洗细胞。然后将FerroOrange添加到细胞中，并用荧光显微镜观察。

与ER染色试剂共染

＜检测条件＞

FerroOrange: Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm

ER Tracker Green（ER染色试剂）: Ex: 488 nm、Em: 510-555 nm

标尺: 10 μm

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

与线粒体染色试剂共染

＜检测条件＞

FerroOrange: Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm

MitoBright Deep Red（线粒体染色试剂）: Ex: 640 nm、Em: 650-700 nm

标尺: 10 μm

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

与高尔基体染色试剂的共染

＜检测条件＞

FerroOrange: Ex: 561 nm、Em: 570-620 nm

BODIPY FL（高尔基体染色试剂）: Ex: 488 nm、Em: 510-555 nm

标尺: 10 μm

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

操作步骤

1.细胞接种于荧光培养皿中，在37℃，5% CO₂培养箱中孵育过夜。

2.弃去上清液，并用HBSS或无血清培养基洗涤细胞3次。

3.更换含有药物的培养基，在37℃，5% CO₂培养箱中孵育。

* 请根据药物特性优化孵育时间。

4.加入浓度为1 μmol/l的FerroOrange工作液，在37℃，5% CO₂培养箱中孵育。

* 加入FerroOrange染色剂后请立即观察，不要洗涤。

5.在荧光显微镜下观察细胞。

高灵敏度检测胞内铁离子

使用HeLa细胞，通过FerroOrange确认细胞内Fe²⁺的变化

与对照组的细胞相比，用硫酸亚铁 (II) 铵处理的HeLa细胞的FerroOrange荧光强度增加。相反，在用Bpy处理的细胞中，其荧光强度降低。

因此，证明FerroOrange与细胞内Fe²⁺反应。

A: 对照组

B: 铁剂·硫酸亚铁(II) 铵（终浓度100umol/l）处理

C: 铁螯合剂·2,2′-Bipyridyl (Bpy)（终浓度100umol/l）处理

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

检测条件 Ex/Em = 561 nm/570-620 nm 比例尺：20 μm

使用流式细胞仪检测

通过流式细胞仪进行定量分析

——FerroOrange的荧光强度可能受细胞密度和细胞种类的影响

——培养基的更换和清洗可能使染料从细胞内泄露

——进行流式定量分析时，需优化实验步骤

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

<Usage Example>
1. HeLa cells (1 x105 cells/well) in MEM (10% fetal bovine serum, 1% penicillin-streptomycin) were seeded on a 6 well plate and were cultured at 37oC in a 5% CO2 incubator overnight.
2. The cells were washed with serum-free medium (2 mL) three times. Then, serum-free medium (1 mL) was added to the cells.
3. 10 mmol/L Ammonium iron (II) sulfate (10 μL) was added to wells (The final concentration: 100 μmol/L).
4. To mix Ammonium iron(II) sulfate and serum-free medium, the entire medium was pipetted up from wells and then immediately pipetted back one time.
5. The cells were incubated for 20 min in a 37oC incubator equilibrated with 95% air and 5% CO2, and the cells were washed with HBSS (1 mL) three times.
6. After trypsinization (250 µL), stop the reaction with serum medium (1 mL), 1.25 ml of the cell suspension was transferred to a microcentrifuge tube.
7. The cells suspension was centrifuged at 1,500 rpm for 3 minutes.
8. The supernatant was discarded and HBSS (1 mL) was added to the microcentrifuge tube and suspended by pipetting.
9. The cells suspension was centrifuged at 1,500 rpm for 3 minutes and the supernatant was discarded.
10. 1 μmol/L FerroOrange in MEM (serum-free medium) (300 μL) was added to the cells.
11. The cells were incubated for 15 -30 min in a 37oC incubator equilibrated with 95% air and 5% CO2.
12. The stained cells were passed through a cell strainer and analyze samples using a flow cytometer.

<注意点>

1.清洗对于结果分析的影响

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

2.染料体积对于结果分析的影响

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

常见问题Q&A

Q1:FerroOrange由于是活细胞荧光探针，如果铁死亡发生，导致细胞膜破裂后，荧光是否存在？

A1:由于FerroOrange是活细胞探针，对死细胞无法发挥出探针的正常性能。

Q2: FerroOrange只会检测游离铁吗？还是某些如铁硫蛋白里的结合铁，都可以检测吗？

A2：FerroOrange只检测游离的二价铁

Q3: 有哪些帮助实验成功的技巧？

A3:（1）染色后不要清洗工作液，因为这样可能会让细胞内的FerroOrange泄露出来。

（2）为了获得更加可靠的实验数据，我们建议准备Bpy（2,2`联吡啶，抑铁剂）或硫酸亚铁铵（增铁剂）处理的细胞作为对照组，以便于FerroOrange的数据进行比较。

Q4: FerroOrange能否用于固定处理之后的样本?

A4:不能用于石蜡切片。

试剂能尝试于温和条件下固定处理之后的样本，如多聚甲醛（PFA，终浓度3%）在4°C中培养10 min。与未固定的样本相比，固定20 min以上或室温固定后的样本的荧光强度会明显降低。请注意本探针可能很难于固定样本中使用，必须先进行染色，然后做尝试。

Q5:本探针适合于什么检测方式？

A5:见表格

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

我们建议使用绿色激光（Ex:532 nm）激发FerroOrange

Q6:染色时需要注意什么？

A6：注意如下，

1.FerroOrange染色后的对培养基的更换。

染色后无需清洗工作液，通常血清中含有铁离子，请注意使用不含血清的培养基，所以染色后即使细胞外有残留的FerroOrange，但是因为细胞外没有血清中铁离子的影响，也不会产生背景荧光的问题。

2.细胞难以染色(灵敏度低)时的办法。

根据细胞种类的不同，染色程度也有差异。

使FerroOrange working solution浓度高于推荐的1 µmol/l进行染色。建议在1-5 µmol/l范围内染色。

Q7:使用荧光酶标仪的操作步骤

A7：请参考下面的实验例子进行测量。

<测定样品>。

样品A：无添加剂(仅HeLa细胞)。

样品B：添加了铁螯合试剂2,2`-bipyridyl(Bpy)的HeLa细胞。

样品C：添加铁(硫酸铵铁)的HeLa细胞。

<测量操作>。

1.在96孔黑板(透明底)上接种100 µl HeLa细胞悬液，使其达到10,000 cells/well，在37℃ 5%CO2 培养箱中过夜培养。

2.样品C的细胞用MEM(不含FBS)100 µl洗涤3次。

3.向样品C中添加100 μl硫酸铵铁(II)/MEM(不含FBS) (最终浓度: 100 µmol/l)，在37℃ 5%CO2培养箱中静置30分钟。

4.用100 µl HBSS洗涤所有孔的细胞3次。

5.向样品A和C中添加100 μl的1 µmol/l FerroOrange working solution ，向样品B中添加100 μl含有FerroOrange(最终浓度:1 µmol/l)和Bpy(最终浓度:100 µmol/l)的HBSS溶液，在37℃ 5%CO2培养箱中培养30分钟。

6.用多功能读板器检测各样品的荧光强度(Ex:543 nm,Em:580 nm)。

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

Q8：推荐的滤光片

A8: 激发滤光片:530-565 nm

发射滤光片:570-620 nm

Q9: FerroOrange染色后是否有必要洗掉工作液？

A9:我们建议染色后不要清洗，因为这样可能会导致细胞中的FerroOrange泄露出来。

以下有关于不同细胞密度和细胞种类确认的情况，

<不同细胞密度>

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

<不同细胞种类>

二价铁离子检测探针—FerroOrange货号：F374

参考文献

1.K. Tomita, M. Fukumoto, K. Itoh, Y. Kuwahara, K. Igarashi, T. Nagasawa, M. Suzuki, A. Kurimasa and T. Sato, “MiR-7-5p is a key factor that controls radioresistance via intracellular Fe2+ content in clinically relevant radioresistant cells.”, Biochem. Biophys Res Commun., 2019,DOI: 10.1016/j.bbrc.2019.08.117

2.Y. Wang and M. Tang, “PM2.5 induces ferroptosis in human endothelial cells through iron overload and redox imbalance”, Environ. Pollut., 2019, 264,DOI: 10.1016/j.envpol.2019.07.105

3.S Guo, X Yao, Q Jiang, K Wang, Y Zhang, H. Peng, J. Tang and W. Yang , “Dihydroartemisinin-Loaded Magnetic Nanoparticles for Enhanced Chemodynamic Therapy”, Front Pharmacol,2020,11,226.DOI: 10.3389/fphar.2020.00226

4.R. A. Weber, F. S. Yen, S.P.V. Nicholson, H. Alwaaseem, E.C. Bayraktar,M. Alam, R. C. Timson, K. La, M. Abu-Remaileh, H. Molina and K. Birsoy, “Maintaining Iron Homeostasis Is the Key Role of Lysosomal Acidity for Cell Proliferation”, Mol. Cell, 2020, 77, 1-11.DOI: 10.1016/j.molcel.2020.01.003

5.X. Li, T. Wang, X. Huang, Y. Li, T. Sun, S. Zang, K. Guan, Y. Xiong, J. Liu and H. Yuan , “Targeting ferroptosis alleviates methionine‐choline deficient (MCD)‐diet induced NASH by suppressing liver lipotoxicity”, Liver Int., 2020,DOI: 10.1111/liv.14428

6.T. Hirayama, M. Niwa, S. Hirosawa and H. Nagasawa, “High-Throughput Screening for the Discovery of Iron Homeostasis Modulators Using an Extremely Sensitive Fluorescent Probe”, ACS Sens., 2020,DOI: 10.1021/acssensors.0c01445

论文6中记载的 “RhoNox-4”的化合物就是“FerroOrange”。

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日本同仁化学活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252- DOJINDO

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活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

活性氧检测试剂盒

ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

商品信息

储存条件：0-5°C

运输条件：常温

特点：

● 比DCFH-DA更高的灵敏度

● 可多种仪器上机

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100 tests

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¥900.00现货（会员请登录查看专享价！）

试剂盒内含

产品概述

荧光特性

技术信息

实验例

参考文献

常见问题Q&A

试剂盒内含

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

产品概述

ROS Reactive Oxygen Species 主要是在线粒体中合成 ATP时所产生的高活性氧簇。ROS对细胞内的信号传导和吞噬作用等免疫机能起着重要的作用。另一方面， ROS对DNA和蛋白质的氧化作用也是各种疾病和细胞衰老的原因之一。

最近的研究发现，由二价铁所诱发的芬顿反应所引起的一种新的细胞死亡方式（铁死亡，Ferroptosis）的研究领域里 ROS也被广泛关注，检测 ROS的需求和意义也在不断升高 1)。目前在检测 ROS时，使用最多的试剂是DCFH-DA。但是 DCFH-DA往往有灵敏度低、样品荧光与背景的差别不明显等问题。本试剂盒是一种高灵敏度的ROS检测试剂盒，而且配套使用本试剂盒内附带的 Buffer，可以在相对更低的细胞毒性下对 ROS进行高灵敏度检测。

荧光特性

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

技术信息

与市面现有试剂的比较

活性氧反应的选择性

高灵敏度DCFH-DA与常规DCFH-DA对活性氧（ROS）的反应性相同。
另外，由于具有与DCFH-DA相同的荧光特性（λex：505nm，λem：525nm），因此能够以相同的激发/荧光波长进行检测。

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

检测灵敏度的比较

用DCFH-DA和ROS检测试剂盒-高灵敏度DCFH-DA-分别对过氧化氢（1×10 ⁴细胞/ ml）处理的HeLa细胞进行染色，并比较细胞内ROS的荧光结果。结果显示，在任何检测仪器中，同仁化学ROS检测试剂盒-高灵敏度DCFH-DA都以比DCFH-DA拥有更高的灵敏度。

（1）荧光显微镜检测

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

<检测条件>
Ex.488 nm / Em.500 -560 nm
细胞种类：HeLa细胞

（2）使用荧光酶标仪检测

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

<检测条件>
Ex.490-520 nm / Em.510-540 nm
细胞种类：HeLa细胞

（3）使用流式细胞仪检测

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

<检测条件>
FITC激发电压：215 V
细胞种类：HeLa细胞

实验例

一.Erastin处理的A549细胞的内在性ROS的检测

1. 向 ibidi 8-well plate中接种A549细胞 (1××10⁴ cells/ml, DMEM, 10% fetal bovine serum, 1% penicillin-37°C 、 5% CO2培养箱内过夜培养。

2. 去除培养基，加入用 DMEM培养基稀释好的 50 μμmol/l的 Erastin溶液， 37°C 、 5% CO₂培养箱过夜培养。

3. 去除上清，HBSS清洗 2次，加入 Highly Sensitive DCFH-DA Dye working solution 37°C 、 5% CO₂培养箱培养 30 min。

4. 去除Working solution HBSS清洗 2次，再次加入 HBSS，用荧光显微镜观察。

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

二.LPS处理的巨噬细胞内源性ROS的检测

用LPS（脂多糖）处理的RAW264.7细胞中细胞内ROS的变化的荧光成像结果显示，LPS处理可增加细胞内ROS。

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

<检测条件>
细胞内ROS（高灵敏度DCFH-DA染料）：Ex. 488 nm / Em.500 -560 nm

<实验操作>
1.在ibidi 8孔板中接种RAW264.7细胞（3×104细胞，DMEM，10％胎牛血清，1％青霉素-链霉素）
2.培养箱（37℃，5％）过夜培养
3.除去培养基，用HBSS洗涤细胞两次，然后添加用DMEM培养基稀释的500 ng / ml LPS
4.培养箱（37°C，5％CO2）孵育20小时
5.除去上清液，用HBSS洗涤细胞两次，然后添加高灵敏度DCFH-DA染料工作液。
6.培养箱（37°C，5％CO2）培养30分钟
7.培养30分钟后除去工作溶，用HBSS洗涤细胞两次后再添加HBSS并用荧光显微镜观察。

三.柳氮磺吡啶(SSZ)引起的细胞内代谢变化

向A549细胞添加已知抑制胱氨酸/谷氨酸转运蛋白（xCT）的柳氮磺吡啶（SSZ）之后，确认了细胞内的ROS、ATP、α-谷氨酸（α-KG）、谷胱甘肽（GSH）的变化和谷氨酸释放量的变化。

结果显示，由于SSZ的添加，细胞内的ATP、谷胱甘肽（GSH）以及谷氨酸的释放量减少，细胞内的α-谷氨酸和ROS增加。

活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）货号：R252

参考文献

1）Shogo Okazaki et al., “Glutaminolysis-related genes determine sensitivity to xCT-targeted therapy in head and neck squamous cell carcinoma”. Cancer Sci., 2019, doi:10.1111/cas.14182.

常见问题Q&A

Q1: 请告诉我一个试剂盒可以测多少个样品？

A1:可以测量的样品数量请参考以下内容。
・96-well plate：1块
・ibidi8-well plate：6块
・35mm dish：5块
・6-well plate：5孔

Q2:有没有可以用作阳性对照的实验例？

A2：使用说明书上记载了经过过氧化氢处理的HeLa细胞的检测实验例。

Q3: Highly Sensitive DCFH-DA working solution可以用Loading Buffer以外的溶液配置吗?

A3:为了减轻染色时对细胞的损伤，推荐使用附带的Loading Buffer配置，Hanks’HEPES和HBSS也可以进行制备。如果用培养基进行制备时请使用无血清培养基。

Q4:染色后的清洗可以使用PBS代替HBSS吗？

A4：为了减轻对细胞的损伤推荐HBSS。如果手头没有HBSS的话，建议用培养基清洗。

Q5:用荧光显微镜检测时有什么注意事项吗？

A5：染料与ROS反应并氧化后发出荧光。如果激发光持续照射，则染料会被氧化，背景会上升，因此，在获取荧光成像图像时，请先调整明场环境下的焦点和参数，然后再获取荧光图像。

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日本同仁化学Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248- DOJINDO

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Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

细胞脂质过氧化物检测试剂盒

Liperfluo

商品信息

储存条件：0-5度保存，避光，充氮气

运输条件：室温

分子式：

C₅₁H₄₁N₂O₈P

分子量：

840.85

特点：

● 特异性检测铁死亡相关的脂质过氧化

● 比BODIPY C11更适合于胞内定位

● 铁死亡常见指标之一

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高分文献

荧光/流式检测

LiperFluo高分文献整理（点击查看）

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规格性状

产品概述

研究领域

原理

荧光特性

操作步骤

实验例

常见问题Q&A

参考文献

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凑单关联产品TOP5

NO.1. FerroOrange 细胞亚铁离子检测

NO.2. GSSG/GSH Quantification Kit II 氧化型/还原型谷胱甘肽

NO.3. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测

NO.4. Mito-FerroGreen 线粒体内亚铁离子检测

NO.5. ROS Assay Kit 活性氧检测

规格性状

性状：深红色结晶粉末或固体。

纯度（HPLC）：90.0%以上

核磁共振谱：符合一致性

<使用次数>每50µg可用5-50次

产品概述

Liperfluo是Spy-LHP的类似物，可用于检测脂质过氧化物 (LPO)，Liperfluo会被脂质过氧化物特异性氧化而在乙醇等有机溶剂中发出很强的荧光。由于氧化型Liperfluo的激发和发射波长分别为524 nm和535 nm (均为长波长)，因此可以减轻光对测定样品的损伤和降低样品的自发荧光。由于Liperfluo在二异喹啉环的一个末端连接有四乙二醇基团，因此提高了它在水溶液中的分子分散性。虽然它的氧化型在水溶液中几乎没有荧光，但是在细胞膜等脂溶性高的部位会产生较强的荧光。因此Liperfluo适用于活细胞中脂质过氧化物的荧光成像或流式分析。

特点：

1）能够成像和检测细胞中的脂质过氧化物

2）长波长激发，可以减少光损伤和自发荧光对细胞的影响

3）高度脂质过氧化物特异性

研究领域

在铁死亡研究中：

作为细胞死亡形式之一，在铁死亡研究中使用到Liperfluo

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

细胞种类（铁死亡诱导剂）	论文信息
人支气管上皮细胞（RSL3）	Pseudomonas aeruginosa utilizes host polyunsaturated phosphatidylethanolamines to trigger theft-ferroptosis in bronchial epithelium.
小鼠成纤维细胞(RSL3)	Oxidized arachidonic and adrenic PE s navigate cells to ferroptosis.
HeLa细胞(添Erastin或Brefeldin A)	Golgi stress mediates redox imbalance and ferroptosis in human cells.

原理

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

荧光特性

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

激发波长Ex：488 nm，发射波长Em：500-550 nm

操作步骤

1.在dish等容器中接种细胞并培养。

2.去除培养基后，用无血清培养基清洗一次。

3.加入合适浓度的Liperfluo工作液，在37℃培养30 min。

※请根据细胞种类，诱导药物等实验条件，摸索最佳的Liperfluo工作液浓度。

4.去除上清液后，用无血清培养基清洗2次。

5.用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。

实验例

用激光共聚焦荧光显微镜观察HeLa细胞

1) 在 μ-slide 8孔板中 (ibidi公司) 接种HeLa细胞 (3.0×10⁴个/孔、含血清MEM培养基)，在37℃ 5%的CO₂培养箱中过夜培养。

2) 去除培养基，用无血清MEM培养基清洗细胞1次。

3) 将200 μl用无血清MEM培养基稀释的1 μmol/l的Liperfluo溶液加入8孔板中，在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养30 min。

4) 去除溶液，用200 μl HBSS清洗2次。

5) 均匀地加入200 μl用HBSS稀释的500 μmol/l的 t-BHP(tert-Buthyl Hydroperoxide) 溶液，在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养60 min。

6) 用共焦荧光显微镜观察 (激发波长：488 nm，发射波长：500-550 nm)。

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

用流式细胞仪检测HeLa细胞

1) 将HeLa细胞 (1.0×10⁵个/孔、含血清MEM培养基) 接种至6孔板(Thermo公司) 中，在37℃ 5%的CO₂培养箱中过夜培养。

2) 去除培养基，用无血清MEM培养基清洗细胞1次。

3) 将2 ml用无血清MEM培养基稀释的1 μmol/l的Liperfluo溶液加入6孔板中，在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养30 min。

4) 去除溶液，用2 ml HBSS清洗2次。

5) 均匀地加入2 ml用HBSS稀释的500 μmol/l的t-BHP (tert-Buthyl Hydroperoxide) 溶液，在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养60 min。

6) 用胰酶消化细胞后，用含有血清的MEM培养基重悬细胞，移至管中并将培养基更换为HBSS。

7) 用流式细胞仪检测 (激发波长：488 nm，发射波长：515-545 nm)。

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

用Erastin诱导铁死亡细胞的荧光成像

1) 在 μ-slide 8孔板中 (ibidi公司) 接种A549细胞 (1.0×10⁵个/孔、含血清DMEM培养基)，在37℃ 5%的CO₂培养箱中过夜培养。

2) 去除培养基，加入200 μl用无血清DMEM培养基稀释的50 μmol/l的Erastin溶液，在37℃ 5%的CO₂培养箱中过夜培养。

3) 去除培养基，用200 μl HBSS清洗2次。

4) 去除HBSS，加入200 μl用HBSS稀释的1 μmol/l的Liperfluo溶液，在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养30 min。

5) 去除溶液，用200 μl HBSS清洗2次。

6) 用激光共焦荧光显微镜观察 (激发波长：488 nm，发射波长：500-550 nm)。

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测货号：L248

常见问题Q&A

Q1.文献实验方法：先加Liperfluo，后加药；说明书实验方法：先加药，后加探针，哪种方法比较好？

A1: 都可以。

先加Liperfluo再加药

用共聚焦荧光显微镜观察HeLa细胞

（1）在μ-slide 8孔板中（ibidi公司）接种HeLa细胞（3.0×104个/孔、含血清MEM培养基），在37℃ 5%的CO2培养箱中过夜培养。

（2）去除培养基，用无血清MEM培养基清洗细胞一次。

（3）将200 μl无血清MEM培养基稀释后的1 μmol/l的Liperfluo溶液加入8孔板中，在37℃ 5%的CO2培养箱中培养30 min。

（4）去除溶液，用200 μl HBSS清洗2次。

（5）均匀地加入200 μl用HBSS稀释的500 μmol/l的t-BHP(tert-Buthyl Hydroperoxide) 溶液，在37℃ 5%的CO2培养箱中培养60 min。

（6）用共焦荧光显微镜观察 (激发波长：488 nm，发射波长：500-550 nm)。

先加药再加Liperfluo

（1）在 μ-slide 8孔板中 (ibidi公司) 接种A549细胞 (1.0×105个/孔、含血清DMEM培养基)，

在37℃ 5%的CO2培养箱中过夜培养。

（2）去除培养基，加入200 μl用无血清DMEM培养基稀释的50 μmol/l的Erastin溶液，

在37℃ 5%的CO2培养箱中过夜培养。

（3）去除培养基，用200 μl HBSS清洗2次。

（4）去除HBSS，加入200 μl用HBSS稀释的1 μmol/l的Liperfluo溶液，

在37℃ 5%的CO2培养箱中培养30 min。

（5）去除溶液，用200 μl HBSS清洗2次。

（6）用激光共焦荧光显微镜观察 (激发波长：488 nm，发射波长：500-550 nm)。

Q2. Liperfluo如果按照文献进行，先加探针，后加药，荧光淬灭时间为2小时可能无法满足实验，希望延长荧光时间，是否有好的方法？或者是否可以加荧光防淬灭剂？

A2: 关于荧光抗淬灭剂：由于抗淬灭剂的作用原理，有可能无法在实验中使用。

其他的改善方法：

(1)如果褪色的原因是由光源照射造成的褪色。可以尝试减小光源强度进行观测。

(2)清洗操作后长时间放置可能会造成探针向细胞外漏出。可考虑不清洗直接观察。

Q3.Liperfluo由于是活细胞荧光探针，如果铁死亡发生，导致细胞膜破裂后，荧光是否存在？

A3:由于Liperfluo是活细胞探针，对死细胞无法发挥出探针的正常性能。

Q4：培养基中酚红或血清对实验有没有影响？此外，在背景高或荧光弱的情况下有没有改善意见？

A4:可用于酚红或含血清培养基。但是，如果背景高，请用PBS替换。此外，当背景较高时，Liperfluo可能会被光自然氧化，培养时也请尽量遮光。

(溶解后请务必用铝箔等遮光)。

荧光强度弱的情况下，即使反应时间延长，背景也会变高，所以不推荐。

因此，建议调整设备 (荧光观察)的条件。

1.增强激发光的强度。

2.延长曝光时间。

Q5：悬浮和贴壁细胞都可以使用Liperfluo染色吗？是否可以染色固定细胞

A5:悬浮和贴壁细胞，都可以使用。

有实验经验的：HL-60细胞(悬浮细胞)，CHO细胞·SH-SY5Y细胞(贴壁细胞)等，固定的细胞不能染色。

参考文献

细胞种类	诱导剂	抑制剂	Liperfluo终浓度和培养时间	检测仪器	期刊名	出版年	影响因子	论文题目(含原文链接)	开放获取
B16细胞(小鼠黑色素瘤细胞); HT-1080(人纤维肉瘤细胞)	Erastin; RSL3; IFNγ	Ferrostatin-1; Liproxstatin-1	10 μM; 37℃ 30 min or 1h	流式细胞仪	Nature	2019	42.778	CD8+ T cells regulate tumour ferroptosis during cancer immunotherapy	N
HBE(人支气管上皮样细胞)	RSL3	Ferrostatin-1	10 μM; 30 min	荧光显微镜	The Journal of Clinical Investigation	2018	11.864	Pseudomonas aeruginosa utilizes host polyunsaturated phosphatidylethanolamines to trigger theft-ferroptosis in bronchial epithelium	Y
RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)	RSL3	Ferrostatin-1	10 μM; 30 min	荧光显微镜	Nature Chemical Biology	2020	12.587	Redox lipid reprogramming commands susceptibility of macrophages and microglia to ferroptotic death	N
MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)	RSL3	Liproxstatin-1	10 μM; 30 min	荧光显微镜	Nature Chemical Biology	2016	12.587	Oxidized arachidonic and adrenic PEs navigate cells to ferroptosis	N
NCI-ADR/Res (NAR) 人卵巢腺癌细胞	RSL3; Arachidonic Acid	–	10 μM; 30 min	荧光显微镜	Biomaterials	2019	10.317	Triggered ferroptotic polymer micelles for reversing multidrug resistance to chemotherapy	N
4T1细胞(小鼠乳癌细胞)	RSL3	–	10 μM	荧光显微镜	ACS Applied Materials & Interfaces	2019	8.758	Boosting the Ferroptotic Antitumor Efficacy via Site-Specific Amplification of Tailored Lipid Peroxidation	N
BMDM(小鼠骨髓来源的巨噬细胞)	SiO₂ & TiO₂ nanoparticles	–	20 μM	流式细胞仪	Particle and Fibre Toxicology	2017	7.546	SiO₂ and TiO₂ nanoparticles synergistically trigger macrophage inflammatory responses	Y
3T3-L1 adipocytes(小鼠脂肪细胞)	GluOC(未羧基化的骨钙素)	–	–	荧光显微镜	Cell Death and Disease	2018	6.304	Osteocalcin triggers Fas/FasL-mediated necroptosis in adipocytes via activation of p300	Y
Hacat(人永生化角质形成细胞)	长波紫外线(UVA)照射	–	5 μM in PBS; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Free Radical Biology and Medicine	2017	6.170	Blue light-induced oxidative stress in live skin	N
SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)	24S-OHC(人24s羟基胆固醇)	–	–	流式细胞仪	Free Radical Biology and Medicine	2015	6.170	New aspects of 24(S)-hydroxycholesterol in modulating neuronal cell death	N
OEC-M1(人口腔上皮细胞)	Erastin; RSL3; 零价铁(ZVI)纳米颗粒	Lipoxstatin, Ferrostatin-1,10-phenanthroline; DFO	10 μM; 30 min	荧光显微镜	Biomaterials Science	2018	6.183	Assessment of zero-valent iron-based nanotherapeutics for ferroptosis induction and resensitization strategy in cancer cells	N
Murine T cells(鼠T细胞)	NKAP-deficient(NF-κB激活蛋白缺乏)	Ferrostatin-1	10 μM in HBSS; 37℃ 30 min	流式细胞仪	The Journal of Immunology	2019	4.886	Murine T Cell Maturation Entails Protection from MBL2, but Complement Proteins Do Not Drive Clearance of Cells That Fail Maturation in the Absence of NKAP	Y
THP-1(人髓系白血病单核细胞);(1×10⁵ cells/mL)	AAPH(2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐)	H₂ gas(氢气)	5 μM; 30 min	流式细胞仪	Scientific Reports	2016	3.998	Molecular hydrogen regulates gene expression by modifying the free radical chain reactiondependent generation of oxidized phospholipid mediators	Y
PMVECs(肺微血管内皮细胞)	LPS(脂多糖)	Prdx6-D140A-knock-in mice	10 μM; 30 min	荧光显微镜	Lung Cellular and Molecular Physiology	2019	4.406	Genetic inactivation of the phospholipase A2 activity of peroxiredoxin 6 in mice protects against LPS-induced acute lung injury	Y
HepG2(人肝癌细胞)	AAPH(2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐)	–	10 μM; 30 min	荧光显微镜	Journal of Agricultural and Food Chemistry	2019	4.192	Novel Fluorescence-Based Method To Characterize the Antioxidative Effects of Food Metabolites on Lipid Droplets in Cultured Hepatocytes	N
4T1细胞(小鼠乳癌细胞); HT1080(人纤维肉瘤细胞)	WO₃/Pt nanoparticles	–	20 μM; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Nanotechnology	2016	3.551	WO₃/Pt nanoparticles promote light-induced lipid peroxidation and lysosomal instability within tumor cells	N
SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)	AAPH(2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐)	–	20 μM; 37℃ 15 min	荧光显微镜/流式细胞仪	RSC Advances	2012	3.119	A novel fluorescent probe with high sensitivity and selective detection of lipid hydroperoxides in cells	N
Burkitt’s Lymphoma(Burkitt淋巴瘤细胞)	Artesunate(青蒿琥酯); Erastin	DFO; Liproxstatin-1; Ferrostatin-1	5 μM in PBS; 37℃ 30 min	流式细胞仪	Biochemical and Biophysical Research Communications	2019	2.985	Artesunate activates the ATF4-CHOP-CHAC1 pathway and affects ferroptosis in Burkitt’s Lymphoma	N
Horse breed stallions(种马精子)	UV light; Fe	–	1 μM; 37℃ 30 min	流式细胞仪	Animal Reproduction Science	2019	1.660	Effects of media and promoters on different lipid peroxidation assays in stallion sperm	N
Human hair(人头发)	UV radiation	–	–	荧光显微镜	Cosmetics	2018	–	Mechanism of Cuticle Hole Development in Human Hair Due to UV-Radiation Exposure	Y
HeLa(人宫颈癌细胞)	BFA, Erastin	Ferrostatin-1; Liproxstatin-1	5 µM	荧光显微镜	Communications Biology	2018	4.165	Golgi stress mediates redox imbalance and ferroptosis in human cells	Y
THP-1(人髓系白血病单核细胞)	TBHB(叔丁基过氧化氢)	H₂ gas(氢气)	5 µM; 30 min	流式细胞仪	Canadian Journal of Physiology and Pharmacology	2019	1.946	Molecular hydrogen suppresses free radical-induced cell death by mitigating fatty acid peroxidation and mitochondrial dysfunction	N
HEI-OC1(耳蜗毛细胞)	RSL3	DFO; Liproxstatin-1; Ferrostatin-1	5 μM; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Journal of Cellular and Molecular Medicine	2020	4.486	Inhibition of ferroptosis protects House Ear Institute-Organ of Corti 1 cells and cochlear hair cells from cisplatin-induced ototoxicity	Y
SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)	6-OHDA	Ferrostatin-1	5 μM; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Molecular Neurobiology	2020	4.500	Activation of p62-Keap1-Nrf2 Pathway Protects 6-Hydroxydopamine-Induced Ferroptosis in Dopaminergic Cells	Y
HEI-OC1(耳蜗毛细胞);鼠新生耳蜗毛细胞	RSL3	Liproxstatin-1	5 μM; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Oxidative Medicine and Cellular Longevity	2020	5.076	Liproxstatin-1 Protects Hair Cell-Like HEI-OC1 Cells and Cochlear Hair Cells against Neomycin Ototoxicity	Y
BV2 Microglial(小鼠小胶质细胞)	GQDs(石墨烯量子点)	DFO; Liproxstatin-1; Ferrostatin-1	10 μM; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Particle and Fibre Toxicology	2020	7.546	Induction of ferroptosis in response to graphene quantum dots through mitochondrial oxidative stress in microglia	Y
HL-60(人骨髓细胞白血病细胞)	RSL3	–	10 µM; 1 h	荧光显微镜	Cell Death and Differentiation	2020	10.717	Oxygenated phosphatidylethanolamine navigates phagocytosis of ferroptotic cells by interacting with TLR2	Y
Brain slices from LN229^TAZ(4SA)(人脑胶质瘤切片)	CD45-	–	10 μM; 37℃ 4 h	荧光显微镜	Nature Communications	2020	12.121	Neutrophil-induced ferroptosis promotes tumor necrosis in glioblastoma progression	Y
BeWo(人胎盘绒膜癌细胞)	PLA2G6敲除; GPX4敲除	–	10 μM; 37℃ 30 min	荧光显微镜	Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America	2020	9.412	PLA2G6 guards placental trophoblasts against ferroptotic injury	N
B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)	Erastin	–	10 μM; 37℃ 30 min	流式细胞仪	iScience	2020	4.447	Chemically Programmed Vaccines: Iron Catalysis in Nanoparticles Enhances Combination Immunotherapy and Immunotherapy-Promoted Tumor Ferroptosis	Y

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日本同仁化学氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II货号：G263- DOJINDO

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II货号：G263

氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒

GSSG/GSH Quantification Kit II

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特点：

● 细胞、组织样品均可检测

● 操作更加简单

● 试剂盒稳定性高

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100tests

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氧化应激与自由基检测方案

氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II货号：G263

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优势

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注意事项

其他材料

常见问题Q&A

参考文献

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概述

谷胱甘肽 (γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸) 是体内的一种三肽化合物，它参与抗氧化和药物代谢的过程，还是谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽S-转移酶、巯基转移酶等的底物。谷胱甘肽通常以还原型状态(GSH) 存在，但是GSH在氧化应激的作用下会转化为氧化型状态 (GSSG)。因此GSH/GSSG的比值被认为是氧化应激研究的一个重要指标。

优势

1）可以进行氧化型谷胱甘肽（GSSG）、还原型谷胱甘肽（GSH）的分类定量。

2）操作简单，且可以同时检测多个样品。

操作步骤

氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II货号：G263

详见说明书

注意事项

试剂开封后各溶液的保存方法及保存时间

Substrate Working Solution：溶解后在-20℃可保存2个月

GSH Standard Solution：溶解后在-20℃可保存2个月

GSSG Standard Solution：溶解后在-20℃可保存2个月

Enzyme Working Solution：稀释后在4℃可保存2个月

Coenzyme Working Solution：用超纯水溶解后在-20℃可保存2个月

Masking Solution：用乙醇溶解后在4℃可保存2个月

其他材料

酶标仪（405或415 nm）、20 µl和200 µl移液器，多通道移液器、 96孔板、 5-磺基水杨酸 (SSA) 溶液（点击购买）、乙醇

常见问题Q&A

Q1:如何计算GSH浓度？

A1:根据标准曲线得到总谷胱甘肽（GSH+GSSG）的浓度，使用以下公式计算GSH浓度。
GSH浓度=总谷胱甘肽浓度-GSSG浓度×2
GSSG（氧化型谷胱甘肽）相当于两分子的GSH（还原型谷胱甘肽）。
因此，通过将GSSG浓度加倍从而得到GSH浓度。

Q2:是否可以通过添加Masking Reagent来掩盖源自GSSG的GSH？

A2:加入酶/辅酶之后，由GSSG产生的GSH先与DTNB反应，而还原为GSSG。GSSG生成的GSH不会被屏蔽。

Q3:本试剂盒与谷胱甘肽定量试剂盒（货号：T419）有什么区别？

A3:本试剂盒可以分别检测GSSG和GSH，而总谷胱甘肽定量试剂盒（T419）则无法实现。作为氧化应激指标的GSH和GSSG的比例更加受引研究人员关注。

Q4:显色效果弱怎么办？

A4:考虑以下原因：

原因1）本试剂盒的测量范围是0.5 μmol/l及以上，测量样品中所含的谷胱甘肽的量可能小于该值。

对策）本试剂盒无法测量不符合测量范围的样品，请考虑其他方法检测。例如HPLC方法。

也可以通过降低预处理的稀释率或增加样品量来增加检测样品的浓度。

注意：为了加强显色效果而延长显色时间，则无法获得标准曲线。

原因2）可能含有抑制荧光的物质。例如：与SH基团反应的化合物（马来酰亚胺）会干扰测量结果。

对策）由于无法通过预处理等去除这些化合物，因此请在不含有此类物质的情况下再检测。

原因3）反应中的pH值低，有可能抑制显色。

对策）1、测量时，请确保SSA浓度为1％或更低。当SSA浓度为1％或更高时，会抑制显色效果。

2、如果含有其他酸性物质，则在测量前用三乙醇胺等将其中和至pH 7，或将它们稀释至约1％或更低的酸浓度下进行反应。

Q5:该试剂盒可以检测多少样品？

A5:本试剂盒可以进行100次检测（使用1块96孔板）
当n=3时，可以检测9个样品。（样品未染色）
如果仅测量谷胱甘肽的总量，可以检测25个样品。
样品的布局例：通道1～6是GSSG浓度测定，通道7～12是总谷胱甘肽浓度测定。

氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II货号：G263

Q6:样品中有大量谷胱甘肽，如何稀释样品？

A6:用0.5％5-磺基水杨酸（SSA）水溶液稀释。
测量时样品中的SSA浓度应为0.5至1％。
如果SSA浓度高，则反应过程中的pH值会呈酸性，这可能会影响吸光度。

Q7:通过测量GSSG与GSH的比例可以得到什么？

A7:谷胱甘肽通常在体内以还原形式（GSH）存在，
因为它通过刺激（例如氧化应激）转化为氧化形式（GSSG）
GSH与GSSG之比是氧化应激的指标。

参考文献

1) ER Stress Cooperates with Hypernutrition to Trigger TNF-Dependent Spontaneous HCC Development,Cancer Cell,2014,26, 331–343

2) Rhythmic oscillations of the microRNA miR-96-5p play a neuroprotective role by indirectly regulating glutathione levels,Nature Communications,2014,5,3823

3) Phospholipid methylation controls Atg32-mediated mitophagy and Atg8 recycling,The EMBO Journal,2015,34(21),2703–2719

4) Administering xCT inhibitors based on circadian clock improves antitumor effects,Cancer Research,2017,77(23),6603-6613

5) Cold stress-induced ferroptosis involves the ASK1-p38 pathway,EMBO reports,2017,18(11),2067-2078

6) Chloroplast DNA Replication Is Regulated by the Redox State Independently of Chloroplast Division in Chlamydomonas reinhardtii,Plant Physiology,2013,161,2102–2112

7) Oxidative stress inhibits healthy adipose expansion through suppression of SREBF1-mediated lipogenic pathway,Diabetes,2018,67(6),1113-1127
8）Endogenous reactive oxygen species cause astrocyte defects and neuronal dysfunctions in the hippocampus: a new model for aging brain,Aging Cell,2017,16,39–51

9) Ubiquinol-10 Supplementation Activates Mitochondria Functions to Decelerate Senescence in Senescence-Accelerated Mice,Antioxidants & Redox Signaling,2014,20(16),2606-2620

10) Skeletal muscle-specific eukaryotic translation initiation factor 2α phosphorylation controls amino acid metabolism and fibroblast growth factor 21-mediated non-cell-autonomous energy metabolism,

The FASEB Journal,2016,30(2),798-812

11) Riluzole exerts distinct antitumor effects from a metabotropic glutamate receptor 1-specific inhibitor on breast cancer cells,Oncotarget,2017,8(27),44639-44653

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GPX4 Antibody——GPX4抗体货号：GPX4

GPX4抗体

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产品概述

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硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）是铁死亡的主要调节剂，铁死亡是铁依赖性脂质过氧化诱导的程序性细胞死亡的一种形式^（1,2）。GPX4 将脂质氢过氧化物转化为无毒脂质醇，从而防止了铁锈病^（2）。研究表明，硒可增强 GPX4 表达并抑制铁传染性死亡以保护神经元^（3）。另外，某些抗治疗性癌细胞依靠 GPX4 存活。GPX4 的丢失会导致铁死亡，从而防止小鼠肿瘤复发^（4）。此外，由 GPX4 介导的氧化还原稳态对于激活胞质 DNA 感应 cGAS-STING 通路和随后的先天免疫应答^（5）的启动是必不可少的。

1.Wenzel, S.E. et al. (2017) Cell 171, 628-641.e26.

2.Bersuker, K. et al. (2019) Nature 575, 688-92.

3.Alim, I. et al. (2019) Cell 177, 1262-1279.e25.

4.Hangauer, M.J. et al. (2017) Nature 551, 247-50.

5.Jia, M. et al. (2020) Nat Immunol 21, 727-35.

订购指南

品牌	货号	Clonality	Applications	Reactivity	规格	价格	货期
Abcam	ab125066	Rabbit Monoclonal	Flow Cyt (Intra), WB, IHC-P, ICC	Mouse, Rat, Human	10ul	842	1-2周
					40ul	2412
					100ul	3985
	ab41787	Rabbit Polyclonal	WB	Human	100ug	3225	3-4天
Proteintech	67763-1-Ig	Mouse Monoclonal	IF, IHC, WB, ELISA	Human, mouse, rat, rabbit, pig	50ul	1175	3-4天
					100ul	1850
					150ul	2570
Novus	NBP2-75511	Rabbit Monoclonal	WB, IHC, IHC-P	Human、Mouse、Rat、Zebrafish	100ul	3707	4-6周
	NBP2-54979	Rabbit Polyclonal	IHC, IHC-P	Human、Mouse、Rat	25ul	2238
	NBP2-54979	Rabbit Polyclonal	IHC, IHC-P	Human、Mouse、Rat	100ul	5543
	NBP2-76933	Rabbit Polyclonal	WB, Flow, ICC/IF, IHC, IHC-P	Human、Mouse、Rat	100ul	3707
CST	52455S	Rabbit Polyclonal	WB	Human、Mouse、Monkey	100ul	3082	3-4周

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铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen

铁死亡荧光试剂 (Fe2+荧光法)

日本同仁化学胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05- DOJINDO

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

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胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05

胱氨酸摄取能力检测试剂盒

Cystine Uptake Assay Kit

商品信息

储存条件：-20度保存

运输条件：常温

特点：

● 可用荧光酶标仪高通量筛选

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宣传资料

选择数量：

选择规格：

20tests

100tests

价格：

¥1490.00现货（会员请登录查看专享价！）

胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05

产品概述

检测原理

检测实例

与传统方法比较

常见问题Q&A

关联产品

产品概述

胱氨酸(Cystine)是抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)的来源，在细胞内的氧化还原平衡中发挥着重要的作用。在癌症研究领域，Sulfasalazine、Erastin等xCT(胱氨酸/谷氨酸反向转运体)抑制剂可以改变细胞内的氧化应激平衡，进而引发细胞死之一的铁死亡。而在免疫研究领域，据报道，巨噬细胞和中性粒细胞在免疫刺激剂的作用下，xCT的表达会增高并增加细胞内的GSH水平，以平衡自身出于攻击癌细胞目的所释放的ROS。因此，无论是对癌细胞的研究还是免疫细胞的研究都离不开胱氨酸摄取能力这一重要指标。

胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05

检测原理

试剂盒内含的胱氨酸类似物(Cystine Analog, CA)与胱氨酸一样可以通过xCT的转运进入细胞内。细胞裂解后通过添加Reducing Agent还原CA并与检测试剂FOdA特异性反应，生成可产生荧光的物质。[专利申请中]

胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05

检测实例

xCT抑制剂Sulfasalazine, Erastin的抑制效果评价

使用本试剂盒对xCT抑制剂Sulfasalazine和Erastin的抑制效果进行评价。荧光结果显示，两种抑制剂均对胱氨酸的摄取有明显的抑制作用。

胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05

与传统方法比较

以往在胱氨酸摄取检测时一般采用同位素示踪法，下面是本试剂盒与同位素示踪法结果的比较。

胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit货号：UP05

常见问题Q&A

Q1：氨基酸类似物(CA)具体是通过哪种转运体进入细胞内的？

A1：Cystine Analog是通过胱氨酸/谷氨酸转运体(xCT)进入细胞内的。

Q2：目前有检测实绩的细胞有哪些？

A2：下列细胞都有检测实绩：人胶质母细胞瘤细胞, A172

人类肺泡基底上皮细胞, A549

人恶性黑色素瘤细胞, A375

人结肠癌细胞, HCT116

人肝癌细胞, HepG2

人早幼粒白血病, HL60

人纤维肉瘤细胞, HT1080

小鼠胚胎成纤维细胞, MEF

人小细胞肺癌细胞, SBC-5

人胶质瘤细胞, U-251 MG

Q3：氨基酸类似物(CA)进入细胞后会被分解、代谢掉吗？

A3：氨基酸类似物(CA)的构造非常稳定，实验范围内的操作不会被分解或代谢。

Q4：可以用这个试剂盒进行定量检测胱氨酸吗？

A4：本试剂盒不是胱氨酸定量检测试剂盒。

Q5：可以用这个试剂盒对进入细胞内的胱氨酸定量检测吗？

A5：不能定量检测进入细胞内的胱氨酸，本试剂盒是针对细胞摄取胱氨酸能力的数值化检测试剂盒。

Q6：观察不到荧光变化的时候，应该怎么办？

A6：延长CA Uptake solution与细胞的共培养时间(0.5 ~ 1 h)。

Q7：背景荧光较高时，应该怎么办？

A7：环境中可能有未被细胞摄取的胱氨酸类似物残存，用PBS清洗后再进行检测。

Q8：配制CA Uptake solution时，除了不含胱氨酸的无血清培养基以外，还可以使用哪些Buffer？

A8：检测HeLa细胞时，有过使用HBSS或含有0.1% Glucose PBS（+）进行配制的成功实例。

Q9：如何用细胞数对荧光强度进行补正？

A9：可以通过细胞核染色试剂进行补正。也可以使用同仁化学研究所的 Cell Count Normalization Kit (货号C544)进行细胞数补正。

Q10：一般使用哪种孔板比较好？

A10：

下列厂家得孔板有过检测实绩：

公司名/ 产品名/ 货号

Ibidi/ μPlate 96 well ibiTreat black S 15/ Ib89626

AGC techno glass/ EZVIEW Glass Bottom Culture Plate LB 96well/ 5866-096

Thermo Fisher/ 96 Well Black/Clear Bottom Plate, TC Surface, Pack of 10/ 165305

Q11：Cystine uptake solution可以长期保存吗？

A11：CA Uptake solution无法长期保存，请提前计算好用量，务必现用现配。

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产品名	包装	价格	货号
Glucose Uptake Assay Kit-Blue	1 set	3,980	UP01
Glucose Uptake Assay Kit-Green	1 set	3,980	UP02
Glucose Uptake Assay Kit-Red	1 set	3,980	UP03

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铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen

铁死亡荧光试剂 (Fe2+荧光法)

MDA检测试剂盒

Merck Millipore NY4100010尼龙网格滤膜30cm3m41um

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

Merck Millipore NY4100010尼龙网格滤膜30cm*3m*41um

Merck Millipore NY4100010尼龙网格滤膜30cm*3m*41um，尼龙滤膜与各种溶剂相容。提供两种滤膜：表面滤膜（GNWP 和 HNWP），孔径为 0.22 和 0.45µm；编织网格膜（NY…），网格开口为 11 至 180 µm。
技术指标
颜色：白色
表面：光面
可湿性：亲水
灭菌方法：γ 射线或 EO 相容
操作温度：zui大 75 °C。

描述
产品目录编号	NY4100010
描述	尼龙网膜，卷式，亲水，41 µm，30 cm x 3 m

产品信息
过滤器代码	NY41
过滤器颜色	白色
zui高工作温度	100 °C
过滤器类型	网格膜

应用
应用	This is a 30 cm x 3 m Hydrophilic Nylon Net Filter with a 41.0 µm pore size. For use in Collection of algae & cells, particle analysis, large particulate filtration, prefiltration of solvents, paint monitoring.

生物信息
可湿润性	亲水

理化信息
孔径	41.0 µm
孔隙率%	31%

尺寸
过滤器表面	光面
过滤器尺寸	30 cm x 3 m
过滤器直径 (?)	Not Applicable

材料信息
化学	Nylon

包装信息
数量	1

详细说明
应用	过滤膜代码*	孔径（µm）	泡点（bar）	厚度（µm）	水的流速（mL/min/cm²）	开口面积（%）
尼龙膜
除菌过滤，生物分析，溶剂过滤	GNWP	0.22	2.8	170	25	–
水溶液澄清，颗粒去除和分析	HNWP	0.45	2.5	170	75	–
尼龙网格膜
藻类和细胞收集，颗粒分析，大微粒过滤，用于自动化微粒成像系统的背景滤膜，溶剂预过滤，染料监测	NY11	11	NA	65	–	6
NY11	11	NA	65	–	6
NY20	20	NA	55	–	14
NY30	30	NA	65	–	17
NY41	40	NA	50	–	31
NY60	60	NA	50	–	42
NY80	80	NA	75	–	41
NY1H	100	NA	80	–	44
NY2H	120	NA	80	–	49
NY4H	140	NA	120	–	43
NY6H	160	NA	100	–	53
NY8H	180	NA	135	–	47
*对应目录编号的前 4 位

亲水订购信息：

网格开口，um 滤膜直径，mm 数量/包目录编号

尼龙网格膜

41 25 100pk NY41 025 00

47 100pk NY41 047 00

90 50pk NY41 090 00

30cm*3m 1pk NY41 000 10

日本同仁化学MDA检测试剂盒货号：M496- DOJINDO

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MDA检测试剂盒货号：M496

MDA检测

MDA Assay Kit

商品信息

储存条件：-20度保存，避光

运输条件：室温

特点：

● 细胞、组织样品均可检测

● 操作更加简单

● 采用荧光法灵敏度更高

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MDA宣传资料

选择数量：

选择规格：

100tests

价格：

¥990.00现货（会员请登录查看专享价！）

产品概述

试剂盒内含

测定原理

产品特点

实验例

产品概述

丙二醛(MDA)是脂质过氧化物分解后形成的一种化合物。因此，MDA 是检测细胞和组织中脂质过氧化物的最常见的指标之一，在氧化应激、铁死亡等领域的研究中被广泛使用。MDA Assay Kit 可以定量检测样品中的 MDA 浓度，通过硫代巴比妥酸（TBA）与水解产生的 MDA 反应形成的 TBA 复合体的吸光度或荧光强度来定量检测样品中的丙二醛（MDA）。试剂盒中配有抗氧化剂(Antioxidant)，可以防止样品在反应过程中发生不必要的氧化，从而确保获得准确的实验结果。

试剂盒内含

MDA检测试剂盒货号：M496

测定原理

本试剂盒采用经典的TBA法，通过检测MDA/硫代巴比妥酸(TBA)复合体的荧光或吸光度来检测细胞或组织中的MDA浓度。此外，试剂盒中还附带MDA标准溶液，以便通过标准曲线定量检测样品中的MDA。

MDA检测试剂盒货号：M496

产品特点

简化操作步骤

一般的MDA检测试剂盒(TBA法)，作为底物的硫代巴比妥酸(TBA)需要天平称量和高温加热溶解的步骤。而同仁化学研究所的MDA试剂盒中的TBA无需称量和加热溶解的操作，从而减少由于称量等造成的误差，使得实验结果的孔间差更小。同时，还可大幅缩短操作所需的时间。

MDA检测试剂盒货号：M496

细胞、组织样品均可检测

细胞样品通过荧光法检测。组织样品可以根据样品中MDA的含量在荧光法和吸光度法之间自由选择。具体可参考下表。

MDA检测试剂盒货号：M496

实验例

由于Erastin可以抑制xCT（胱氨酸/谷氨酸转运体），是最常见的铁死亡诱导剂之一。使用同仁化学研究所的MDA试剂盒检测Erastin处理的HepG2(人肝癌细胞)中MDA的变化。通过标准曲线(用BCA法蛋白定量校准后)，计算样品中MDA的浓度。可以发现，Erastin处理的细胞中，MDA含量明显上升。

MDA检测试剂盒货号：M496

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活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）

活性氧检测试剂盒

日本同仁化学铁死亡- DOJINDO

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铁死亡

2012 年，哥伦比亚大学的 Stockwell 教授等人将一种铁依赖性细胞死亡命名为铁死亡 *，于 2018 年被细胞死亡命名委员会 (NCCD) 报告为程序性细胞死亡之一。由铁离子依赖性脂质过氧化物的堆积引起的铁死亡已被证实为不同于作为程序性细胞死亡之一的细胞凋亡的细胞死亡途径，并且作为癌症治疗的新靶点而受到关注。它还被证实与各种疾病有关，如神经退行性疾病、中风和肝炎（NASH）。（*S. J. Dixon, B. R. Stockwell et al., Ferroptosis: an iron-dependent form of nonapoptotic cell death., Cell, 2012, 149(5), 1060.）关于铁死亡如何检测、铁死亡的检测指标、高分文献信息等可详见下文对应干货链接。

铁死亡

品名	货号	用途
MDA检测试剂盒	M496	检测细胞或组织中的MDA浓度
胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit	UP05	胱氨酸摄取能力检测
GPX4 Antibody——GPX4抗体	GPX4	检测 GPX4 总蛋白的内源水平
氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II	G263	氧化型/还原型谷胱甘肽定量
Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测	L248	细胞脂质过氧化物检测
活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit）	R252	活性氧检测
二价铁离子检测探针—FerroOrange	F374	细胞内二价铁离子检测
Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒	I291	组织总铁含量及二价铁含量检测
铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen	M489	线粒体内二价铁离子检测
MitoPeDPP试剂	M466	线粒体内脂质过氧化物检测
Glutamine Assay Kit-WST试剂盒	G268	谷氨酰胺的定量检测
Glutamate Assay Kit-WST试剂盒	G269	谷氨酸的定量检测

通路图

铁死亡

铁死亡通路图下载

各类指标

铁死亡检测各项指标方法及对应实验结果，详见：

干货｜细胞铁死亡（Ferroptosis）——细胞死亡的新模式

实验例

在铁死亡研究中测量谷氨酰胺/谷氨酸水平

众所周知，通过蛋白处理抑制xCT时，会引起铁依赖性细胞死亡，称为“ Ferroptosis”，使用蛋白处理后的A549细胞测定了谷氨酸的释放量和细胞内谷胱甘肽的含量。蛋白处理过的A549细胞中的谷氨酸释放减少，并且通过抑制胱氨酸的摄取减少了细胞内谷胱甘肽的量。

铁死亡

铁死亡过程中各指标的波动

铁死亡

1. Mon, E. et al., “Regulation of mitochondrial iron homeostasis by sideroflexin 2”, The Journal of Physiological Sciences, 2019, 69(2), 359–373.DOI: 10.1007/s12576-018-0652-2

2. Takashima, M. et al., “Neuroprotective effects of Brazilian green propolis on oxytosis/ferroptosis in mouse hippocampal HT22 cells”, Food and Chemical Toxicology, 2019, 132, 110669.DOI: 10.1016/j.fct.2019.110669

3. Wang, Y. et al., “PM2.5 induces ferroptosis in human endothelial cells through iron overload and redox imbalance”, Environmental Pollution, 2019, 254(A), 112937.DOI: 10.1016/j.envpol.2019.07.105

4. Yambire, K. et al., “Impaired lysosomal acidification triggers iron deficiency, necrotic cell death and inflammation in vivo”, bioRxiv, 2019,DOI: 10.7554/eLife.51031

5. Kagan, V. et al., “Oxidized Arachidonic/Adrenic Phosphatidylethanolamines Navigate Cells to Ferroptosis”, Nat. Chem. Biol., 2017, 13(1), 81.DOI: 10.1038/nchembio.2238

6. Dar, H. et al., “Pseudomonas aeruginosa utilizes host polyunsaturated phosphatidylethanolamines to trigger theft-ferroptosis in bronchial epithelium”, J Clin Invest. 2018, 128(10), 4639-4653.DOI: 10.1172/JCI99490

7. Totsuka, K. et al., “Oxidative stress induces ferroptotic cell death in retinal pigment epithelial cells”, Experimental Eye Research, 2019, 181, 316-324.DOI: 10.1016/j.exer.2018.08.019

8. Fujiki, K. et al., “Blockade of ALK4/5 signaling suppresses cadmium- and erastin-induced cell death in renal proximal tubular epithelial cells via distinct signaling mechanisms.”, Cell Death Differ. 2019, 26(11), 2371-2385.DOI: 10.1038/s41418-019-0307-8

脂质过氧化物检测

更多脂质过氧化物实验例详见：

如何Get铁死亡-脂质过氧化物实验的正确打开方式？

使用共聚焦显微镜观察L929细胞的细胞内脂质过氧化物的变化。实验的详细信息请参照我们公司的网站。

t-BHP: tert butyl hydroperoxide

<数据提供>

日本北里大学药学部

今井浩孝老师，熊谷刚老师

铁死亡

胞内铁离子检测

铁死亡

<检测条件>

Ex: 561nm Em: 570-620 nm

比例尺：20 μm

谷氨酸、谷胱甘肽等检测

铁死亡

组织样品中的铁离子检测

Iron Assay Kit三大特点

1.经典比色法，操作简单快捷。

2.二价铁和三价铁均可检测。

3.Excel模板自动计算铁浓度。

铁死亡

加标回收实验验证试剂盒准确性

*加标回收率 是指在没有被测物质的样品基质中加入定量的标准物质，按样品的处理步骤分析，得到的结果与理论值的比值。结果越接近100%，说明检测结果越准确。

相关疾病研究

非酒精性脂肪肝

通过铁死亡抑制肝炎

一项使用 NASH 模型小鼠肝脏的研究证实，在脂肪肝开始时，坏死发生在细胞凋亡之前。在更详细的实验中，报道了铁死亡与坏死中脂肪性肝炎的触发有关，并且在铁死亡抑制实验中几乎可以完全抑制肝炎的发作。

Minoru Tanaka, et al., “Hepatic ferroptosis plays an important role as the trigger for initiating inflammation in nonalcoholic steatohepatitis”, Cell Death & Disease, 2019, 10, 449.

神经退行性疾病

溶酶体疾病与铁死亡之间的关联

在使用神经元细胞的实验当中，证实敲低溶酶体蛋白 Prosaposin 之后诱导了铁死亡，并且诱导了脂褐素形成和活性氧的产生，这两个指标也是衰老的特征。

Martin Kampmann, et al., “Genome-wide CRISPRi/a screens in human neurons link lysosomal failure to ferroptosis”, Nature Neuroscience, 2021, 24, 1020

癌症

通过铁死亡控制癌症免疫

发现免疫疗法激活的 CD8 + T 细胞通过促进脂质过氧化和导致铁死亡来促进抗肿瘤作用。该过程被发现是通过免疫疗法抑制胱氨酸的摄取和促进肿瘤细胞脂质过氧化的机制。

Weiping Zou, et al, “CD8+ T cells regulate tumour ferroptosis during cancer immunotherapy”, Nature, 2019, 569, 270

铁

认识到铁在地球生命活动和疾病中的重要性

与铁死亡密切相关的铁研究综述。有关铁动力学、过量铁引起的致癌作用和关联病信息。

名古屋大学大学院医学系研究科　病理病態学講座　生体反応病理学・分子病理診断学　教授　豊國伸哉, Dojin News, 2017, 162, 1

日本同仁化学DAPRed – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D677- DOJINDO

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

DAPRed – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D677
细胞自噬检测试剂盒
DAPRed – Autophagy Detection
商品信息
储存条件：
0-5度保存，避光
运输条件：
室温
特点：

● 操作流程简便

● 与LC3结果高度一致

● 可以动态观察细胞自噬

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产品文献
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选择数量：
1
选择规格：
5nmol
价格：
¥3870.00
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操作简便
活细胞检测
自噬小体检测
线粒体自噬检测（点击查看）

活动进行中产品概述原理试剂概要操作简便实验例DAPRed荧光光谱常见问题Q&A参考文献
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凑单关联产品TOP5

NO.1. DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测

NO.2. Cell Counting Kit-8 细胞增殖毒性检测

NO.3. Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric- 细胞凋亡检测

NO.4. Liperfluo 细胞脂质过氧化物检测

NO.5. Mitophagy Detection Kit 线粒体自噬检测

产品概述

细胞自噬是细胞内损坏的蛋白质或细胞器降解和循环利用的过程。
DAPRed是一种小分子荧光染料，可以用来检测自噬体及自噬溶酶体。由于其特殊的结构，在自噬体形成双层膜结构时染料可以进入其中，并在疏水环境中产生荧光。
DAPRed可以进入自噬体膜而发出荧光；而DALGreen可以在自噬溶酶体产生阶段发出荧光。因此DAPRed，DALGreen可以检测从自噬体的形成到自噬溶酶体的融合以及内容物分解的整个过程。

原理

1622787436478709.png

当形成自噬体膜时，DAPRed可以掺入其中，并在脂溶性环境中产生荧光。

DAPRed的检测结果与细胞自噬标志物LC3的结果有很高的相关性。

1622787557957820.png

试剂概要

使用前，请确认所用仪器可以检测到的荧光特性。

1622787655866132.png

操作简便

操作流程只有一步-加入试剂
无需基因转染。只需向准备好的细胞加入DAPRed染料，即可方便快捷的进行荧光检测。

1612415620431352.jpg

实验例

DAPRed和DAL Green的共染
用自噬体荧光试剂DAPRed和自噬溶酶体荧光试剂DALGreen对HeLa细胞进行共染后，通过饥饿培养诱导自噬。

1622788180693956.png

·结果

在不含氨基酸的培养基中培养的HeLa细胞，DAPRed和DALGreen荧光增强。

·检测条件
DAPRed：EX. 561 nm / Em. 600-700 nm
DALGreen：EX. 488 nm / Em. 500-563 nm
比例尺：20 μm

·自噬诱导条件
用DAPRed和DALGreen染色后的HeLa细胞分别在增殖型培养基和不含氨基酸的培养基中培养5 h后，用共聚焦显微镜观察。

DAPRed荧光光谱

1607288752418470.png

常见问题Q&A

Q1: DAPRed Working Solution的稳定性如何？

A1: 无法长期保存，需要现配现用
Q2: DAPRed DMSO Stocking Solution的稳定性如何？

A2: 配制后请于-20℃保存，一个月内可保持稳定。另外建议根据用量分装保存。
Q3: 推荐使用的滤光片？

A3: 推荐的滤光片如下：
激发波长：500-560 nm

发射波长：690-750 nm

Q4: 如何确定细胞自噬探针DAPRed的最佳浓度？

A4:由于本试剂的特性，如果试剂的浓度太高或太低都会导致诱导自噬的样品组与未诱导自噬的对照组之间的差别不明显。建议参考以下信息摸索试剂的最佳浓度：

探针的最佳浓度根据细胞的种类而不尽相同。以DAPRed为例可以考虑从最低浓度(可以以0.05μmol/l作为参考)开始分别多个梯度至摸索至最高浓度(可以以0.4 μmol/l作为参考)的步骤进行摸索。

1622108968137374.png

参考例

我们公司对HeLa, HepG2, CHO细胞的最佳浓度进行了摸索。DAPRed以下列浓度进行染色，并在无氨基酸的培养基中培养以诱导自噬。下表中红色字体的浓度可明显观察到实验组与空白组的差异。

[HeLa细胞]

1612416674568578.jpg

<检测条件>放大倍率：20倍；激发波长：Ex：561 nm；发射波长：Em：600-700 nm

[HepG2细胞]

1612416807368714.jpg

<检测条件>放大倍率：20倍；激发波长：Ex：561 nm；发射波长：Em：600-700 nm

[CHO细胞]

1612416864229024.jpg

<检测条件>放大倍率：20倍；激发波长：Ex：561 nm；发射波长：Em：600-700 nm

Q5: 自噬有哪些途径？DAPRed可以检测到哪些状态？

A5: 众所周知，自噬根据其分子机制可以分为两种：一种是依赖于ATG5的传统自噬(LC3发生变化），另一种则是非依赖于ATG的选择性自噬（LC3形式的转化并未发生）。
当形成自噬体膜时，DAPRed可以掺入其中，并在脂溶性环境中产生荧光。因此DAPRed可以检测自噬体的状态。

*参考资料：发现新的自噬机制Shigeomi Shimizu

https://www.dojindo.co.jp/letterj/160/review/01.html

文献链接：http://dx.doi.org/10.14348/molcells.2018.2215

▶对于首次检测的细胞类型和实验条件，请参考FAQ[如何确定细胞自噬探针DAPRed的最佳浓度]。

参考文献

No.

检测样品

检测仪器

引用(含链接)

细胞
(HUVEC)

荧光显微镜

X. Chen, X. Yan, J. Liu and L. Zhang, ” Chaiqi decoction ameliorates vascular endothelial injury in metabolic syndrome by upregulating autophagy.”, Am. J. Transl. Res., 2020,12(9), 4902.

细胞
(HeLa)

荧光显微镜

H. Fang , S. Geng, M. Hao, Q. Chen, M. Liu, C. Liu, Z. Tian, C. Wang, T. Takebe, J-L Guan, Y. Chen, Z. Guo, W. He and J. Diao, “Simultaneous Zn2+ tracking in multiple organelles using super-resolution morphology-correlated organelle identification in living cells “, Nat Commun, 2021, 12(1), 109. 10.1016/j.envpol.2019.07.105.

细胞
(HCT116; HCT8)

荧光显微镜

H. Sun, R. Wang, Y. Liu, H. Mei and X. Liu , “USP11 induce resistance to 5-Fluorouracil in Colorectal Cancer through activating autophagy by stabilizing VCP”, J Cancer , 2021, 12(8), 2317.

细胞
(MEF)

荧光显微镜

M. Yagi, T. Toshima, R. Amamoto, Y. Do, H. Hirai, D. Setoyama, D. Kang and T. Uchiumi, “Mitochondrial translation deficiency impairs NAD+-mediated lysosomal acidification”, EMBO J, 2021, doi:10.15252/embj.2020105268.

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线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit
线粒体自噬检测试剂盒

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂
DALGreen – 细胞自噬荧光探针

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂
DAPGreen – 细胞自噬荧光探针

Mtphagy Dye试剂
Mtphagy Dye

LysoPrime Green – High Specificity and pH Resistance
溶酶体染色试剂Green
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日本同仁化学DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676- DOJINDO

发表于2024年12月24日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

DAPGreen – 细胞自噬荧光探针

DAPGreen – Autophagy Detection

商品信息

储存条件：-20度保存，避光

运输条件：室温

特点：

● 操作流程简便

● 与LC3结果高度一致

● 可以动态观察细胞自噬

下载说明书

产品文献

SDS下载

选择数量：

选择规格：

5nmol

价格：

¥3840.00现货（会员请登录查看专享价！）

操作简便

荧光/流式/荧光酶标仪可测

自噬小体检测

线粒体自噬检测（点击查看）

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

活动进行中

产品概述

原理

试剂概要

操作简便

实验例

DAPGreen荧光光谱

常见问题Q&A

参考文献

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产品概述

DAPGreen是一种小分子荧光染料，可以用来检测自噬体及自噬溶酶体。由于其特殊的结构，在自噬体形成双
层膜结构时染料可以进入其中，并在疏水环境中产生荧光。DAPGreen具有很好的细胞透膜性，通过荧光显微
镜可进行活细胞荧光成像，也可使用流式细胞仪进行定量检测。

原理

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

当形成自噬体膜时，DAPGreen可以掺入其中，并在脂溶性环境中产生荧光。

DAPGreen的检测结果与细胞自噬标志物LC3的结果有很高的相关性。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

试剂概要

DAPGreen不仅可以用荧光显微镜检测，还可以使用流式细胞仪进行检测。

同时也实现了用荧光酶标仪进行检测，您可以根据自己的实验条件，使用不同的仪器进行检测。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676 *DAPGreen和DALGreen不能共染

操作简便

操作流程只有一步-加入试剂

只需向准备好的细胞加入DAPGreen染料，即可方便快捷的进行荧光检测。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

实验例

与LC3高度相关
与自噬标准物LC3的细胞共染实验结果的比较。
DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

检测条件：DAPGreen：Ex. 488 nm / Em. 500-563 nm

比例尺：10 μm
将DAPGreen加入已表达tagRFP-LC3的Hela细胞中，用雷帕霉素（Rapamycin）诱导自噬4 h后，用共聚焦显微镜观察DAPGreen和RFP的荧光成像。结果DAPGreen与tagRFP-LC3的染色部位高度一致。

与Lamp-1共染 DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

对已经表达Lamp1-tagRFP的MEF细胞进行DAPGreen共染实验。结果显示，DAPGreen的染色部位与溶酶体膜蛋白标记物Lamp 1的位置高度一致。(比例尺：10 μm)

实验的详细情况请参考如下论文：
“Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.

流式细胞仪的定量分析

自噬诱导后，通过流式细胞仪检测DAPGreen的荧光。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

检测条件：
检测波长：Ex. 488 nm / Em. 500-560 nm

DAPGreen染色HeLa细胞后，在不含氨基酸的培养基中培养0、3和6 h，用流式细胞仪检测。结果，在饥饿诱导3 h后可以检测到更强的荧光信号。

荧光酶标仪的定量检测
用荧光酶标仪检测自噬诱导后DAPGreen的荧光。
DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

检测条件

检测波长：Ex. 450 nm / Em. 535 nm

DAPGreen染色HeLa细胞后，在不含氨基酸的培养基中分别培养0、2、4、6 h，用荧光酶标仪检测。结果饥饿诱导2 h检测荧光，饥饿诱导组的荧光强度大约是对照组的3.5倍。

有关检测操作的详细信息，请参考FAQ“使用荧光酶标仪进行定量分析的检测条件是什么？”。

应用例：荧光显微镜的数值化

96孔板中接种HeLa细胞，并用DAPGreen染色后，分别更换含有血清和不含血清的培养基后继续培养。培养后分别通过视野内的平均荧光强度进行计算。结果发现，不含血清的培养基培养的细胞中DAPGreen的荧光强度更高。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

<检测条件>

Ex：488 nm, Em: 500-550 nm

物镜： CFI Plan Apochromat VC 20x

拍摄模式： Resonant Scanner

XY分辨率：512×512

<使用装置>

荧光显微镜：Nikon 激光共聚焦显微镜A1R

分析软件：NIS-Elements

＜实验步骤＞

1. 将HeLa细胞播种于96孔板中并培养。

2. 去除培养基，用无血清培养基清洗1次。

3. 添加配置好的DAPGreen working solution ，37℃ 培养30 min。

4. 去除培养基，用无血清培养基清洗2次。

5. 诱导自噬的孔中加入无血清培养基，正常孔中加入正常培养基。37℃培养6小时(之后用4%PFA固定)。

6. 荧光显微镜观察。

按上述条件拍摄后，再用100倍物镜放大后拍摄，对细胞内的DAPGreen的荧光信号进行统计。结果显示，含有血清的培养基培养的细胞中平均每个细胞有1.5个信号，而不含血清的培养基培养的细胞中平均每个细胞有27个信号。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

<检测条件>

Ex : 488 nm, Em : 500-550 nm

物镜： CFI Plan Apochromat TIRF 100xC Oil

拍摄模式： Galvano Scanner

XY分辨率：512×512

<使用装置>

荧光显微镜：Nikon 激光共聚焦显微镜A1R

分析软件：NIS-Elements

*本数据由DAPGreen的使用客户友情提供。

DAPGreen荧光光谱

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

激发滤光片：425-475 nm
荧光滤光片：500-560 nm

常见问题Q&A

Q1: DAP Green working solution的稳定性如何？

A1：无法长期保存，需要现配现用

Q2: DMSO stocking solution 的稳定性如何？

A2：配制后请于-20℃保存，一个月内可保持稳定。另外建议根据用量分装保存。

Q3: 推荐使用的滤光片？

A3：激发波长：425-475 nm

发射波长：500-560 nm

利用激光共聚焦显微镜的488 nm激发波长也可以检测，请参考我们公司网站产品页面的实验例。

Q4: 在进行延时成像时有什么要注意的地方吗？

4：为了确定最佳实验条件，请先进行预实验。

由于试剂的特性，刚刚染色后有荧光值升高的趋势，因此请参照以下步骤进行预实验和延时成像。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

1. 预实验

使用对照细胞(不诱导自噬的细胞)。

根据说明书的步骤用 Working Soluiton染色后，用培养基洗涤2次。

加入正常培养基后，观察荧光随时间的变化。

如下图所示，染色后的细胞在荧光强度阶段性降低之后，确认荧光强度变化趋于稳定的时间段（图中的T）。

※条件可能因细胞种类而异。

(参考)

HeLa细胞染色约60分钟后，荧光会趋于稳定(DAPGreen)。

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

2. 延时染色成像

– 细胞用Working Solution染色后，在培养基中37℃培养。

※培养时间为预实验中摸索出的染色时间。验中摸索出的染色时间。

※染色后不要立刻进行自噬诱导。

-培养后进行自噬诱导并开始延时染色成像。

(参考)

用DAPGreen对HeLa细胞进行染色，在正常的培养基中培养60分钟(预实验中摸索的时间)后，进行自噬诱导。

Q5: 如何确定细胞自噬探针DAPGreen的最佳浓度？

A5: 由于本试剂的特性，如果试剂的浓度太高或太低都会导致诱导自噬的样品组与未诱导自噬的对照组之间的差别不明显。建议参考以下信息摸索试剂的最佳浓度：

探针的最佳浓度根据细胞的种类而不尽相同。以DAPGreen为例可以考虑从最低浓度(可以以0.05 μmol/l作为参考)开始分别多个梯度至摸索至最高浓度(可以以0.4 μmol/l作为参考)的步骤进行摸索。

参考例：

我们公司对HeLa, HepG2, CHO细胞的最佳浓度进行了摸索。DAPGreen以下列浓度进行染色，并在无氨基酸的培养基中培养以诱导自噬。下表中红色字体的浓度可明显观察到实验组与空白组的差异。

[HeLa细胞]

<检测条件>放大倍率：20倍；激发波长：Ex：488 nm；发射波长：Em：500-563 nm

[HepG2细胞]

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

<检测条件>放大倍率：20倍；激发波长：Ex：488 nm；发射波长：Em：500-563 nm

[CHO细胞]

DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

<检测条件>放大倍率：20倍；激发波长：Ex：488 nm；发射波长：Em：500-563 nm

细胞种类	DAPGreen浓度
Hela	0.4 μmol/l	0.2 μmol/l	0.1 μmol/l	0.05 μmol/l
HepG2	0.4 μmol/l	0.2 μmol/l	0.1 μmol/l	0.05 μmol/l
CHO	0.4 μmol/l	0.2 μmol/l	0.1 μmol/l	0.05 μmol/l

Q6: 使用荧光酶标仪进行定量分析的检测条件是什么？

A6:以下是使用HeLa细胞进行检测的实验例。

将DAPGreen染色的HeLa细胞在不含氨基酸的培养基中分别培养0、2、4、6 h，用荧光酶标仪检测。

<操作>

1）将细胞接种在透明底的黑板上（HeLa细胞，1.6×10⁴ cells/孔，100 µl/孔）

2）在37°C，5％ CO₂培养箱过夜培养

3）去除上清液后，在培养基中加入100 µl配制好的Working Solution(DAPGreen：0.1 µmo/l）。

4）在37°C，5％ CO₂培养箱培养30 min

5）用100 µl培养基清洗细胞2次

6）加入100 µl饥饿培养基（Waco，Code：048-33575）

7）在37°C下培养各时间点

8）用荧光酶标仪（TECAN，Infinite Pro M200）检测（Ex/Em = 450 nm/530 nm）

（0 h对照组用HBSS代替检测）

<检测条件>波长：Ex. 450 nm/Em. 535 nm

饥饿诱导2 h检测荧光，确认到饥饿诱导组的荧光强度大约是对照组的2.5倍。 DAPGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D676

Q7: 自噬有哪些途径？DAPGreen可以检测到哪些状态？

A7:众所周知，自噬根据其分子机制可以分为两种：一种是依赖于ATG5的传统自噬(LC3发生变化），另一种则是非依赖于ATG的选择性自噬（LC3形式的转化并未发生）。

当形成自噬体膜时，DAPGreen可以掺入其中，并在脂溶性环境中产生荧光。因此DAPGreen可以检测自噬体的状态。

*参考资料：发现新的自噬机制Shigeomi Shimizu

https://www.dojindo.co.jp/letterj/160/review/01.html

文献链接：http://dx.doi.org/10.14348/molcells.2018.2215

▶对于首次检测的细胞类型和实验条件，请参考FAQ[如何确定细胞自噬探针DAPGreen的最佳浓度]。

参考文献

No.	检测样品	检测仪器	引用(含链接)
1)	细胞 (HeLa, MEF)	荧光显微镜	H. Iwashita, H. T. Sakurai, N. Nagahora, M. Ishiyama, K. Shioji, K. Sasamoto, K. Okuma, S. Shimizu, and Y. Ueno, “Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux.”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.
2)	细胞 (HepG2; Huh-7)	荧光显微镜;流式细胞仪	L. Hu, T. Zhang, D. Liu, G. Guan, J. Huang, P. Proksch, X. Chen and W. Lin, “Notoamide-type alkaloid induced apoptosis and autophagy via a P38/JNK signaling pathway in hepatocellular carcinoma cells”, RSC Adv., 2019, 9, 19855.
3)	细胞 (HepG2)	荧光显微镜	Q. Chu, S. Zhang, M. Chen, W. Han, R. Jia, W. Chen and X. Zheng, “Cherry Anthocyanins Regulate NAFLD by Promoting Autophagy Pathway”, Oxid Med Cell Longev., 2019,DOI:10.1155/2019/4825949.
4)	细胞 (HLMVEC)	荧光显微镜	Q. Chu, S. Zhang, M. Chen, W. Han, R. Jia, W. Chen and X. Zheng, “Cherry Anthocyanins Regulate NAFLD by Promoting Autophagy Pathway”, Oxid Med Cell Longev., 2019,DOI:10.1155/2019/4825949.
5)	细胞 (HeLa)	荧光显微镜	F. Hongbao,Y. Shankun, C. Qixin, L. Chunyan, C. Yuqi, G. Shanshan, B. Yang, T. Zhiqi, L. Z. Amanda, T. Takanori, C.Yuncong, G. Zijian, H. Weijiang and D. Jiajie , “De Novo-Designed Near-Infrared Nanoaggregates for Super-Resolution Monitoring of Lysosomes in Cells, in Whole Organoids, and in Vivo.”, ACS Nano, 2019, 13, (12), 1446.
6)	细胞 (HeLa; A375)	流式细胞仪	B. Yang, L. Ding, Y. Chen and J. Shi, “Augmenting Tumor-Starvation Therapy by Cancer Cell Autophagy Inhibition”, Adv. Sci., 2020,DOI:10.1002/advs.201902847.
7)	细胞 (PC12)	荧光显微镜(超分辨率)	Y. Tan, L. Yin, Z. Sun, S. Shao, W. Chen, X. Man,Y. Du and Y. Chen, “Astragalus polysaccharide exerts anti-Parkinson via activating the PI3K/AKT/mTOR pathway to increase cellular autophagy level in vitro.”, Int. J. Biol. Macromol., 2020, DOI:10.1016/j.ijbiomac.2020.02.282.
8)	细胞 (Wild type Hepa 1-6)	荧光显微镜 (用ImageJ软件数值化)	J. Kim, W.Y.Chee, N. Yabuta, K. Kajiwara, S. Nada and M. Okada, “Atg5-mediated autophagy controls apoptosis/anoikis via p53/Rb pathway in naked mole-rat fibroblasts”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 2020, 22, DOI:10.1016/j.bbrc.2020.05.083.
9)	细胞 (小鼠皮肤成纤维细胞)	流式细胞仪	J. Kim, W.Y.Chee, N. Yabuta, K. Kajiwara, S. Nada and M. Okada, “Atg5-mediated autophagy controls apoptosis/anoikis via p53/Rb pathway in naked mole-rat fibroblasts”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 2020, 22, DOI:10.1016/j.bbrc.2020.05.083.
10)	细胞 (HeLa)	荧光显微镜(超分辨率)	Q. Chen, M. Hao, L. Wang, L. Li, Y. Chen, X. Shao, Z. Tian, R. A. Pfuetzner, Q. Zhong, A. T. Brunger, J. Guan and J. Diao, “Prefused lysosomes cluster on autophagosomes regulated by VAMP8”,2021, doi:10.1038/s41419-021-04243-0.

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日本同仁化学DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675- DOJINDO

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DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

DALGreen – 细胞自噬荧光探针

DALGreen – Autophagy Detection

商品信息

储存条件：-20度保存，避光

运输条件：室温

特点：

● 操作流程简便

● 与LC3结果一致性高

● 可以动态观察细胞自噬

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产品文献

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选择规格：

20 nmol

价格：

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荧光/流式均可检测

自噬溶酶体检测

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DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

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原理

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产品概述

细胞自噬是细胞内损坏的蛋白质或细胞器降解和循环利用的过程。

DALGreen是一种可以进入细胞膜检测细胞自噬的小分子脂溶性荧光染料，具有在酸性环境中产生荧光的特性，可以检测到自噬体与溶酶体融合形成的自噬溶酶体。

原理

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

与DAPGreen和DAPRed一样，在自噬体形成的时候染料掺入细胞膜。然后当自噬体与溶酶体融合产生酸性环境时，DALGreen的荧光增强。

试剂概要

DALGreen不仅可以用荧光显微镜检测，还可以使用流式细胞仪进行检测。DAPGreen可以用荧光酶标仪进行检测，

您可以根据自己的实验条件，使用不同的仪器进行检测。

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

操作特点

操作流程只有一步-加入试剂

无需基因转染。只需向准备好的细胞加入DALGreen染料，即可方便快捷的进行荧光检测。 DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

实验例

与LC3共染

对已经表达tagRFP-LC3的MEF细胞进行DALGreen共染实验。结果显示，DALGreen的染色部位与自噬体和自噬溶酶体的标记物LC3的位置高度一致。(比例尺：10 μm)

实验的详细情况请参考如下论文：
H. Iwashita,”Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

与Lamp-1共染

对已经表达Lamp1-tagRFP的MEF细胞进行DALGreen共染实验。结果显示，DALGreen的染色部位与溶酶体膜蛋白标记物Lamp 1的位置高度一致。(比例尺：10 μm)

实验的详细情况请参考如下论文：
H. Iwashita,”Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

ULK1/2敲除细胞的评价

将野生型MEF细胞与已经敲除自噬体膜形成有关的ULK1/2的细胞株一起用雷帕霉素(Rapamycin)和氯喹(Chloroquine)刺激后进行对比实验。结果显示，在野生型细胞中明显观察到荧光增强，而敲除了ULK1/2的细胞中基本观察不到荧光的增强。

实验的详细情况请参考如下论文：
H. Iwashita,”Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

细胞延时成像

用DALGreen染色HeLa细胞后，按照下列条件从培养30分钟开始直至培养6小时一直对细胞染色状态进行观察。

・Nutrient Condition: 增殖型培养基
・Autophagic Condition: 不含氨基酸的培养基

<检测条件>
仪器：激光共聚焦高内涵细胞分筛系统(恒河电机株式会社: CQ1)
荧光滤光片：Ex.405 nm / Em.525/50 nm，倍率：20X

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

DALGreen与其它试剂的长时间染色实验的比较，可进行单一样品随时间变化的长期观察实验。
・由于DALGreen在自噬诱导/抑制剂之前加，所以可以实时观察自噬的进程。另外在不知道自噬诱导/抑制剂的作用时间情况下，与其它试剂相比，用DALGreen更加方便快捷。
每个时间组均需要单独制备样品

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

・MDC(Monodansylcadaverine)等其它试剂必须要在诱导后加，
需要摸索诱导/抑制剂的作用时间，因此需要准备多组实验，操作复杂，耗费更多的时间和实验材料。

与LC3的对比

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

HeLa细胞:①对照组，②饥饿诱导（诱导细胞自噬）组

DALGreen的荧光成像图和细胞自噬因子LC3-Ⅱ表达量结果的对比

结果
DALGreen：饥饿诱导组比Control组荧光增强；LC3-Ⅱ：饥饿诱导组比Control组LC3-Ⅱ表达量增加；
结果表明两者有良好的相关性。

自噬诱导条件
① Control：用培养基培养6小时
② 饥饿诱导：用不含氨基酸培养基培养6小时

DALGreen的显色条件
细胞：HeLa细胞
检测波长：Ex. 488 nm/Em. 500-563 nm
比例尺：20 μm

与MDC的对比

结果

DALGreen和MDC结果：饥饿诱导组均比Control组荧光增强；结果表明两者有良好的相关性。

波长

因为MDC的最大激发波长在紫外区，所以不能用488 nm激发。DALGreen可以采用488 nm激发。

操作

DALGreen：加染料⇒饥饿诱导

MDC ：饥饿诱导⇒加染料

由于DALGreen是在饥饿诱导前加入，因此可以动态观察到细胞自噬的过程。

常见问题Q&A

Q1: DALGreen Working Solution的稳定性如何？

A1: 无法长期保存，需要现配现用

Q2: DMSO Stocking Solution 的稳定性如何？

A2:配制后请于-20℃保存，一个月内可保持稳定。另外建议根据用量分装保存。

Q3:如何摸索DALGreen的最佳浓度？

A3 :由于本试剂的特性，如果试剂的浓度太高或太低都会导致诱导自噬的样品组与未诱导自噬的对照组之间的差别不明显。建议参考以下信息摸索试剂的最佳浓度：

DALGreen的最佳浓度根据细胞的种类而不尽相同。

可以考虑从最低浓度(可以0.1 μmol/l作为参考)开始分别多个梯度至最高浓度(可以4 μmol/l作为参考)的步骤进行摸索。

参考例

我们公司对HeLa, HepG2, CHO细胞的最佳浓度进行了摸索。DALGreen以下列浓度进行染色，并在无氨基酸的培养基中培养以诱导自噬。下表中红色字体的浓度可明显观察到实验组与空白组的差异。

细胞种类	DALGreen浓度
HeLa	4 μmol/l	2 μmol/l	1 μmol/l	0.5 μmol/l
HepG2	4 μmol/l	2 μmol/l	1 μmol/l	0.5 μmol/l
CHO	4 μmol/l	2 μmol/l	1 μmol/l	0.5 μmol/l

Q4: 这个产品和溶酶体染色试剂有什么区别吗？

A4:溶酶体染色试剂会定位于细胞内的溶酶体里。而DALGreen是在进入自噬小体后，当自噬小体与溶酶体结合后，荧光变强。

因此当溶酶体染色试剂和DALGreen共染时，溶酶体染色试剂发出的荧光与自噬小体的部分DALGreen的荧光发生重叠。

本实验的数据，请参考下面论文的Supporting Information (Fig.S5)。

H. Iwashita, “Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.

论文的原文链接在本产品的网站页面上。

网站链接(日语)：

http://dominoweb.dojindo.co.jp/goodsr7.nsf/View_Display/D675?OpenDocument

Q5:推荐使用的滤光片？

A5:激发波长：350~450 nm;
发射波长：500~560 nm;
另外利用激光共聚焦显微镜的488 nm激发波长也可以检测，
请参考我们公司网站产品页面的实验例。

Q6:是否有与自噬相关的蛋白质敲除和评估的实例？

A6:与自噬小体成膜有关的ULK1和ULK2敲除的细胞与野生型细胞饥饿诱导，用DALGreen染色后评价的实例是有的。

实验结果显示，与ULK1/ULK2敲除的细胞相比，野生型细胞中的DALGreen荧光信号增大。这次实验的具体数据请参照下面这篇论文的Supporting Information (Fig. S5)

另外，自噬的标记物LC3-RFP与DALGreen的共染色结果显示，大多数的染色Puncta(斑点，位点)都高度一致。本实验的数据，请参考下面论文的Fig.1。

H. Iwashita, “Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.

论文的原文链接在本产品的网站页面上。

网站链接(日语)：

http://dominoweb.dojindo.co.jp/goodsr7.nsf/View_Display/D675?OpenDocument

Q7:自噬有哪些途径？DALGreen可以检测到哪些状态？

DALGreen在形成自噬体膜时掺入其中，当形成自噬溶酶体时，环境变成酸性，DALGreen荧光增强。因此，DALGreen可以检测自噬溶酶体的状态。

*参考资料：发现新的自噬机制Shigeomi Shimizu

https://www.dojindo.co.jp/letterj/160/review/01.html

文献链接：http://dx.doi.org/10.14348/molcells.2018.2215

▶对于首次检测的细胞类型和实验条件，请参考FAQ[如何确定细胞自噬探针DALGreen的最佳浓度]。

Q8:在进行延时成像时有什么要注意的地方吗？

A8:为了确定最佳实验条件，请先进行预实验。

由于试剂的特性，刚刚染色后有荧光值升高的趋势，因此请参照以下步骤进行预实验和延时成像。

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

※条件可能因细胞种类而异

1. 预实验

– 使用对照细胞(不诱导自噬的细胞)。

– 根据说明书的步骤用Working Soluiton染色后，用培养基洗涤2次。

– 加入正常培养基后，观察荧光随时间的变化。

– 如下图所示，染色后的细胞在荧光强度阶段性降低之后，确认荧光强度变化趋于稳定的时间段（图中的T）。

※条件可能因细胞种类而异。

(参考)

HeLa细胞的话，染色后约60分钟后，荧光确定会趋于稳定(DALGreen)。

DALGreen – Autophagy Detection 细胞自噬检测试剂货号：D675

2. 延时染色成像

– 细胞用Working Solution染色后，在培养基中37℃培养。

※培养时间为预实验中摸索出的染色时间。

※染色后不要立刻进行自噬诱导。

-培养后进行自噬诱导并开始延时染色成像。

(参考)

用DALGreen对HeLa细胞进行染色，在正常的培养基中培养60分钟(预实验中摸索的时间)后，进行自噬诱导。

参考文献

No.	检测样品	检测仪器	引用(含链接)
1)	细胞 (HeLa, MEF)	荧光显微镜	H. Iwashita, H. T. Sakurai, N. Nagahora, M. Ishiyama, K. Shioji, K. Sasamoto, K. Okuma, S. Shimizu, and Y. Ueno, “Small fluorescent molecules for monitoring autophagic flux.”, FEBS Letters., 2018, 592, (4), 559–567.
2)	细胞 (HeLa)	荧光显微镜	T. Sakata, A. Saito and H. Sugimoto, “In situ measurement of autophagy under nutrient starvation based on interfacial pH sensing.”, Scientific Reports., 2018, 8, 8282.
3)	细胞 (HS-MM)	荧光显微镜	Y. Egawa, C. Saigo, Y. Kito, T. Moriki and T. Takeuchi , “Therapeutic potential of CPI-613 for targeting tumorous mitochondrial energy metabolism and inhibiting autophagy in clear cell sarcoma.”, PLoS One., 2018, 13, (6), e0198940.
4)	细胞 (HaCaT)	荧光显微镜	S. Abe, S. Hirose, M. Nishitani, I. Yoshida, M. Tsukayama, A. Tsuji and K. Yuasa , “Citrus peel polymethoxyflavones, sudachitin and nobiletin, induce distinct cellular responses in human keratinocyte HaCaT cells.”, Biosci. Biotechnol. Biochem. ., 2018, 82, (12), 1347.
5)	细胞 (KGN)	荧光显微镜	W. Yuping, M. Congshun, Z. Huihui, Z. Yuxia, C. Zhenguo and W. Liping, “Alleviation of endoplasmic reticulum stress protects against cisplatin-induced ovarian damage.”, Reprod. Biol. Endocrinol., 2018,doi: 10.1186/s12958-018-0404-4.
6)	细胞 (BmN)	荧光显微镜	S. Xue, F. Mao, D. Hu, H. Yan, J. Lei, E. Obeng, Y. Zhou, Y. Quan, and W. Yu, “Acetylation of BmAtg8 inhibits starvation-induced autophagy initiation.”, Mol. Cell Biochem., 2019,doi: 10.1007/s11010-019-03513-y.
7)	细胞 (HeLa)	荧光显微镜	F. Hongbao,Y. Shankun, C. Qixin, L. Chunyan, C. Yuqi, G. Shanshan, B. Yang, T. Zhiqi, L. Z. Amanda, T. Takanori, C.Yuncong, G. Zijian, H. Weijiang and D. Jiajie , “De Novo-Designed Near-Infrared Nanoaggregates for Super-Resolution Monitoring of Lysosomes in Cells, in Whole Organoids, and in Vivo.”, ACS Nano, 2019, 13, (12), 1446.
8)	细胞 (RT-7)	流式细胞仪	E. Sasabe, A. Tomomura, N. Kitamura and T. Yamamoto, “Metal nanoparticles-induced activation of NLRP3 inflammasome in human oral keratinocytes is a possible mechanism of oral lichenoid lesions.”, Toxicol In Vitro., 2020, 62, 104663.
9)	细胞 (骨髓细胞)	荧光显微镜	J. Xia, Y. He, B. Meng, S. Chen, J. Zhang, X. Wu, Y. Zhu, Y. Shen, X. Feng, Y. Guan, C. Kuang, J. Guo, Q. Lei, Y. Wu, G. An, G. Li, L. Qiu, F. Zhan and W. Zhou, “NEK2 induces autophagy-mediated bortezomib resistance by stabilizing Beclin-1 in multiple myeloma.”, Mol Oncol, 2020, DOI: 10.1002/1878-0261.12641.
10)	细胞 (Human L2)	荧光显微镜	Q. Xu, W. Shi, P. Lv, W. Meng, G. Mao, C. Gong, Y. Chen, Y. Wei, X. He, J. Zhao, H. Han, M. Sun and K. Xiao, “Critical role of caveolin-1 in aflatoxin B1-induced hepatotoxicity via the regulation of oxidation and autophagy.”, Cell Death Dis., 2020, 11(1), 6.
11)	细胞 (心肌细胞)	荧光显微镜	L Cui, LP Zhao, JY Ye, L Yang, Y Huang, X.P. Jiang, Q. Zhang, JZ. Jia, DX. Zhang and Y. Huang, “The Lysosomal Membrane Protein Lamp2 Alleviates Lysosomal Cell Death by Promoting Autophagic Flux in Ischemic Cardiomyocytes.”, Front Cell Dev Biol, 2020,DOI:10.3389/fcell.2020.00031.
12)	细胞 (IPEC-J2)	荧光显微镜	Y Yang, J Huang, J Li, H Yang and Y. Yin, “The Effects of Butyric Acid on the Differentiation, Proliferation, Apoptosis, and Autophagy of IPEC-J2 Cells..”, Curr. Mol. Med., 2020, 20(4), 307.
13)	细胞 (成纤维细胞、肾脏上皮细胞)	荧光显微镜	M. M. Ivanova, J. Dao, N. Kasaci, B. Adewale, J. Fikry and O. G. Alpan , “Rapid Clathrin-Mediated Uptake of Recombinant α-Gal-A to Lysosome Activates Autophagy”, Biomolecules , 2020, 10(6), 837.
14)	细胞 (NHEKs)	荧光显微镜	S. Ikeoka and A. Kiso , “The Involvement of Mitophagy in the Prevention of UV-B-Induced Damage in Human Epidermal Keratinocytes “, J. Soc. Cosmet. Chem. Jpn., 2020, 54(3), 252.
15)	细胞 (HeLa)	荧光显微镜(超分辨率)	Q. Chen, M. Hao, L. Wang, L. Li, Y. Chen, X. Shao, Z. Tian, R. A. Pfuetzner, Q. Zhong, A. T. Brunger, J. Guan and J. Diao,”Prefused lysosomes cluster on autophagosomes regulated by VAMP8″, 2021, doi:10.1038/s41419-021-04243-0.

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溶酶体染色试剂Green

在线小工具

实验工具|稀释计算器|摩尔浓度计算器

日本同仁化学Mtphagy Dye试剂货号：MT02- DOJINDO

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Mtphagy Dye试剂货号：MT02

Mtphagy Dye

商品信息

储存条件：0-5度保存，避光防潮，充氮气

运输条件：室温

特点：

● 只需添加小分子量荧光试剂即可轻松检测线粒体

● 可以使用荧光显微镜进行活细胞成像

● 可以与附着的溶酶体染色剂同时染色

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选择数量：

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5μg*3

价格：

¥8350.00期货（会员请登录查看专享价！）

线粒体自噬

注意事项

性质

检测原理

参考文献

规格性状

注意事项

如需检测线粒体自噬，可查看Mitophagy Detection Kit

如您是首次使用Mtphagy染料，建议使用以上试剂盒（内含溶酶体），使用线粒体自噬染料与溶酶体染料共染进行检测

性质

　　线粒体 (Mitochondria) 是细胞中重要的细胞器之一，可以为细胞活力提供能量。近年有报道去极化线粒体的积累引起的阿尔茨海默病 (Alzheimer’s Disease) 与帕金森病(Parkinson’s Disease)，可能与线粒体自噬有关。线粒体自噬是一种清除机制，可以通过自噬，将氧化应激、DNA损伤因素导致功能失调的线粒体隔离包裹成自噬体(Autophagosome)，再与溶酶体 (Lysosome) 融合后降解。本试剂盒内含Mtphagy Dye (用于检测线粒体自噬) 和Lyso Dye (溶酶体染料)。Mtphagy Dye通过化学结合，固定在细胞内的线粒体上，会发出较弱的荧光。当线粒体发生自噬，损伤的线粒体会与溶酶体融合，pH会下降，变成酸性，此时Mtphagy Dye会产生较强的荧光。如想直观观察Mtphagy Dye标记的线粒体和溶酶体的结合，可联合应用试剂盒中的Lyso Dye (标记溶酶体) 进行双染。

首次使用Mtphagy染料时，建议使用包含溶酶体染色试剂（Lyso Dye）的线粒体自噬检测试剂盒（产品货号：MD01），与溶酶体共染色来检测线粒体自噬。

开发者： Dojindo Molecular Technologies, Inc.

检测原理

Mtphagy染料的线粒体自噬检测机制

Mtphagy Dye试剂货号：MT02

有关使用Mtphagy染料的实验数据，请参见线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit（产品货号MD01）

参考文献

1) J. Koniga, C. Otta, M. Hugoa, T. Junga, A. L. Bulteaub, T. Grunea and A. Hohna, “Mitochondrial contribution to lipofuscin formation”, Redox Biology, 2017, 11, 673.
2) K. Kameyama, “Induction of mitophagy-mediated antitumor activity with folate-appended methyl-β-cyclodextrin”, International Journal of Nanomedicine, 2017, 12, 3433.
3) E. F. Fang, T. B. Waltz, H. Kassahun, Q. Lu, J. S. Kerr, M. Morevati, E. M. Fivenson, B. N. Wollman, K. Marosi, M. A. Wilson, W. B. Iser, D. M. Eckley, Y. Zhang, E. Lehrmann, I. G. Goldberg, M. S. Knudsen, M. P. Mattson, H. Nilsen, V. A. Bohr and K. G. Becker, “Tomatidine enhances lifespan and healthspan in C. elegans through mitophagy induction via the SKN-1/Nrf2 pathway”, Scientific Reports, 2017, 7, (46208), DOI: 10.1038/srep46208.
4) H. Iwashita, S. Torii, N. Nagahora, M. Ishiyama, K. Shioji, K. Sasamoto, S. Shimizu and K. Okuma, “Live Cell Imaging of Mitochondrial Autophagy with a Novel Fluorescent Small Molecule”, ACS Chem. Biol., 2017, 12, (10), 2546.
5) Y. Feng, NB. Madungwe, CV. da Cruz Junho and JC. Bopassa, “Activation of G protein-coupled oestrogen receptor 1 at the onset of reperfusion protects the myocardium against ischemia/reperfusion injury by reducing mitochondrial dysfunction and mitophagy.”, Br. J. Pharmacol., 2017, 174, (23), 4329.
6) K. M. Elamin, K. Motoyama, T. Higashi, Y. Yamashita, A. Tokuda and H. Arima, “Dual targeting system by supramolecular complex of folate-conjugated methyl-β-cyclodextrin with adamantane-grafted hyaluronic acid for the treatment of colorectal cancer.”, Int. J. Biol. Macromol., 2018, doi: 10.1016/j.ijbiomac.2018.02.149.
7)S. Ikeoka and A. Kiso , “The Involvement of Mitophagy in the Prevention of UV-B-Induced Damage in Human Epidermal Keratinocytes “, J. Soc. Cosmet. Chem. Jpn., 2020, 54(3), 252.

规格性状

规格性状：

该产品为紫色至品红色固体。

NMR光谱：测试一致

处理条件

1.保存方法：冷藏，遮光，2.氮气填充，请注意吸潮

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溶酶体染色试剂Green

日本同仁化学Mtphagy Dye试剂货号：MT02- DOJINDO

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Mtphagy Dye试剂货号：MT02

Mtphagy Dye

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● 只需添加小分子量荧光试剂即可轻松检测线粒体

● 可以使用荧光显微镜进行活细胞成像

● 可以与附着的溶酶体染色剂同时染色

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线粒体自噬

注意事项

性质

检测原理

参考文献

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注意事项

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首次使用Mtphagy染料时，建议使用包含溶酶体染色试剂（Lyso Dye）的线粒体自噬检测试剂盒（产品货号：MD01），与溶酶体共染色来检测线粒体自噬。

开发者： Dojindo Molecular Technologies, Inc.

检测原理

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Mtphagy Dye试剂货号：MT02

有关使用Mtphagy染料的实验数据，请参见线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit（产品货号MD01）

参考文献

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该产品为紫色至品红色固体。

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自噬

通过自身降解的途径，从而将一些没有用的杂质变废为宝成为营养物质。在饥饿或者化学刺激的情况下，在细胞质中首先会形成隔离膜，待降解的物质逐渐包裹其中，最终形成自噬体。随后溶酶体的外膜会与溶酶体外膜相融合，此时溶酶体中的酸性水解酶发挥作用，开始降解之前自噬体内含物，从而达到自噬目的。动态观察整个自噬流对于反映细胞内的自噬活性举足轻重。

线粒体自噬

细胞自噬

品名	货号	用途
线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit	MD01	线粒体自噬检测试剂盒
Mtphagy Dye试剂	MT02	线粒体自噬

线粒体自噬试剂盒原理：

记载了本产品的检测原理和实验例的论文请看MD01论文实验例中第四篇：Live Cell Imaging of Mitochondrial Autophagy with a Novel Fluorescent Small Molecule

细胞自噬流程图：

自噬试剂原理：

DAPGreen和DALGreen在头部具有末端氨基功能的化学结构（该结构如磷脂酰乙醇胺）该结构的一部分嵌入在疏水膜环境中。

自噬隔离膜在形成中被DALGreen和DAPGreen处理的共聚焦显微镜图像比例尺：20 μm

当自噬体膜形成时，DAPGreen嵌入膜内。嵌入的DAPGreen是一种pH不敏感探针，在亲脂性条件下，其荧光增强。

当自噬体的膜形成时，DALGreen同样会嵌入膜内，DALGreen是一种pH敏感探针，在酸性条件下，自噬体与溶酶体结合后荧光增强。

实验例：

1.DALGreen与LC3的高度相关性

用1 μmol/l的DALGreen染色后，用无氨基酸培养基分别培养HeLa细胞0、2、4、6h。

用20 μm/l抗LC3抗体和抗肌动蛋白抗体检测的LC3 I-和LC3 II的相对表达水平并用免疫印迹分析法验证其相对表达水平。

结果证明DALGreen荧光强度的增加与LC3-I, LC3-lI转化率相关。

2.自噬细胞的荧光成像

用1 μmol/l DALGreen染色后，并用野生型和ULK 1/ULK2 DKO的MEF细胞分别进行处理（或不处理）

并添加雷帕霉素和氯喹8小时后。在ULK1/ULK2双敲除(DKO)MEF细胞中几乎没有观察到DALGreen荧光信号，

对酵母的同源功能有缺陷Atg1蛋白，即使存在氯喹(COL)。DALGreen荧光信号也正确反映了自噬的发生。

3.对自噬细胞抑制处理后的荧光成像

在3-Methyladenine(3-MA)存在的情况下，饥饿HeLa细胞的DALGreen荧光值降低。

样品：5小时饥饿的HeLa细胞，DALGreen:1 μmol/l，3-MA:5 mmol/l，比例尺：20 μm

4.DAPGreen和tagRFP-LC3共染

DAPGreen荧光信号与tagRFP-LC3信号有高度相关性，且DAPGreen和tagRFP-LC3都可以染色活细胞。

样本:tagRFP-LC3表达MEF细胞。DAPGreen: 0.1 μmol/l，比例尺：10 μm

5.DAPGreen和Lamp1-tagRFP共染色

从溶酶体中可观察到大量DAPGreen荧光信号并看到DAPGreen与Lamp 1-tagRFP

(溶酶体染色探针)存在共定位关系。因为DAPGreen不仅染色自噬体，而且也染色自噬溶酶体。

样本:Lampl-tagRFP表达的MEF细胞 DAPGreen: 0.1 μmol/l，比例尺:10 μm

6.DALGreen和tagRFP-LC3共染

几乎所有的DALGreen荧光信号都与LC3存在共定位关系。tagRFP-LC3

不仅染色自噬体也染色自溶酶体，而DALGreen的荧光信号表示细胞中有自噬溶酶体的存在

样本: tagRFP-LC3表达MEF细胞 DALGreen:1 μmol/l，比例尺:10 μm

7.DALGreen和Lamp1-tagRFP共染

几乎所有的DALGreen都与Lamp1-tagRFP共定位。Lamp-tagRFP染色溶酶体，

而DALGreen的荧光信号表示细胞中有自噬溶酶体的存在

样本：Lamp1-tagRFP表达的MEF细胞，DALGreen:1 μmol/l，比例尺：10 μm

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fisher蓝盖瓶

fisher蓝盖瓶 500ml玻璃瓶,10/盒

日本同仁化学Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551- DOJINDO

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Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

Caspase-3检测试剂盒-比色法

Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric-

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· 酶标仪检测，操作简单

· 稳定性好，保存时间长

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细胞凋亡

Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

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产品概述

凋亡相关检测方法

试剂概要

操作步骤

实验例

常见问题Q&A

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产品概述

Caspase是与细胞凋亡密切相关的重要的一组蛋白酶。其中 Caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶，因此 Caspase-3经常被作为细胞凋亡的标志物来进行检测。同仁化学研发的 Caspase-3 Assay Kit-Colorimetric-是一套操作简单的比色法胞内 Caspase-3活性检测试剂盒。与其他市面上的检测试剂盒相比，由于具有更高的灵敏度，因此可以在更短的培养时间内快速检测。通过比较凋亡组细胞和正常组细胞的 pNA吸光度，即可确定 Caspase-3活性的增加倍率。

凋亡相关检测方法

Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

试剂概要

Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

操作步骤

Lysis Buffer的配制

向Lysis Buffer瓶中加入 10 ml Reconstitution Buffer后超声波震荡 2 min。（建议使用注射器添加 Reconstitution Buffer。如不使用注射器，请注意瓶内为真空状态，剥除铝制封口和打开橡胶瓶盖时请小心操作。）

Lysis Buffer配制好后需 -20 保存。

配制好的 Lysis Buffer 在 -20 可稳定保存 1 个月。

经测试 Lysis Buffer 反复冻融 8次以内可正常使用。

Assay Buffer的配制

向Assay Buffer瓶中加入 3 ml Reconstitution Buffer后超声波震荡 2 min。（建议使用注射器添加 Reconstitution Buffer。如不使用注射器，请注意瓶内为真空状态，剥除铝制封口和打开橡胶瓶盖时请小心操作。）

Assay Buffer配制好后需 -20 保存。

配制好的 Assay Buffer 在 -20 可稳定保存 1 个月。

经测试， Assay Buffer 反复冻融 8次以内可正常使用。

Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

实验例

1. 将 Jurkat细胞（ 3.38×106 Cells/ ml）接种到两个 100 mm培养皿中（两个培养皿中分别含

有 0 μmol/ l和 5 μmol/ l Staurosporine的 RPMI培养基并在 5 CO2培养箱中 37 培

养 5小时。

2. 将细胞收集到两个不同的锥形管中并离心（ 300×g 3 min 。

3. 去除上清液后，用 1 ml PBS重悬细胞。

4. 离心（ 300×g 3 min）后去除上清液。

5. 将 Lysis Buffer 200 μl）加入至每个管中。

6. 将两个样品在冰上孵育 15 min。

7. 将两个样品离心（ 10,000×g 1 min）。

8. 将每个样品的上清液转移到新的微管中。

9. 通过 Bradford法定量每个上清液中的蛋白质浓度。

10. 使用 Lysis Buffer将每个样品的蛋白质浓度调节至 1.0mg / ml。

11. 将 Substrate 10 μl Assay Buffer 40 μl）和样品 50 μl）加入至 96孔板中。

12. 37 培养 2 h。

13. 用酶标仪测定 405nm处的吸光度。

Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

常见问题Q&A

Q1:实验结果吸光度低怎么办？

本试剂盒，完全显色时，405 nm检测OD值约为0.5左右。如诱导凋亡后样品的吸光度低于0.1，请确认是否为以下原因。

<原因1>

孵育时间不足。

请延长孵育时间后测定，可过夜培养。

<原因2>

蛋白质量不足。

由于缓冲液中含有DTT，请使用Bradford的方法检测蛋白质含量，并通过增加细胞数量的方法，准备蛋白质浓度为1-3 mg/ml的细胞裂解液，。

<原因3>

Caspase-3活化不足。

Caspase-3激活可能不足。请考虑优化诱导细胞凋亡的条件（药物浓度和治疗时间）。

（阳性对照，可参考使用说明书中的Staurosporine进行诱导。）

Q2:本试剂盒可以检测几个样品？

该试剂盒可检测50 tests。

当复孔以n = 3进行测量时，可以测量15个样品，不包括空白。

Q3:误差很大的原因是什么？

如测量的孔中有气泡，则会增加测量误差。在测量前请确保已去除气泡。

Q4：如何作成标准曲线？

该试剂盒中不包括标准品（p-Nitroaniline）。需要您自行准备，并可按照以下步骤作成校准曲线。

（1）将p-Nitroaniline溶于DMSO中，制备浓度为20 mmol / l的DMSO储存溶液。

（2）用396 µl Lysis Buffer 稀释4 µl p-Nitroaniline DMSO储备液，以制备200 µmol / l的标准品溶液。并将该标准品溶液依次稀释2倍，制备出浓度分别为200、100、50、25、0 µmol / l的标准品溶液。

（3）向每孔中加入10 µl Substrate，40 µl Assay Buffer和50 µl标准溶液。

（4）37°C下孵育2小时。

（5）用酶标仪测量405 nm处的吸光度。

（6）通过试剂中Caspase-3的显色作成p-Nitroaniline含量的标准曲线。

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Caspase-3 Assay Kit -Colorimetric-试剂盒货号：C551

参考文献

1) S. Zhang, J. Zhou, Q. Fan, X. Lv, T. Wang, F. Wang, Y. Chen, S. Hong, X. Liu, B. Xu, L. Hu, C. Zhang, Y. Zhang, “Discovery of hydroxytyrosol as thioredoxin reductase 1 inhibitor to induce apoptosis and G1/S cell cycle arrest in human colorectal cancer cells via ROS generation”,Exp. Ther. Med., 2021, doi:10.3892/etm.2021.10261.

2) B. Wang, Q. Sun, W. Ye, L. Li and P. Jin, “Long non‑coding RNA CDKN2B‑AS1 enhances LPS‑induced apoptotic and inflammatory damages in human lung epithelial cells via regulating the miR‑140‑5p/TGFBR2/Smad3 signal network”,BMC Pulm. Med., 2021, doi:10.1186/s12890-021-01561-z.

3) Z. Lin, S. Yang, Y. Zhou, Z. Hou, L. Li, M. Meng, C. Ge, B. Zeng, J. Lai, H. Gao, Y. Zhao, Y. Xie, S. He, W. Tang, R. Li, J. Tan, W. Wang., “OLFM4 depletion sensitizes gallbladder cancer cells to cisplatin through the ARL6IP1/caspase-3 axis”,Translational Oncology, 2022, doi:10.1016/j.tranon.2021.101331.

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Annexin V, 633/PI凋亡检测试剂盒

Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit

商品信息

储存条件：0-5度保存，避光

运输条件：室温

特点：

· 灵敏度&稳定性高

· 性价比之选。

· 无需荧光补偿调节

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细胞凋亡检测

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细胞凋亡检测试剂盒——Annexin V, 633 Apoptosis Detection Kit货号：AD11

产品概述

细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而在抑癌基因p53出现问题时，凋亡就不会诱导发生，从而导致癌细胞的不断增长。细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。

原理

Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35-36kD的Ca²⁺依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜特异性结合，因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。用红色荧光633标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 是一种核酸染料，PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜，因此Annexin V和PI结合使用，可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。

荧光参数

流式细胞仪检测

1. 加样到流式细胞仪检测，

633：激发波长Ex: 633 nm；

发射波长Em: 650-670 nm。

PI：激发波长Ex: 488 nm；

发射波长Em: 564-606 nm。

2. 633的红色荧光通过633通道(FL4)检测;

PI的红色荧光通过PI通道 (FL2或FL3)检测 (建议使用FL3)。

设定对照

1. 未染色细胞。

2. Annexin V, 633染色细胞 (没有PI)。

3. PI染色细胞 (没有Annexin V, 633)。

荧光显微镜检测

将细胞悬液滴到玻片上，置于显微镜上使用合适的滤光片检测。

* 由于EDTA会对细胞膜的特定部位有损伤，建议使用不含EDTA的胰酶消化贴壁细胞

注意事项

1. Annexin V, 633和PI均对光敏感。所有染色过程和培养过程均需避光。

2. 若细胞收集过程中使用胰酶，需设法去除残留的胰酶，这些胰酶会消化并降解Annexin V, 633，最终导致染色失败。

3. 用 APC和PE通道检测基本不用调节荧光补偿，但是如果细胞中还有其它荧光，例如细胞中有GFP，GFP荧光会影响PI通道的信息采集，需要调节荧光补偿。

参考文献

1. Deregulated lncRNA expression profile in the mouse lung adenocarcinomas with KRAS-G12D mutation and P53 knockout,Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2019, 00:1-11

2. Curcumin Inhibits Growth of Human NCI-H292 Lung Squamous Cell Carcinoma Cells by Increasing FOXA2 Expression,Front. Pharmacol., 2018, doi: 10.3389/fphar.2018.00060

3. UCP2 ameliorates mitochondrial dysfunction, inflammation, and oxidative stress in lipopolysaccharide-induced acute kidney injury,International Immunopharmacology, 2019, 71, 336-349

4. γ-Glutamyl cyclotransferase contributes to endometrial carcinoma malignant progression and upregulation of PD-L1 expressionduring activation of epithelial-mesenchymal transition,International Immunopharmacology, 2019, 106039, doi:10.1016/j.intimp.2019.106039

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